罕见的……Curtobacterium flaccumfaciens眼部感染1例报告

目的

报告一例罕见的细菌性角膜炎黄乳杆菌(C. flacfaciens))感染。

方法与结果

一名24岁男性，眼部接触香蕉铃子汁后出现眼睛疼痛和红肿。他被诊断为感染性角膜炎，并接受了角膜刮痧。随后的培养和分子分析确定致病生物为c . flaccumfaciens。经0.3%环丙沙星局部治疗数周后，角膜炎临床消退。

结论

Curtobacterium flaccumfaciens是一种罕见且可能被误诊的细菌性角膜炎病因。该报告提供了进一步的证据，证明其致病作用不仅在植物，而且在人类角膜，特别是在热带地区。

细菌性角膜炎是一种常见的眼科疾病，也是角膜失明的主要原因。常见的细菌病原体包括葡萄球菌spp。链球菌spp。,假单胞菌，它们在热带气候中发病率较高[1，2]。

引起细菌性角膜炎1例Curtobacterium flaccumfaciens据报道，一名瓦努阿图男子在不小心将香蕉铃汁弄到右眼后被感染。本病例报告探讨了如何c . flaccumfaciens由于实验室条件阻碍最佳生长，可能未被充分诊断，使微生物学家难以从临床样品中分离出这种病原体。在这种情况下，收集角膜刮伤样本后，将生物体培养bbbb24小时。

一名先前健康的24岁瓦努阿图男子在眼睛接触香蕉果壳的白色汁液一天后出现右眼发红和疼痛。这是在昆士兰阿瑟顿高原工作时发生的。他否认与树枝、树叶或土壤有过直接的眼睛接触，也没有戴过隐形眼镜。他表现为右眼刺激和畏光，并伴有过度流泪;除此之外，他的身体是健康的。既往无眼部或全身病史。他没有已知的过敏症，包括乳胶过敏。

经检查，他的双眼视力为20/16。右眼裂隙灯检查发现弥漫性结膜注射和下角膜中周缺损，尺寸为1.5 cm × 1.5 cm，并伴有淡白色前间质浸润。他有轻度前房活动(0.5 +细胞)。眼底扩张检查无明显差异。

进行角膜刮痧，并将样品送去显微镜、培养和敏感性测试。在35°C, 5% CO的有氧条件下₂，成长c . flaccumfaciens结合生化分型，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-ToF MS)对分离物进行质谱指纹鉴定。革兰氏染色显示革兰氏阳性杆菌，菌落运动，无溶血性，光滑。

主要的鉴别诊断是香蕉汁的化学烧伤，因为它的荧光素吸收均匀，如图所示。1．该患者开始经验性抗生素治疗，因为潜在的前基质浸润比化学烧伤更容易提示微生物角膜炎。患者开始使用0.3%环丙沙星滴眼液单药治疗，前24小时每小时一次，后24小时每2小时一次。在48小时的随访中，由于病变对治疗有反应，浸润性和上皮性缺陷的大小都减小，因此更有可能发生微生物角膜炎。局部环丙沙星给药减少至仅醒着时间，并逐渐断奶至每周1滴，持续5周，临床逐渐消退。视力始终保持不变。由于2019冠状病毒病(COVID-19)的限制，最后的随访是通过电话进行的，无法重新检查眼睛，但主观上，患者的眼科症状有了实质性改善，没有进一步的疼痛或敏感。他总共接受了5周的治疗，并在电话随访2周后由验光师提供持续的建议。

前节裂隙灯检查显示下方有均匀的荧光素摄取区

全尺寸图像

Curtobacteriumflaccumfaciens是一种弱革兰氏阳性、可运动的杆状生物，属于微球菌目[3.]。c . flaccumfaciens八种菌株中有一种属于该属吗Curtobacterium;它是研究最少的棒状细菌。的致病性c . flaccumfaciens被认为是低的，通常被认为是一种植物病原体;有记录的植物病例涉及农作物和观赏植物，如菜豆、甜菜、郁金香球茎和一品红，通常会导致枯萎和棕色斑点[4，5，6]。由于它在植物物质中无处不在，因此没有正式描述这种生物与香蕉树之间的联系。本报告因接触香蕉汁而引起的感染性角膜炎是第一个有充分证据的眼部表现c . flaccumfaciens人类感染。到目前为止,Curtobacterium仅从一名34岁结膜炎女性的眼部分泌物中分离出来;然而，对其致病性的讨论并不深入。

唯一一个有充分记录的人类感染这种细菌的病例是一个患有化脓性关节炎的孩子;病原体首先通过革兰氏染色进行表型分离，然后使用加利福尼亚州福斯特市的MicroSEQ500 16S rDNA细菌鉴定试剂盒进行进一步鉴定[3.]。根据467个核苷酸进行了分子鉴定分析，结果表明该细菌序列同源性为99.89%c . flaccumfaciens。与本病例类似，从儿童滑膜组织中分离出黄色革兰氏阳性杆菌，唯一的区别是该菌株不活动。

多份报告指出，该病原体的临床实验室生长具有挑战性，因为最佳生长条件为30°C;然而，平板通常在35-37°C孵育。这可能意味着某些菌株可能无法从标本中分离出来[4，5]。此外，增长的c . flaccumfaciens在复杂培养基上是缓慢的，需要3天才能形成可见的菌落[3.，6]。这种缓慢的增长进一步导致临床环境中的诊断不足，并可能解释尽管农业环境中的暴露率可能很高，但记录在案的人类感染病例却很少。此外，这种病原体的检测可能会受到限制，因为它缺乏纳入商业鉴定系统的数据库，因为它们不是常见的棒状细菌。［3.］

革兰氏染色初步鉴定该病原菌为革兰氏阳性芽孢杆菌，菌落呈淡黄色，有活力，无溶血性，光滑，与Funke等报道的菌落相似。4]。在凯恩斯医院实验室35°C有氧条件下，菌落在马血琼脂和巧克力琼脂上生长48 h。对首次在巧克力琼脂平板上分离的一个菌落进行MALDI-ToF质谱分析，用分离物制备α-氰基-4-羟基肉桂酸(HCCA)基质物质。c . flaccumfaciens通过将其肽质量指纹图谱(PMF)与数据库中的PMF进行比对，对其进行鉴定。在甲酸中进一步制备微生物，研究表明，这提高了MALDI-ToF MS的诊断潜力[7，8]。序列同源性为50.1%c . flaccumfaciens49.9%与产氨乳杆菌(C.氨乳杆菌)．的典型表型特征c . flaccumfaciens包括黄色或橙色色素沉着、氧化酶阳性、运动性、过氧化氢酶阳性、硝酸还原酶阴性、脲酶阴性和强水解的内皮素[4]。

在这种情况下，培养显示对环丙沙星敏感，抑制区大小为27 mm。单药治疗的快速临床反应进一步证实了这一点。病原菌对万古霉素(25 mm)、四环素(28 mm)、达托霉素(31 mm)和庆大霉素(29 mm)均敏感。这种菌株对青霉素有抗药性。抗菌药物敏感性为15CurtobacteriumFunke等报道分离菌株50%和90%的最小抑制浓度(mic)均大于1 μg/ml。大环内酯类药物(阿奇霉素除外)和利福平的mic≤0.03 μg/ml。所有菌株万古霉素的mic均低于2 μg/ml [4]。这些发现表明c . flaccumfaciens可用多种常见眼科抗生素有效治疗。因此，感染这种微生物与良好的预后相关，定义为眼部症状的完全解决，正如本病例所观察到的那样。然而，如果不及时治疗，微生物角膜炎可能导致慢性角膜炎症和瘢痕形成、巩膜感染延伸、不规则散光、永久性视力下降、角膜穿孔、眼内炎和失明。

表型鉴定的结论性水平可能受到没有敏感性报告这一事实的限制c . Ammoniigenes也被隔离了。为了评估灵敏度，必须进行校准;然而，由于这种病原体很少从环境中分离出来，CBH实验室无法设定特定的敏感区。另一个限制是PMFs的实验室间可重复性，因为PMFs依赖于样品的质量并受样品制备技术的影响。

从香蕉汁感染角膜炎的报告是第二个最充分的临床表现c . flaccumfaciens一个人的感染。本病例报告以及化脓性关节炎病例报告可以提高热带地区工人对病原体的认识。它的检测受到诊断能力的限制，但目前临床实验室的分子技术，如MicroSEQ500 16S rDNA细菌鉴定和MALDI-ToF质谱，将有助于在人类中发现更多病例。MALDI-ToF质谱是一种快速、可靠和具有成本效益的方法，用于鉴定临床样品中的微生物，以确保开始适当的抗菌治疗。该系统可以鉴定罕见的分离株，如c . flaccumfaciens，通过将它们的pmf与数据库中的参考pmf进行比较。这突出了维护一个包含多种物种的多种菌株的参考pmf的广泛数据库的重要性。

了解引起感染性角膜炎的不同病原体对于确保适当的抗生素治疗以预防视力损害和降低患者发病率非常重要。这在热带农村地区和发展中国家尤其重要，因为那里有许多年轻的劳动者收割水果。通常，工作人员没有佩戴适当的眼镜和设备来保护他们免受热带地区特有病原体的侵害。自c . flaccumfaciens具有多种常见的眼科抗生素敏感性，如果临床怀疑为微生物角膜炎，应开始使用敏感抗生素进行经验性治疗。

在临床文献中记录这些人类感染病例可能有助于在临床标本中发现更多属于该属的菌株，并有助于发展进一步的调查技术。通过这项研究和对不同病原体的认识，临床医生可以更好地有针对性地进行药物治疗，以防止因感染性角膜炎而增加的死亡率和潜在的视力威胁。

不适用。

Timothy Kalas医生(眼科PHO)。

没有收到任何资金或赠款支助。

作者及单位

1. 凯恩斯基地医院，凯恩斯市滨海大道165号，QLD, 4870，澳大利亚

   波林Mallick

贡献

在撰写病例报告和审定提交的版本方面，作者作出了重大贡献。提交人同意亲自对案件报告负责。作者阅读并批准了最后的手稿。

相应的作者

对应到波林Mallick．

伦理批准并同意参与

不适用。

发表同意书

患者已同意描述其眼部状况;报告中没有列入任何确定因素。

相互竞争的利益

请注意，作者没有财务披露。

病人的同意

患者口头同意在保持其隐私的同时将其临床细节纳入案例研究。

出版商的注意

伟德体育在线b施普林格《自然》杂志对已出版的地图和机构的管辖权要求保持中立。

开放获取本文遵循知识共享署名4.0国际许可协议，该协议允许以任何媒介或格式使用、共享、改编、分发和复制，只要您适当地注明原作者和来源，提供知识共享许可协议的链接，并注明是否进行了更改。本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的知识共享许可协议中，除非在材料的署名中另有说明。如果材料未包含在文章的知识共享许可中，并且您的预期用途不被法律法规允许或超过允许的用途，您将需要直接获得版权所有者的许可。如欲查阅本许可证副本，请浏览http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/．

转载及权限