2018年5月，乌干达西南部发生与处理死牛肉有关的皮肤炭疽疫情

背景

炭疽热是一种由细菌引起的人畜共患传染病炭疽杆菌．人类通过接触受感染的动物或动物产品而感染皮肤。2018年5月6日，在基鲁胡拉地区的一个农场，三头牛突然死亡。不久之后，基鲁胡拉区的一名副县长接到同一地区有人感染怀疑皮肤炭疽的报告。据报道，这些病人参与了屠宰和食用死牛的肉。我们进行了调查，以确定疫情的严重程度，确定与疾病相关的暴露，并提出基于证据的控制措施。

方法

我们对家庭食用牛肉的人进行了回顾性队列研究。我们将2018年5月1日至26日在基鲁胡拉区居民中发生的一例疑似人皮肤炭疽病例定义为新的皮肤病变(例如丘疹、囊泡或焦痂)。确诊病例是一名疑似病例，病变检测为阳性炭疽杆菌通过聚合酶链式反应(PCR)我们通过在Engari健康中心检查病历和在社区积极寻找病例来确定病例。

结果

在队列中的95人中，22人为病例患者(2例确诊，20例疑似，0例死亡病例)，73人为非病例家庭成员。疫情曲线显示，从5月6日屠宰死牛开始，有多次点源接触。在食用牛肉的家庭中，参与屠宰(RR = 5.3, 95% CI 3.2-8.3)、剥皮(RR = 4.7, 95% CI = 3.1-7.0)、清理废物(RR = 4.5, 95% CI = 3.1-6.6)和携带肉类(RR = 3.9, 95% CI = 2.2-7.1)增加了感染风险。

结论

这次皮肤炭疽爆发是由于处理受感染的动物尸体引起的。我们向农畜水产部建议，加强对兽医炭疽菌的监测，防止人们食用突然死亡的牲畜尸体。”我们还建议卫生部在疫情爆发期间为社区成员配备一线抗生素。

炭疽热是一种由细菌引起的人畜共患传染病炭疽杆菌（炭疽杆菌)，并透过接触动物及动物产品，例如肉、皮及皮而传染给人类[1]。据报告，每年约有2万至10万例人炭疽病例，大多数发生在贫困或农村地区，这些地区的牲畜疫苗接种率通常较低。此外，有6400万贫穷的畜牧农民生活在炭疽热的危险地区。由于牲畜的疫苗接种率很高，该病在发达国家很少见[2]。

根据接触和传播途径的不同，人类炭疽感染可能是皮肤感染、吸入感染、注射相关感染或胃肠感染。皮肤炭疽是最常见的形式，潜伏期为1-7天。这种类型的炭疽是最不危险的，然而，如果不加以治疗，可能会致命，病死率高达20% [3.]。

乌干达过去曾报告在人类、牲畜和野生动物中爆发炭疽热。这些疫情主要报告在一些地区。人们通常在乌干达西部、东部和北部饲养牲畜[4，5，6]。撒哈拉以南非洲地区牲畜的疫苗接种率很低，为0-6%，因此牲畜感染炭疽热的风险很高[2]。此外，死于炭疽热的动物尸体常被当作食物食用或处置不当，因此人类感染的风险和孢子持续接触牲畜的风险很大[7]。

2018年5月6日，乌干达基鲁胡拉区卡佐县恩加里县的一名农民向恩加里县县长报告了3头牛的突然死亡。据报道，农场的工人打开了尸体，屠宰了肉，然后卖给了恩加里和邻近的卡诺尼县的商人。2018年5月12日，恩加里县县长收到关于出现与皮肤炭疽相一致症状的人员的警报。人类病人在各种接触死牛后出现症状。来自乌干达公共卫生研究金项目、国家动物疾病诊断和流行病学中心、农业、畜牧业和渔业部、卫生部以及乌干达病毒研究所的一个现场流行病学家小组前往基鲁胡拉区，调查和确定疫情的严重程度，确定与疾病相关的暴露，并建议循证控制措施。

研究区域

调查是在乌干达西南部的基鲁胡拉区进行的。1;使用量子地理信息系统2.18.23版本设计)。该地区是乌干达养牛走廊地区的一部分，这是一个从乌干达西南部延伸到东北部的广阔地区，以牧区为主[8]，主要的经济活动包括畜牧业(牛、山羊和绵羊)和农业。

案例定义和案例查找

我们将疑似皮肤炭疽病例定义为2018年5月1日至26日居住在基鲁胡拉区恩加里县的患者中存在皮肤病变(例如丘疹、囊泡或焦痂)。我们将确诊炭疽病例定义为临床样本(皮肤病变、囊泡或血液)检测为阳性的疑似病例炭疽杆菌通过聚合酶链式反应(PCR)为了确定病例，我们访问并审查了受影响县的Engari保健中心和私人诊所的医疗记录。在社区卫生工作者的帮助下，我们在社区进行了积极的病例发现，并更新了热线名单。此外，我们还收集了人口学特征和症状表现的信息。

描述性流行病学分析

我们按人、地点、时间和临床特征描述病例。利用乌干达统计局的人口数据，我们按性别、年龄组和村庄计算了发病率。我们还按症状出现日期、年龄、死亡日期和村庄描述了患病牲畜。其他农场也报告了各种牲畜的死亡，包括奶牛和一只山羊，尽管它们与任何病例都没有关联。我们就牲畜死亡前的症状采访了牲畜主人。

假设一代

我们采访了22名住进Engari保健中心的病人。我们询问了2018年5月1日至26日在基鲁胡拉区与奶牛和山羊等牲畜的各种接触情况。

回顾性队列研究

我们进行了一项回顾性队列研究，因为家庭中接触生肉的可能性是随机的，因为除了婴儿之外，所有成员都可能接触过生肉。因此，所有收到死牛肉的家庭成员组成了一个队列。我们使用结构化问卷来收集人口统计学特征(年龄、性别和职业)和潜在风险。我们将有效暴露期定义为症状出现前1-12天(即皮肤炭疽的最短潜伏期和最长潜伏期之间)。

实验室调查

我们收集了10具尸体(9头牛和1头山羊)的眼睑组织和兽皮标本，其中包括3头被牵连的牛。为了在野外测试动物标本，我们使用了InBios活性炭疽检测(AAD)快速测试(InBios，http://www.inbios.com)，一种横向流动检测包膜多肽炭疽杆菌。AAD快速测试是一种即时测试，最初是作为人类吸入性炭疽的诊断辅助而开发的。它已显示出有希望的结果，用于作为推定鉴定的现场试验炭疽杆菌在野外的动物尸体中，只供调查或研究使用[9，10，11，12]。我们通过在野外采集皮肤标本进行拭子取样。根据InBios (S. Raychaudhuri, InBios, pers)提供的标准方案，我们在现场对从尸体上收集的组织和皮肤拭子样本进行了AAD快速测试。通讯，2016年5月10日)。简单地说，组织样本悬浮在600µL无菌磷酸盐缓冲盐水(PBS)中，并涡旋10秒。反复移液后，将10µL应用于AAD快速测试盒。对于皮肤拭子渗出样品，我们将10µL液体直接转移到盒中，不含PBS。

在乌干达病毒研究所(恩德培，乌干达)按照标准方案，在Stratagene MX3000P PCR机器上对所有现场样本进行了验证性实时PCR (qPCR)检测[12]。标本随后运往美国疾病控制和预防中心(亚特兰大，乔治亚州，美国)进行培养、qPCR和免疫组化验证性检测。处理后的组织和皮肤拭子样本接种到羊血琼脂或心脏灌注液中，然后在37ºC下孵育24小时。使用QIAGEN血液迷你试剂盒(https://www.qiagen.com）.用实验室反应网络的RT-PCR对得到的DNA进行检测炭疽杆菌如前所述[11]。我们处理了9头奶牛和1只山羊的福尔马林固定组织样本(耳朵和/或眼睑活检)，将它们包在石蜡中，并用苏木精和伊红染色，百合-特沃特革兰氏染色和Warthin星空银染色。我们使用小鼠单克隆抗体进行免疫组织化学分析炭疽杆菌使用免疫碱性磷酸酶聚合物体系的细胞壁和胶囊，如前所述[13，14]。

跟踪前向和环境调查

我们走访了那些被宰杀的死牛和死山羊的家庭，以收集有关这些肉和其他部分是如何分配的信息。我们走访了9个报告有病例的村庄，并观察了放牧牲畜的牧场外观以及是否有牲畜死亡。我们还观察了肉类的不同卖点，并询问了受影响地区的牲畜流动和交易情况。

数据管理与分析

我们在Microsoft Excel中管理数据，在Epi Info 7.2中进行分析。进行了基本的分析，以获得频率和比例。我们从副县总部获得了行政区域的人口数据，并用它来计算攻击率。我们计算风险比以确定与炭疽感染相关的危险因素。

我们鉴定了22例皮肤炭疽病例。未见有胃肠炭疽症状或体征的患者。20例(91%)病例为男性;没有死亡病例。病例患者来自20个农场，均在恩加里县。病例多集中在恩加利县北部。20例(91%)病例的职业与畜牧业有关。病例患者的平均年龄为27岁[标准差±14(范围4-64)]。所有患者至少有一种皮肤症状;68%的患者有皮肤痂。2）.受影响村庄的总体发病率为3.9/ 1000(表2)1）.20-39岁病例患者(AR = 7.8/1000)受影响最大。男性受影响程度(AR = 7.3/1000)高于女性(AR = 0.69/1000) (p < 0.0001)。在8个受影响村庄中，中位数发病率为3.5/1000(范围1.2-9.2)。

病例发生于2018年5月9日至21日(图2)。3.）.所有22例(100%)病例患者报告接触死牲畜。在乌干达，为肉类销售准备的牲畜尸体要经过几道工序。这些措施包括去掉头并打开胴体(“屠宰”)，去除胴体的皮肤(“剥皮”)，去除内脏/废物，如内脏(“清洗胴体”)，以及将胴体切成碎片(“切割”)。在胴体被切成块后，屠夫购买肉块并将它们带到他们的屠宰场或肉店，在那里他们进一步将肉切成公斤和半公斤块出售给消费者(“屠宰出售”)。除了报道的牲畜死亡之外，我们还听说同一副县的不同农场也有其他牲畜死亡。

在22例病例中，14例(64%)参与了5月6日发现的三头死亡奶牛的剥皮和清理尸体。13人(59%)携带从这些牛身上割下的肉，10人(45%)屠宰肉出售。总体流行曲线显示了两次点源暴发。第一批病例中的人于5月6日参与屠宰了三头牛中的头两头，而第二批病例中的人于5月9日参与屠宰了第三头死牛的肉(图。3.）.

回顾性队列研究结果

在我们的回顾性队列研究中，我们招募了95人。屠宰(RR = 5.3, 95%CI 3.2-8.3)、剥皮(RR = 4.7, 95%CI 3.1-7.0)、清洗胴体(RR = 4.5, 95%CI 3.1-6.6)和携带死牛肉(RR = 3.9, 95%CI 2.2-7.1)增加了皮肤炭疽的风险(表2)2）.

环境评估结果

受影响社区成员反映，他们经历了长达6个多月(2017年11月至2018年4月)的旱季，没有降雨[17]。为应对降雨，2018年2月28日至3月2日在Rupyani村建造了一座中央山谷大坝，用于集水;据报道，牛和山羊都喝了大坝提供的水库里的水。该大坝由一名32岁的牧民挖掘，他于2018年3月10日出现与皮肤炭疽相符的伤口，并于3月15日死亡。据受影响社区的农场主说，死者在多个农场挖了水坝，但在访问下一个农场之前没有采取标准的安全措施，比如给他的橡胶靴消毒。

相反，由于旱季，农场里的牲畜在干燥的牧场上吃草。据该副县安全官员称，2018年5月6日至25日，20个农场报告了45只动物死亡，这些农场因干旱而遭受植被损失。旱季结束后不久，2018年4月4日至7日下了10毫米大雨[15，16]。2018年5月6日，雨后28天，Rupyani村有三头牛死于疑似炭疽热。

社区成员报告说，这些牛肉的售价不到每公斤1美元，不到正常牛肉售价的一半。大约800名受感染人员，包括参与处理死牛及其产品的人员。食用受感染奶牛肉的人每天接受两次暴露后预防治疗(环丙沙星;儿童250毫克，成人500毫克，2018年5月8日至30日期间一个月内服用)。这本来可以控制疫情，减少炭疽病例的数量。

实验室结果

我们从基鲁胡拉区4个受影响农场的10头牲畜尸体中收集了样本，包括1头山羊和9头奶牛。8例标本经培养、RT-PCR和/或IHC阳性。所有8个阳性样本最初经AAD快速检测均为炭疽热阳性(表2)3.）.

我们调查了一起与处理死牛及其产品有关的皮肤炭疽疫情。参与加工死牛的人患皮肤炭疽的风险增加。人类和牲畜的几个临床样本检测呈阳性炭疽杆菌．尽管这些动物的肉被用于消费，但没有明显的胃肠道炭疽病例发生。

人类感染炭疽热的主要原因是直接或间接接触受感染的动物产品，而动物群体感染炭疽热的危险因素是宿主易感性、干旱后的大雨和低水平的牧场，因此动物在靠近地面的地方放牧[1]。这些因素很可能同时影响了动物和人类炭疽热的爆发。最近对乌干达爆发炭疽热的调查也发现，炭疽热与处理突然死亡的动物肉有关[4，6，17]。

在这次疫情期间，病例患者包括农民、屠夫和牧民。所有患者均在症状出现前四天与牲畜有过接触。与牲畜的接触包括剥皮、屠宰、搬运肉和清洗动物尸体。这些角色主要由男性主导，这就解释了为什么在炭疽疫情期间，男性通常是受影响最大的亚人群[4，6，18]。

这次炭疽热爆发期间没有人员死亡。大多数病例患者在调查时正在接受治疗，其他暴露者接受了暴露后预防。地区工作队的迅速反应解释了为什么没有人死亡。皮肤炭疽如不治疗，通常是致命的(3.）.

与人类接触的主要来源是处理突然死亡的动物尸体。尽管《乌干达疾病法》指出，在任何患病动物或疫情爆发期间都不应屠宰/出售动物肉，但该国大多数社区都严重违反了这一规定[19]。然而，在报告疫情的该国西部地区，95%的家庭以牲畜为生。因此，农民可能会试图通过出售死动物肉来弥补潜在的损失，即使他们知道潜在的风险。可能需要其他方法来阻止这种做法，例如对死于炭疽的动物进行赔偿，以成功地避免未来的疫情爆发。

有社区报道称，涉案奶牛的肉比正常肉类卖得更便宜。尽管食用了这种肉，但没有胃肠道炭疽病例的报告。有可能确实发生了病例，但由于胃肠道炭疽热的非特异性体征和症状而未被报告或诊断[3.，20.，21]。胃肠道病例减少的另一个可能解释是，接触后预防措施的迅速实施可能成功地防止人们在接触受感染的尸体后出现炭疽症状[21]。此外，所涉肉类在明火上熏制了约60分钟，并煮了90分钟。这可以预防在Kween区暴发调查期间观察到的胃肠道感染[4]。考虑到所有因素，接触主要发生在处理突然死亡动物的尸体和肉的过程中。

由于缺乏对病例的认识和识别，对人和动物中的炭疽热的监测具有挑战性。有些人可能经历过轻微的、非特异性的炭疽体征和症状，但在病例发现过程中没有发现。这可能导致了对疫情范围的低估。

我们报告一例皮肤炭疽爆发与处理被证实感染的牲畜尸体有关炭疽杆菌．我们建议对疫区副县及周边地区的所有动物进行疫苗接种，并安全处理死亡动物。此外，我们建议卫生部和农业、畜牧业和渔业部调查乌干达各地潜在的炭疽热热点，在该疾病流行的地区为动物接种疫苗，并教育公众食用死因不明的动物肉的风险。在多部门利益攸关方合作的情况下，采用“同一健康”方针可促进这一进程。

公共卫生行动

在调查期间，我们在受影响的社区提供健康教育，强调食用死因不明的死亡动物的肉类的风险，收集疑似人类和动物炭疽病例的样本进行确认测试，并为所有食用死牛肉的人提供接触后预防措施。此外，我们还对受灾副县的农民进行了安全处置动物尸体的培训。

该研究数据属于乌干达公共卫生奖学金项目。不过，在乌干达公共卫生研究金方案的允许下，通讯作者可在合理的要求下提供该报告。

基于“增大化现实”技术:

攻击速度

疾病预防控制中心:

疾病控制中心

LFA:

横向流动试验

NADDEC:

国家动物疾病诊断和流行病学中心

聚合酶链反应:

聚合酶链反应

PHFP:

公共卫生奖学金计划

或者:

优势比

进行的:

乌干达病毒研究所

我们感谢基鲁胡拉地区兽医和卫生官员在调查期间提供的支持。我们感谢乌干达公共卫生研究金方案为使调查取得成功提供的技术指导。我们感谢乌干达病毒研究所对所有样本进行检测并及时公布结果。最后，我们感谢Syamal Raychaudhuri (InBios)提供的AAD侧流式磁带。

疫情调查得到了总统艾滋病紧急救援计划(PEPFAR)的支持，通过美国疾病控制和预防中心合作协议编号GH001353-01，通过马凯雷雷大学公共卫生学院，卫生部乌干达公共卫生奖学金项目。其内容完全由作者负责，基本上不代表美国疾病控制和预防中心、马凯雷雷大学公共卫生学院或卫生部的官方观点。

作者及隶属关系

1. 乌干达公共卫生研究金方案，坎帕拉，乌干达

   angela Musewa, Bernadette Basuta Mirembe, Fred Monje, Doreen Birungi, Carol Nanziri, Freda Loy Aceng, Steven N. Kabwama, Benon Kwesiga和Alex Riolexus Ario

2. 乌干达坎帕拉卫生部

   Alex Riolexus Ario

3. 国家动物疾病诊断和流行病学中心，农业、畜牧业和渔业部，乌干达恩德培

   Deo Birungi Ndumu

4. 美国疾病控制和预防中心新发和人畜共患传染病国家中心，美国亚特兰大

   凯特琳·m·科萨布姆，大卫·洛，卡莉·b·科尔顿，钟·k·马斯顿，罗宾·a·斯托达德和亚历克斯·r·霍夫马斯特

5. 乌干达病毒研究所，乌干达恩德培

   Luke Nyakarahuka和Joshua Buule

6. 美国疾病控制和预防中心全球健康保护处，亚特兰大，美国

   Bao-Ping朱

贡献

AM、DB、BMB、FM、DB、CN、FLA和SNK构思和设计了这项研究，AM、BMB和SNK参与了数据收集、清理和分析。AM和BMB, B-PZ实施了研究。AM和BPZ分析了数据。JB、CMC、DL、CBK、CKM、RAS参与实验室样品分析。AM主导了原稿的开发。AM、BMB、FM、DB、CN、FLA、SNK、BK、DBN、LN、JB、CMC、DL、CBK、CKM、RAS、ARH、ARA、B-PZ均负责最终内容。B-PZ对研究设计、数据分析、解释和最终手稿的准备做出了贡献。所有作者都对论文的终稿做出了贡献。所有作者都阅读并批准了最终的手稿。

相应的作者

对应到Angella Musewa．

伦理批准并同意参与

此次调查是为了应对一起突发公共卫生事件(炭疽疫情)，因此被确定为非研究。疾病控制与预防中心全球卫生中心负责科学的副主任办公室还确定，这项活动不是人体研究，其主要目的是公共卫生实践或疾病控制活动(具体而言，是流行病或地方病控制活动)。在本次调查中，我们获得了病例患者和其他18岁以上受访社区成员的口头知情同意。社区保健工作人员将在社区发现的病例转介到Engari保健中心接受进一步治疗。参与者必须理解并遵循面试程序。问卷被妥善保管，以避免受访者的个人资料泄露给非调查成员。

发表同意书

不适用。

相互竞争的利益

作者宣称他们之间没有利益冲突。

出版商的注意

伟德体育在线施普林格自然对出版的地图和机构从属关系中的管辖权主张保持中立。

开放获取本文遵循知识共享署名4.0国际许可协议，允许以任何媒介或格式使用、分享、改编、分发和复制，只要您对原作者和来源给予适当的署名，提供知识共享许可协议的链接，并注明是否有更改。本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创作共用许可协议中，除非在材料的信用额度中另有说明。如果材料未包含在文章的创作共用许可协议中，并且您的预期使用不被法定法规所允许或超出了允许的使用范围，您将需要直接获得版权所有者的许可。如欲查看本牌照的副本，请浏览http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/．

转载及权限