microRNAs在急性胰腺炎中的新挑战:进展和治疗

急性胰腺炎(AP)是临床常见的腹部急症，发病率高且逐年增加。严重AP易引起全身炎症反应综合征、多器官功能障碍等并发症，导致较高的住院率和病死率。目前尚无针对AP的特异性治疗方法，因此，我们仍需了解AP的确切发病机制，才能有效治愈AP。随着转录组学的兴起，从生物基因组的非蛋白编码区域转录的microRNAs (miRNAs)等RNA分子被发现在基因表达调控中具有重要意义，参与了多种疾病的发生发展。越来越多的证据表明，miRNAs作为调控rna，可以调控胰腺腺泡坏死和凋亡以及局部和全身炎症，在AP的发生发展中发挥重要作用，进而可能在AP的诊断和治疗中发挥重要作用。因此，本文就miRNAs与AP关系的研究现状进行综述。

急性胰腺炎是一种非常常见的消化系统急性疾病[1]以胰腺腺泡细胞坏死和局部及全身炎症反应为特征[2，3.］．AP发病率为每10万人13-45人，并呈上升趋势[4］．AP的总死亡率约为5%。AP发展为重症急性胰腺炎(SAP)时，死亡率高达20-40%，严重危及人们的生命健康[5，6，7］．早期AP可通过镇痛、营养支持和蛋白酶抑制剂等联合治疗治愈。然而，如果不及时干预，AP的快速发展将导致SAP，导致严重并发症，甚至全身多器官功能衰竭，危及患者生命。由于常规治疗方法疗效有限，缺乏有效的治疗靶点，患者预后往往较差[8］．随着高通量测序技术的快速发展，研究人员发现microRNA (miRNA)干预可以改变相关生理功能，引起炎症细胞浸润、自身免疫性疾病、癌症等疾病[9，10］．mirna在炎症中的作用为AP的治疗提供了新的方向，靶向mirna影响AP的进展和治疗是目前的研究热点。为此，本文就miRNA在AP中的作用机制研究及miRNA在AP治疗中的潜在应用进行综述，为AP的诊断、预后评估及靶向治疗提供理论参考。

作为一种小的非编码rna, miRNAs长度约为19-25个核苷酸，在表观遗传学中起着重要的调控作用。成熟序列多位于非编码RNA的内含子、外显子或pre-mRNA内含子[11］．miRNAs通过靶向靶基因的3'UTR，控制mRNA的翻译过程或加速mRNA的降解，最终调控靶基因的表达[12］．研究表明，单个miRNA通过靶向不同的mrna，包括磷酸酶和紧张素同源物(PTEN)、核因子κ - b (NF-κB)、无翅/β-catenin (Wnt/β-catenin)和Janus激酶/信号转导器和反式激活器(JAK/STAT)，调控人体内多条信号通路。miRNAs广泛参与生物体的各种细胞活动，包括细胞发育、分化、代谢和凋亡[11]，在炎症、肾损伤和肿瘤等多种疾病的发生和发展中起着重要作用[13］．

研究发现，炎症参与了人体内许多疾病的发生发展，如肝硬化、胰腺癌、糖尿病、类风湿关节炎等[14，15，16］．炎症细胞和炎症因子参与炎症的发生发展，但调控炎症的相关分子机制尚不清楚。随着对miRNA功能的了解，miRNA被发现在炎症因子和炎症细胞的产生中发挥重要作用。例如，Let-7adf通过调节Tet甲基胞嘧啶双加氧酶2/去泛素化酶A20 (TET2/A20)促进m1型巨噬细胞的炎症反应、代谢活性和白细胞介素(IL)-6的产生[17，18］．miRNA-93可介导toll样受体4 (TLR4)/NF-κB信号通路，减少炎症因子肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、IL-1β和IL-6的产生;减少炎症;改善细胞凋亡[19］．此外，一些mirna发挥促炎症作用，如miR-34a [21]， miR-27a [22]， miR-200a [23]， miR-495-3p [24]和miR-124-3p [25]，而另一些则发挥抗炎作用，如miR-21 [20.]， miR-138 [26]， miR-342-3p [27]， miR-873a-5p [28]， miR-146a [29]， miR-542-3p [30.]， miR-193b-3p [31]， miR-140-5p [32]和miR-27a-3p [33］．影响炎症细胞和炎症因子产生的mirna的研究总结见表1．miRNAs参与炎症介导的过程可以干预炎症性疾病的进展，有效改善患者的预后。mirna在炎症中的独特机制有望为快速发展的炎症性疾病(如AP)提供新的治疗靶点。

虽然大多数AP患者病情轻，病情自限性强，但至少有20-30%的AP患者在短时间内发生SAP，且没有更好的治疗方法，最终导致预后不良[8，34］．研究表明，mirna介导的信号通路干预降低了AP的炎症反应和胰腺腺泡细胞的凋亡，从而影响AP的进程[35，36］．本节介绍了AP中mirna相关机制的研究进展。mirna调控AP的机制如图所示。1．

miRNA/NF-κB与AP

NF-κB作为一种刺激转录因子，调控免疫、炎症等影响细胞生长、分化和凋亡的过程，在炎症性疾病和癌症中发挥重要作用[37，38］．研究发现NF-κB通过促进炎症因子的转录而加剧AP的进展[39］．众所周知，miR-9作为一种调节剂可以促进或抑制肿瘤进展，例如在肝癌和胰腺癌中[40，41］．前期研究表明，miR-9可通过调控NF-κB影响炎症过程。在青紫素处理的AR42J细胞中，miR-9的表达降低，细胞内炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高，与凋亡相关的Bax和cleaved caspase 3和9也上调。miR-9过表达导致上述因子水平降低，减少AR42J细胞炎症和凋亡。通过生物信息学和双荧光素酶分析发现，miR-9通过靶向成纤维细胞生长因子10 (FGF10)调控NF-κB通路，影响相关炎症因子和凋亡因子的表达，从而削弱青紫素治疗AP的过程[35］．与炎症相关的巨噬细胞可产生各种炎症介质和细胞因子，如IL-6、IL-8、TNF-α等，对局部组织甚至器官造成损伤。巨噬细胞的激活可能在AP的发生发展中起着至关重要的作用。既往研究发现牛磺酸诱导的AP细胞模型可激活NF-κB和p38 MAP激酶(p38 MAPK)信号通路[42］．在本实验中，牛磺酸石胆酸(TLC)处理的AR42J细胞上清液显著激活巨噬细胞NF-κB活化水平。进一步的研究表明，外泌体或其他囊泡携带的miRNAs与巨噬细胞的激活密切相关。通过相关生物信息学和qRT-PCR分析发现，差异表达的miRNAs主要通过TNF受体相关因子6-TGF-beta活化激酶1/MAP3K7结合蛋白2-转化生长因子beta活化激酶1-NF-κB诱导激酶/IκB激酶(TRAF6-TAB2-TAK1-NIK/IKK)-NF-κB通路参与巨噬细胞的激活，包括miR-668、miR-3594-3p、miR-24-3p、miR-483-5p和miR-3541，但还需要进一步的实验来验证这一假设[43］．总之，靶向miRNA/NF-κB可能能够有效阻止AP的发生过程，特别是联合巨噬细胞等炎症细胞，为SAP合并全身炎症反应综合征的治疗提供新的途径，值得未来进一步研究。

miRNA/TGF-β与AP

由于TGF-β在炎症、免疫反应、细胞分化增殖等方面的突出作用，研究者开始广泛研究其与AP的关系。既往研究报道，抑制TGF-β在AP小鼠模型中的表达可有效缓解AP的进展，为后续研究提供了理论基础[44］．已知miR-216a在胰腺中高表达。为了探究TGF-β在AP中的具体机制，Zhang等建立了青紫素诱导的AP小鼠模型，发现TGF-β表达上调。TGF-β抑制剂治疗后，血清淀粉酶、脂肪酶、促炎因子TNF-α和IL-6水平明显低于未治疗组。然后用不同浓度的TGF-β处理AR42J细胞。RT-PCR分析证实TGF-β以剂量依赖的方式增加miR-216a的表达，并使用在线预测工具(Targetscan 5.1, miRanda和PicTar)预测miRNA的下游靶基因。进一步的实验证实，miR-216a通过靶向调控PTEN和Smad7激活PI3K/AKT和TGF-β信号通路，促进AP的进展[36］．长期以来，大黄素在国内被广泛应用于AP的治疗，但其确切的作用机制和药物作用的靶点尚未阐明。既往研究发现高温要求A (HTRA)可以有效阻止TGF-β1成熟。HTRA/TGF-β1介导的炎症信号可能参与了胰腺腺泡细胞损伤的过程[45，46］．Xiang等通过体内外实验证实大黄素可降低牛磺胆酸钠(STC)处理的AP胰蛋白酶阳性细胞数量、淀粉酶的释放以及炎症介质TNF-α、IL-6和IL-1β的表达水平，这些作用是通过调控HTRA/TGF-β1信号通路实现的。随后，生物信息学分析发现miR-30a-5p是该信号通路的上游调控分子，并通过双荧光素酶检测报告等实验得到验证[47］．这些研究为大黄素的广泛应用和治疗AP提供了新的方向。

miRNA/炎症细胞和AP

受损的胰腺腺泡细胞通过损伤相关分子模式(DAMPs)释放炎症信号，产生大量趋化因子、粘附分子和细胞因子，从而激活并招募大量淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞。炎症细胞向受损部位的迁移进一步加剧炎症反应[48，49］．在这一过程中，miRNAs起着重要的作用。产生il -17的CD4+ T辅助性(Th17)/调节性T (Treg)比例失衡与各种自身免疫性和炎症性疾病有关[50］．这一比例的增加会导致大量细胞因子的增加，加重AP的进展。胰腺的损伤会导致Th17细胞的聚集，形成恶性循环。研究发现miR-155可诱导炎症细胞产生TLR信号，促进全身炎症反应。为了进一步探索miR-155与Th17/Treg比值之间的关系，Wang等人从AP患者中分离出CD4+ T细胞，过表达miR-155，使用流式细胞术发现IL-17的百分比显著增加⁺细胞;此外，通过WB证实miR-155下调了细胞因子信号1抑制因子(suppressor of cytokine signaling 1, SOCS1)的表达，表明miR-155促进了Th17细胞的产生，抑制了SOCS1的表达。随后使用TargetScan软件和双荧光素酶实验验证SOCS1是miR-155调控Th17细胞产生的直接靶基因，体内实验验证了上述结论。因此，靶向miR-155/SOCS1可以有效干扰AP的炎症反应[51］．此外，Song等发现miR-361-5p通过靶向核因子IA (NFIA)和hes家族bHLH转录因子1 (Hes1)，促进Th17细胞分泌IL-17A，加重AP，这些结果进一步加深了Th17细胞与AP的联系[52］．如前所述，AP中巨噬细胞的激活可通过NF-κB通路信号通路介导，参与该过程的miRNAs包括miR-668和miR-3594-3p [43］．目前，中性粒细胞与AP之间关系的研究较少。Dey等研究表明，miR-29a/b1缺失会加重AP小鼠胰腺损伤，损害胰腺再生，这与miR-29a/b1缺失导致中性粒细胞等炎症细胞大量浸润和激活，促进IL-6、IL-10、TGFβ1等细胞因子产生的研究结果一致。tgf β1介导的胰腺纤维化密切相关，但具体调控机制仍需深入研究[53］．miRNAs与炎症细胞之间的连接可能有效地干扰AP的恶性循环。

miRNA/自噬和AP

自噬作为一种保护细胞的机制，可以清除受损、老化和无功能的细胞器或大分子，为细胞的生长和增殖提供能量。然而，自噬损伤与炎症、神经退行性疾病和肿瘤等多种疾病密切相关[54，55］．研究表明，AP中腺泡细胞胰蛋白酶原的过度激活、细胞器功能异常、炎症激活等都与自噬功能受损有关，但具体机制尚不清楚[56，57］．由于miRNAs在AP中的重要作用，因此了解AP的发病机制是否涉及自噬过程的调控是很重要的。研究人员通过将AVV-miR-155和AVV-miR-155海绵注射到青紫素诱导的AP小鼠模型中，观察了miR-155对AP的影响。结果显示，注射AVV-miR-155后，胰腺组织中MAP3K7结合蛋白2 (TAB2)的表达降低，与AVV-miR-155海绵组的结果相反，说明miR-155调控了TAB2的表达。TAB2表达的升高抑制了Beclin-1水平的升高，阻碍了自噬小体的形成，而miR-155过表达增加了Beclin-1的表达，导致p62过度积累，细胞质空泡化(微管相关蛋白轻链3 (LC3 II)水平升高)，最终加重了自噬损伤程度，促进了AP的进展。这一结果在已建立的SAP小鼠模型中得到验证，敲除miR-155显著减少了SAP小鼠胰腺和肺部的病理损伤[58］．近年来，人们发现miR-92b-3p作为调控RNA参与多种细胞行为，包括增殖、迁移、凋亡和自噬。Sun等人发现，在自噬体形成过程中，miR-92b-3p通过靶向肿瘤坏死因子受体相关因子-3 (TRAF3)调控磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶3 (MKK3)-p38信号通路抑制AP自噬。在青紫素处理的AR42J细胞中，miR-92b-3p的表达水平下降，而与TRAF3形成相关的Beclin-1和LC3 II的表达水平升高。敲低过表达的miR-92b-3p或TRAF3可导致Beclin-1和LC3 II的表达水平下降。双荧光素酶实验显示，miR-92b-3p通过与TRAF3 mRNA的3'UTR结合影响蛋白质翻译，并影响下游基因的表达。随后相关分子生物学技术证实miR-92b-3p通过调控TRAF3/MKK3-p38信号通路影响AP自噬体相关蛋白的形成，抑制AP的进展[59］．mirna与自噬的调控关系为阐明AP的发病机制和开发靶向自噬的治疗方法提供了理论依据。然而，还需要进一步的研究。

miRNA/坏死和AP

与凋亡相反，坏死依赖于受体相互作用蛋白激酶1 (RIP1/RIPK1)和受体相互作用蛋白3 (RIP3)的参与，与AP、缺血再灌注损伤、神经病变等多种病理情况有关[60，61］．既往研究发现，坏死主要表现在高剂量青紫素诱导的AP小鼠模型中，很少观察到凋亡。坏死程度与胰腺损伤的严重程度密切相关[62］．为了研究致癌miR-21是否能促进坏死的发生，研究者建立了AP WT小鼠模型并获得了相应的胰腺组织切片。结果显示，WT小鼠比miR-21 konckdown组表现出更明显的胰腺水肿和腺泡细胞坏死。敲低组CD11b阳性细胞数量减少，明显影响胰腺单核细胞和巨噬细胞的浸润，最终减轻AP的严重程度。免疫荧光实验也证实了这一结论。此外，miR-21的沉默可以保护小鼠免受TNF-α诱导的全身炎症反应综合征(SIRS)的影响，这一过程包括沉默miR-21以增加caspase 8的活性，然后下调RIP1/RIP3的表达以抑制微粒体的形成[63］．Hu等建立了急性坏死性胰腺炎(ANP) SD大鼠模型。通过miRNA芯片和RT-PCR，发现ANP中miR-19b的表达上调。这一结果与牛磺石胆酸3-硫酸二钠盐(TLC-S)处理的AR42J细胞的结果一致。miR-19b的表达水平与胰腺腺泡细胞坏死率呈正相关，从而影响AP的进展[64］．在另一项研究中，具有抑癌作用的黄芩苷可显著降低AP的坏死程度。这一过程是通过miR-15a靶向丝裂原活化蛋白激酶激酶4 (MAP2K4)/c-Jun n端激酶(JKN)信号通路实现的[65］．miRNA与坏死之间的调控联系有望为AP提供新的治疗靶点。相关miRNA的研究综述及其在AP过程中的功能作用见表2．

早期诊断和准确评估患者当前病情的严重程度，有利于AP的治疗，减少并发症的发生和住院时间。虽然目前有一些生物标志物，如血清淀粉酶和脂肪酶，以及影像学方法(CT、MRI等)诊断AP，但仍没有单一的金标准来预测AP的严重程度[66]，尤其是在病人入院后48小时内。然而，一些AP评分表，如Ranson标准和APACHE II评分，由于操作复杂，无法达到这一目标。由于miRNA在AP发生和发展中的关键作用，可能成为早期诊断和准确预测AP严重程度的生物标志物。Liu等人收集了中国南昌12名AP患者和3名健康个体的血清样本，并对其总miRNA进行了微阵列分析。他们发现SAP和MAP病例之间存在几种差异表达的miRNAs，包括miR-92b、miR-146b-5p和miR-7。随后的RT-PCR定量分析证实，下调的miR-92b、miR-10a和miR-7可用于AP的早期诊断。此外，在SAP和中度急性胰腺炎(MAP)患者中，miR-551b-5p的表达差异显著(p < 0.005)，且与血清钙水平和并发症发生率相关(p < 0.05)，表明miR-551b-5p对预测AP的严重程度具有重要意义[67］．血管功能障碍是AP的严重并发症，可引起严重的器官损害。因此，反映血管内皮功能障碍的差异表达miRNAs可用于预测AP的严重程度[68，69］．另一项研究通过比较SAP和MAP中miRNAs的差异表达谱，证实与内皮特异性相关的miR-551-5p和miR-126a-5p在SAP中高表达，且与AP的严重程度密切相关(AUC分别为0.716，敏感性69.2%，特异性72.6%，p < 0.001和AUC 0.748，敏感性60.0%，特异性87.1%，p < 0.001) [70］．微阵列分析发现，SAP与伴有甘油三酯的中重度急性胰腺炎(MSAP)患者血清miRNAs表达存在显著差异。与健康对照组相比，miR-24-3p、miR-222-3p、miR-361-5p、miR-1246和miR-181a-5p在高甘油三酯诱导的急性胰腺炎(HTAP)组中表达差异，血清样本检测显示这些mirna与炎症因子(降钙素原(PCT)、IL-1β、IL-6)相关。ROC工作曲线证实，这些mirna可以准确评估HTAP的进展，但还需要进一步的实验验证[71］．肺损伤是SAP的严重并发症，早期预测对改善患者预后尤为重要。Lu等的生物信息学分析发现，SAP急性肺损伤(ALI)患者中有5个miRNAs (hsa-miR-22-3p、1260b、762、23b和23a)较无ALI的SAP患者明显上调，7个miRNAs (hsa-miR-550a*、324-5p、484、331-3p、22-3p、140-3p和342-3p)表达水平下降。qRT-PCR验证了这一结果，但调控的分子机制仍需深入研究[72］．此外，miRNAs对AP的预后预测也具有重要的参考价值。Li等评估了miR-146a和miR-146b在AP中的价值，发现在SAP、MSAP和MAP患者中，miR-146a和miR-146b的表达水平在SAP患者中最高，且与Ranson评分、APACHE II评分、SOFA评分和c -反应蛋白(CRP)水平密切相关。miR-146a和miR-146b的增加伴随着SAP患者住院死亡风险的增加。然而，未来还需要更大的样本量和更多的数据来证实这一发现[73］．综上所述，这些研究结果表明，miRNA与AP的早期诊断、严重程度评估和预后密切相关，有望在AP的综合治疗中发挥重要作用。miRNA分子标志物与AP的早期诊断、预后和严重程度评估相关的研究汇总见表3.．

AP仍然是对症治疗。虽然采取抑酸、抑酶、消炎药、补液等措施可以起到一定的作用，但效果相对较慢。特别是早期干预不及时，严重并发症和长时间住院是不可避免的[81］．随着单个miRNAs在AP进展中的作用被逐一揭示，特别是在远处器官相关损害中的作用，针对miRNAs的AP治疗开始被广泛研究。可直接或间接靶向治疗AP及其并发症的相关miRNAs如图所示。2．

miRNAs与单纯性AP的治疗

miRNA作为直接靶标

miRNAs作为一种调控RNA，其在AP进展中的作用机制为AP靶向治疗提供了研究基础。异常自噬是AP进展的重要组成部分，如何抑制这一异常过程已成为研究热点。Miao等建立了青紫素处理的AR42J细胞模型，发现miR-148a表达下调。这一结果也出现在AP小鼠胰腺组织中，过表达miR-148a后细胞增殖水平升高。相应胰腺组织用苏木精-伊红(HE)染色，检测髓过氧化物酶(MPO)表达。发现过表达miR-148a的胰腺组织中，mpo阳性细胞数量、腺泡细胞变性程度、炎症细胞浸润坏死、细胞内液泡面积均降低。后续研究发现，过表达miR-148a可降低自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1、自噬相关基因4c (ATG4c)和自噬相关基因7 (ATG7)的表达水平，该过程通过IL-6/STAT3信号通路介导，从而改善AP小鼠胰腺组织的病理评分[10］．与癌症密切相关的miR-92b-3p也被发现在AP中发挥重要作用。研究者建立了AP细胞模型，检测到促炎因子TNF-α和IL-6以及自噬标记蛋白Beclin1和LC3-II/I的表达增加。miR-92b-3p的过表达逆转了这种升高，从而改善了AP的炎症和自噬。进一步的实验表明，miR-92b-3p的过表达导致TRAF3的降低，进而抑制了MKK3-p38信号通路相关蛋白(p-MKK3, MKK3，磷酸化p38 (p-p38)和p38)的表达，最终抑制了AP的进展[59］．在另一项研究中，TRAF3被miR-399-3p调控。miR-399-3p降低炎症相关因子(TNF-α， IL-1β和IL-6)和凋亡因子(C-caspase3和Bax)的表达水平，最终抑制青紫素处理的AR42J细胞的炎症和凋亡[82］．此外，Ge等人发现，维持正常胰腺腺泡功能的miR-802丰度降低，促进腺泡-导管化生(ADM)的产生和腺泡细胞增殖，最终导致AP并加剧胰腺损伤。而提高miR-802的表达水平可有效抑制该事件的发生和发展[83］．这些研究为治疗AP提供了新的潜在靶点。

中药相关活性化合物

中医以其独特的理论体系和有效的治疗方法，成为世界范围内治疗AP最流行的补充和替代疗法之一。此外，越来越多的研究证实，中药(如姜黄素，茶树而且生姜Roscoe)可降低血清和尿液淀粉酶水平，抑制炎症因子的产生，减轻胰腺损伤。由于中药化合物的复杂性，探索具有抗炎作用的活性化合物及其调控机制是目前AP治疗研究的主要方向，特别是联合治疗结合现代医学，如联合miRNA靶向治疗AP已成为研究热点[84，85，86］．三七皂苷(PNS)是从三七提取物中提取而来，与氧化应激密切相关。PNS的抗氧化特性可能对治疗AP有效。Liu等用牛磺胆酸盐建立SAP大鼠模型，PNS处理大鼠miR-181b表达显著增加。随后通过qRT-PCR和WB检测发现，与自噬激活相关的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/Akt通路活性下降，LC3-II和Beclin1表达减少，导致吞噬细胞、自噬小体和自溶小体数量减少。此外，PNS诱导细胞凋亡增加(caspase-3表达增加，Blc-2表达降低)，显著改善牛磺胆酸诱导的胰腺损伤[87］．槲皮素(QE)具有抗癌和抗炎作用，也被证明可以改善AP状态。通过建立AP细胞和小鼠模型，相关实验证实QE可降低炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10。这一结果是通过上调miR-216b并抑制MAP2K6/p38途径实现的，最终在AP中具有保护作用[88］．此外，上述黄芩苷可通过miR-15a靶向MAP2K4/JKN信号通路，可显著减少AP坏死，有助于AP的治疗[65］．这些中药和mirna的活性化合物为AP的联合治疗提供了新的方向。

相关间充质干细胞

骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymstem cells, MSCs)作为低免疫原性的成体干细胞，具有自我更新、免疫抑制、多向分化、迁移和旁分泌活性等特点，越来越多的研究发现其具有强大的抗炎和修复作用[89，90］．因此，骨髓间充质干细胞(MSCs)治疗重症AP也备受关注。Qian等发现，SAP组miR-9表达水平较低，但注射骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymstem cells, BMSCs)后，miR-9表达显著升高。病理切片还显示，与SAP组相比，注射mir -9修饰的BMSCs (pri-miR-9-BMSCs)后，胰腺水肿、炎症浸润和坏死水平下降。淀粉酶、脂肪酶和炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平均降低，pri-miR-9-BMSCs通过诱导血管生成修复受损胰腺组织。这一过程包括促进血管生成相关蛋白血管生成素-1 (Ang-1)、可溶性血管内皮酪氨酸激酶受体(TIE-2)、C-X-C趋化因子受体4型(CXCR4)和p-AKT的表达;以VE-cadherin为靶点，影响β훽-catenin信号通路活性;招募更多的骨髓间充质干细胞迁移到受损组织，最终促进胰腺组织的再生[91］．在另一项研究中，证实miR-9可以通过pri-miR-9-BMSCs和miR-9 agomir传递到受损胰腺，抑制NF-κB信号通路的激活，减少促炎因子(TNF-α， IL-1β， IL-6和HMBG1)，并增加抗炎因子(IL-4, IL-10和TGF-β)的水平。这为AP处理的分子机制提供了较深入的解释[92］．此外，一些研究人员发现BMSCs可以通过靶向miR-181a-5p修复胰腺损伤。主要途径是BMSCs分泌miR-181a-5p，靶向PTEN/Akt/TGF-β1信号通路，减少炎症和细胞凋亡，最终降低AP的严重程度[93］．目前，对BMSCs与miRNAs之间的调控机制还知之甚少，未来的进一步研究有望为联合治疗AP提供坚实的理论指导。

miRNAs与AP合并肺损伤的治疗

如果早期干预不及时，AP会进一步发展，引起全身炎症，导致严重并发症。肺损伤是这些并发症之一。为了探究miRNA在SAP-ALI中的作用，Wu等建立了SAP-ALI小鼠模型，发现SAP-ALI小鼠肺组织中miR-339-3p的表达降低，而Annexin A3 (Anxa3)的表达则相反。生物信息学预测和后续实验证实，miR-339-3p通过靶向Anxa3抑制Akt/mTOR信号(降低TNF-α和IL-6的表达)来减轻SAP-ALI小鼠的炎症和水肿[94］．有研究发现，miR-542-5p在sap相关的ALI小鼠中表达较低，而miR-542-5p与肿瘤晚期淋巴转移、血管侵袭和TNM分期相关[95］．为了进一步研究两者之间的关系，我们在SAP-ALI小鼠中过表达miR-542-5p，过表达miR-542-5p后，SAP-ALI小鼠血清淀粉酶、肺和胰腺组织湿干重比、MPO活性和病理严重程度均降低。这一过程主要是由于相关炎症介质和细胞因子的表达减少引起的。双荧光素酶检测结果显示，过表达miR-542-5p降低了p21活化激酶1 (PAK1)的表达，随后抑制了mapk相关信号通路的激活，包括细胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、JNK和P38MAPK。最后，miR-542-5p过表达可减少IL-1β、TNF-α、ICAM-1等因子的释放，从而改善SAP-ALI的严重程度[96］．Wang等研究发现miR-21-3p在急性出血性坏死性胰腺炎(acute haem出血性坏死性胰腺炎，AHNP)中高表达，其过表达激活瞬时受体电位(transient receptor potential, TRP)信号通路;促进血清淀粉酶、脂肪酶及炎症因子的释放;抑制肺氧合;加重了胰腺和肺损伤。这一结果为SAP-ALI的治疗提供了新的靶点[97］．

miRNAs与AP伴其他器官损伤的治疗

肝、肾损伤也是急性胰腺炎的常见并发症，但mirna及其相互作用之间的关系研究还很少。在一项研究中，通过长期高脂饮食和牛磺胆酸钠注射建立HP合并急性肾损伤模型，发现血清淀粉酶和血脂水平(总胆固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C))升高。注入miR-214-3p后，上述结果的表达效果增强。大鼠胰腺和肾脏组织的HE和周期性酸希夫(PAS)染色显示，miR-214-3p过表达组胰腺腺泡变性、间质炎症细胞浸润、血管舒张、出血和坏死增加。肾小管上皮细胞和肾小球肿胀程度明显。天狼星红染色显示肾脏和胰腺的纤维化程度显著增加，而anti-miR-214-3p组显示相反的结果。这些效应依赖于miR-214-3p/PTEN/Akt轴的活性[98］．此外，研究发现miR-122在诱导AP小鼠模型中与促红细胞生成素(EPO)水平呈负相关，最终导致贫血。这可能与mir -122介导的肾脏炎症损伤有关，但尚需相关实验验证[99］．目前，miRNAs作为治疗SAP合并肝损伤的靶点的研究还很少。在一项病例对照研究中，研究人员通过分析有无肝损伤的AP患者外周血，发现miR-216a、miR-29a升高，miR-324-5p降低与Balthazar CT评分、APACHE II评分、CRP水平及住院时间密切相关，且上述mirna的表达水平可有效预测肝损伤的严重程度，但尚需进一步证实[One hundred.］．综上所述，上述研究明确了miRNAs在肝肾损害型AP中的应用价值，为治疗重症AP提供了新的途径。表中总结了miRNAs在治疗AP及其并发症中的作用机制研究4．

近年来，AP的危险因素逐渐增多，发病率和死亡率较高。特别是SAP，常规诊断和治疗难以避免严重并发症和复发。因此，我们迫切需要创新早期诊断、预后评估和治疗方法。随着对mirna的广泛研究，其在炎症中的独特作用为深入探索AP发病发展的调控机制奠定了坚实的基础，如mirna上调或下调影响下游炎症信号，从而调控炎症因子和细胞因子的表达。此外，miRNAs还可以调控凋亡和坏死相关分子，促进或抑制AP过程。值得注意的是，miRNAs与炎症细胞之间的募集、激活、诱导分化等相互作用，提高了我们对miRNAs介导AP发病的分子机制的认识，使miRNAs有可能成为治疗AP的靶点。

然而，目前关于miRNAs与AP进展关系的研究还处于起步阶段，如miRNAs如何调控胰蛋白酶原的激活，外源性miRNAs如何通过胞外囊泡进入受损细胞，miRNAs如何招募并激活分化相关的炎症细胞等。此外，在未来的研究中，我们应该更加关注mirna如何用于治疗AP，如mirna相关机制如何凸显中药的作用，mirna如何联合间充质干细胞治疗肝肾损伤等严重并发症的SAP，以及mirna如何调节免疫细胞的激活，有效发挥免疫治疗作用。虽然这些都需要较长时间的深入研究，但mirna相关的治疗可以为AP等严重炎症性疾病提供新的方法和策略。总之，对于AP的靶向治疗，mirna具有广阔的应用前景。

记者:

急性胰腺炎

SAP:

重症急性胰腺炎

microrna:

小分子核糖核酸

PTEN:

磷酸酶和张力蛋白同源物

NF -κB:

核因子b

Wnt /β连环蛋白:

Wnt(无翅)/β-连环蛋白

JAK / STAT:

Janus激酶/信号换能器和转录激活剂

TET2 / A20:

Tet甲基胞嘧啶双加氧酶2/去泛素化酶A20

TLR4:

toll样受体4

PDCD4:

程序性细胞死亡蛋白4

KLF4:

Krüppel-like因子4

Keap1 / Nrf2:

kelch样ech相关蛋白1/核因子红系2相关因子2

IL5RA:

白细胞介素5受体

VEGF:

血管内皮生长因子

HMGB1 / PI3K / AKT:

高迁移率基团箱1/磷脂酰苷3-激酶/蛋白激酶B

FOXO3 / NAPDH / ROS:

叉头盒O3/烟酰胺腺嘌呤磷酸二核苷酸/活性氧

FGF10:

成纤维细胞生长因子10

p38 MAPK:

P38 MAP激酶

薄层色谱:

Taurolithocholate

HDAC3:

组蛋白去乙酰化酶3

TRAF6-TAB2-TAK1-NIK / IKK:

TNF受体相关因子6- tgf - β活化激酶1/MAP3K7结合蛋白2-转化生长因子β活化激酶1- nf -κB诱导激酶/IκB激酶

HTRA:

高温要求A

STC):

牛磺胆酸盐钠

抑制:

损伤相关的分子模式

Th17:

产生il -17的CD4+ T辅助剂

Treg:

调节性T

SOCS1:

细胞因子信号的抑制因子1

NFIA:

核因子IA

TRAF3:

肿瘤坏死因子受体相关因子-3

RIP1 / RIPK1:

受体相互作用蛋白激酶

MKK3:

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶3

先生们:

全身炎症反应综合征

ANP:

急性坏死性胰腺炎

TLC-S:

牛磺石胆酸3-硫酸二钠盐

MAP2K4:

丝裂原活化蛋白激酶4

JKN:

C-Jun n -末端激酶

地图:

中度急性胰腺炎

非酒精性脂肪肝:

非酒精性脂肪肝

HTGAP:

高脂血症性急性胰腺炎

他:

Haematoxylin-eosin

MPO:

髓过氧物酶

LC3 II:

微管相关蛋白轻链3

ATG4c:

自噬相关基因4c

ATG7:

自噬相关基因7

pn:

三七皂苷

mTOR:

雷帕霉素的哺乳动物靶点

ADM:

Acinar-to-ductal化生

量化宽松政策:

槲皮素

msc:

间充质干细胞

伴着:

骨髓间充质干细胞

PAK1:

p21活化激酶1

Anxa3:

膜联蛋白A3水平较高

ERK1/2:

细胞外信号调节激酶½

AHNP:

急性出血性坏死性胰腺炎

TRP:

瞬时受体电位

不是:

周期性acid-Schiff

T-CHO:

总胆固醇

TG:

甘油三酸酯

密度:

低密度脂蛋白胆固醇

促红细胞生成素:

促红细胞生成素

不适用。

本工作由兰州市城关区科技计划项目(2020-2-11-4)和甘肃省中医药科研计划项目(GZKP-2020-28)资助。

作者指出

1. 周文和石东对这项工作做出了同样的贡献

作者及隶属关系

1. 兰州大学第一临床医学院，甘肃兰州730000

   周文策，董石，陈周，李鑫，蒋文凯

2. 兰州大学第一医院普通外科，甘肃兰州，730000

   Wence周

贡献

WZ:写作——初稿准备、监督、项目管理、资金获取。SD:写作-初稿准备，可视化。ZC、XL、WJ:撰稿、编辑、督导。所有作者都阅读并批准了最终的手稿。

相应的作者

对应到Wence周．

伦理批准并同意参与

不适用。

发表同意书

不适用。

相互竞争的利益

作者宣称他们之间没有利益冲突。

出版商的注意

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