allo启动作为一种通用抗病毒疫苗:保护老年人免受当前COVID-19和未来任何未知病毒爆发的影响

背景

我们提出了一种新的alloo -priming方法的基本原理，该方法可以作为一种通用的抗病毒疫苗，为老年人服务，同时也可以重塑老化的免疫系统，以逆转免疫衰老和炎症。这种方法有可能保护最弱势群体免受疾病侵害，并为社会提供不可估量的经济效益。建议对健康老年人进行allo启动，以提供防止任何类型病毒感染进展的普遍保护，包括防止当前爆发的COVID-19感染的进展，以及任何未来的致病性SARS-CoV-2病毒变体或下一个“X病”。allo启动是应对COVID-19大流行的另一种方法，可在引发中和抗体保护的疫苗接种策略失败或未能保护脆弱的老年人群时提供备用方案。allo-priming是使用活化的、故意错配的、离体分化和扩增的活th1样细胞(AlloStim)进行的^®)，目前作为实验性癌症疫苗在临床使用。多次皮内注射AlloStim^®在血液循环中创造了一个主导滴度的同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞，取代了衰老免疫系统中耗尽的记忆细胞的主导地位。一旦遇到病毒，同种异体特异性记忆细胞的激活会立即释放IFN- γ，从而导致“抗病毒状态”的发展，先天细胞效应细胞的激活和交叉反应的同种异体特异性CTL的激活。通过这种方式，同种异体特异性Th1/CTL的非特异性激活启动了一系列空间和时间免疫事件，这些事件限制了早期病毒滴度。在IFN- γ的背景下，从裂解的病毒感染细胞中释放内源性热休克蛋白(HSP)和DAMP，为原位疫苗接种创造了条件，从而产生病毒特异性Th1/CTL免疫。这些病毒特异性的Th1/CTL为疾病复发提供了绝育免疫和记忆保护，同时增加了循环中能够应对下一次病毒遭遇的Th1/CTL库。

结论

Allo-priming有可能提供对病毒性疾病的普遍保护，是逆转免疫衰老和对抗慢性炎症(炎症)的一种策略。allo引物可以作为抗病毒疫苗的佐剂，也可以作为应对未知生物威胁和生物经济恐怖主义的对策。

在此，我们建议使用一种新的异体启动策略，使用专利的、与CD3/CD28微珠结合的同种异体th1样免疫细胞(AlloStim)^®)作为“通用抗病毒疫苗”，以保障长者的健康。疫苗接种一直是预防成人病毒性疾病的一项战略，如流感、肺炎球菌肺炎、带状疱疹和甲型/乙型肝炎。成功的预防性疫苗接种机制通过激发中和抗体来防止病毒进入细胞提供保护。然而，这种策略不能提供对原始病毒抗原转移或漂移变体的保护[1，2]．目前，已知的SARS-CoV-2病毒至少有三种变体[3.]．

此外，病理性病毒在细胞内，抗体并不总能接触到。因此，中和抗体疫苗对许多复杂病毒无效，包括艾滋病毒、丙型肝炎病毒、巨细胞病毒、寨卡病毒、呼吸道合胞病毒、登革热和SARS/MERS。出于同样的原因，恢复期血清预防和治疗可能不能赋予灭菌免疫或记忆。这些复杂的病毒可能需要有效的细胞免疫反应来消除免疫[4，5，6，7，8]．如已报道的COVID-19，如果不消毒细胞免疫，可能会出现病毒复发[9]．

人们正在努力研制抗病毒疫苗，以引起保护性细胞免疫[10]，但这些尚未成功转化为临床益处[11]．与年龄相关的细胞免疫功能下降(免疫衰老)使老年人对疫苗接种产生细胞免疫反应的能力下降，使这一人群更容易受到与病毒性疾病相关的发病率和死亡率的影响，也更不可能对抗病毒疫苗产生反应。

此外，长者的免疫功能亦会受到慢性炎症(俗称“发炎”)的影响。[12]．炎症与合并症相关，如癌症、关节硬化、神经退行性疾病(如阿尔茨海默病和帕金森病)，所有这些疾病都增加了病毒感染严重进展的可能性。此外，肺部结构和功能的老化导致老年人呼吸道病毒感染后肺炎、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)和脓毒症的发病率增加。

通过alloo -priming重塑老年人的衰老免疫系统被认为是恢复这一人群细胞免疫功能的一种方法。恢复老年人功能性细胞免疫的能力可以提高对病毒感染的反应能力，包括COVID-19和任何未来出现的新型病毒。从本质上讲，由同种异体启动调节的老年人免疫系统可能以与年轻人相似的方式对病毒感染作出反应，从而导致不那么严重的疾病。老年人免疫系统的免疫调节功能更像年轻人的免疫系统，也应该恢复对任何当前或未来的病毒特异性疫苗的反应。老年人更平衡的免疫系统也可以对抗炎症，为老年人和社会提供广泛的健康益处[13]．

Allopriming

同种异体启动概念旨在为健康长者的免疫系统启动，以产生高滴度的同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞，这些细胞可在遇到任何病毒时被激活(旁观者激活)[14]．在遇到病毒时，同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞的旁观者激活会导致干扰素γ (IFN- γ)的释放，从而产生“抗病毒状态”[15]．干扰素通过诱导基因转录程序，通过各种机制干扰病毒复制周期的多个阶段，从而在病毒感染细胞和未感染的旁观细胞中产生抗病毒状态[16]．

干扰素γ从旁观者激活的同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞释放，激活先天效应细胞(例如NK、NKT和巨噬细胞)，进而释放额外的干扰素γ，维持抗病毒状态。这些激活的先天效应细胞裂解病毒感染细胞，控制急性病毒负荷。备用激活的常驻同种异体特异性CTL也可与病毒感染的细胞发生交叉反应[17]．被激活的先天效应细胞和交叉反应的同种异体特异性记忆CTL裂解病毒感染的细胞释放“危险信号”[18]及热休克蛋白(HSP) [19]哪些病毒抗原(如GRP78、HSP70) [20.，21]进入微环境，为"原位疫苗接种"创造条件，从而导致病毒特异性细胞免疫的发展。

抗原呈递细胞(APC)，如树突状细胞(DC)，吞噬和过程释放热休克蛋白伴随的病毒抗原。在危险信号和干扰素γ的背景下处理，导致未成熟的DC成熟为IL-12+ DC [22，23]．IL-12的产生进一步增加IFN γ，维持抗病毒状态，上调APC上的MHCI、MHCII和共刺激分子[24，25]．成熟的DC迁移到区域淋巴结，在MHC I和MHC II上显示病毒抗原，并共刺激CD80/86表达，导致病毒特异性Th1/CTL扩增。干扰素γ上调病毒感染细胞上的MHCI，因此这些细胞可以被病毒特异性CTL识别和杀死[26]．然后，这些病毒特异性CTL可以协调一种绝育免疫反应，随后分化为记忆细胞，提供防止再次感染的保护。

因此，异体抗原启动可以调节全身免疫平衡，并提供一个非耗尽的异体特异性Th1/CTL记忆细胞库，能够快速响应病毒感染。在遇到病毒时，这些异体特异性记忆细胞的非特异性激活会导致干扰素γ的释放。IFN- γ的释放协调了免疫细胞的顺序激活，从而形成抗病毒状态，先天消除入侵病毒，并形成病毒特异性效应反应和记忆。

每次这种级联反应都是由病毒遭遇引发的，病毒的消除对最初的同种异体抗原启动起到了促进作用。由病毒消除产生的新的病毒特异性Th1/CTL记忆细胞加入由同种异体抗原启动产生的常驻记忆同种异体特异性Th1/CTL，增加循环中Th1/CTL记忆细胞的滴度。与每一种新病毒的接触都会非特异性地激活所有以前未耗尽的记忆细胞，并支持消除新病毒的免疫级联。记忆Th1/CTL对每一种新病毒，反过来，增加Th1/CTL记忆细胞的滴度，以应对随后的病毒遭遇。

因此，通过被称为“异源免疫”的免疫机制，对异体抗原产生记忆性Th1/CTL免疫反应，从而提供对不相关病毒感染的保护。当对一种病毒的免疫记忆细胞的旁观者激活改变了对后来遇到的不相关病毒的免疫反应和感染过程时，就会发生异源免疫[27，28]．

通过这种方式，健康成年人可以获得泛病毒保护，免受病毒感染，包括SARS-CoV-2、甲型/乙型流感以及未来可能出现的任何变体和未知的新型病毒。这种自我放大过程可以为老年人提供长期的疾病缓解和对已知和未知病毒感染的普遍保护。

对异体抗原的免疫

为了实现抗病毒和抗衰老的免疫机制，同种异体启动必须引起同种异体特异性的Th1/CTL免疫。单独注射同种异体抗原可引起体液和Th2反应，多次注射可导致对同种异体抗原的耐受。许多因素，包括同种异体移植物的内在和外在因素，都可以影响同种异体排斥免疫反应的性质和程度，包括同种异体移植物的性质、移植物放置的身体部位和受体的免疫状态[29]．

为了确保同种异体抗原启动后同种异体特异性Th1/CTL记忆的一致分化，无论宿主免疫状态和年龄如何，一种生物工程、专利的免疫细胞被称为“AlloStim”^®”使用。AlloStim^®是来自健康供体的活的、活化的、故意错配的、体外扩增和分化的同种异体th1样细胞。注射未分化的同种异体免疫细胞或未激活的同种异体免疫细胞，激活同种异体Th1样AlloStim后，不能引发同种异体特异性Th1记忆^®细胞引发显性Th1免疫，在癌症模型中具有保护作用和治疗作用[30.，31]．

AlloStim^®细胞在激活状态下皮下注射(ID)。为了确保注射细胞在给药时被激活，它们被制备成带有抗cd3 /抗cd28涂层的微珠。激活的AlloStim^®细胞以1 × 10的冷冻剂型配制⁷含有1%人血清白蛋白和2% DSMO的PlasmaLyte A细胞/ml。每3-4天解冻一次0.5 ml的单独剂量，皮内给药，总共给药5次。这种启动时间表足以提供高滴度的循环同种异体特异性Th1/CTL。AlloStim^®已经在美国和泰国的I/II期、II期和IIA期临床试验中对化疗难治性转移性实体瘤患者进行了评估。IIB期预注册和IIB/III期随机对照注册临床试验目前分别准备在美国和亚洲开展三线转移性结直肠癌和晚期/转移性肝细胞癌。在这些人体临床试验中，AlloStim^®已经证明能够下调肿瘤微环境中的检查点分子，导致效应t细胞和NK细胞全系统浸润到转移病灶(从“冷”转化为“热”)，并且一直证明在化疗难治性转移性疾病的长期幸存者中有20%至35%的生存率，具有良好的安全性[32，33]．

激活AlloStim^®表达高密度CD40L和1型细胞因子，包括IFN- γ、TNF-α和GM-CSF。AlloStim^®已被证明可以调节大量预先治疗的转移性癌症患者的免疫系统(类似于老年人的衰老免疫系统)，并已被用于旨在引发同种异体干细胞移植程序(移植物对肿瘤或“GVT”)相同的抗肿瘤机制的方案中，而无需匹配供体，化疗条件或GVHD的风险[30.，31，34，35，36，37，38]．

同种异体细胞具有高度的免疫原性，甚至被免疫功能低下的宿主排斥[39]．不匹配细胞的排斥消除了同种异体细胞给药的GVHD副作用的风险。多次注射AlloStim^®增强循环中同种异体特异性Th1/CTL细胞的滴度，其中一部分细胞分化为持久记忆细胞。这些同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞提供了一个免疫细胞的功能库，能够非特异性(旁观者)激活[40]在遇到病毒时[14，41导致IFN- γ立即被释放。

同种异体刺激产生促炎细胞因子^®，包括IFN-γ和TNF-α，最初激活宿主NK细胞排斥同种异体细胞，由于CD4+ AlloStim上缺失自身mhc I^®细胞。老年人NK细胞区室在功能和表型方面高度稳定[42因此可以很容易地排斥不匹配的同种异体细胞。在后面的ID AlloStim^®干扰素γ的产生和CD40L的表达^®激活巨噬细胞，排斥同种异体刺激^®［43]．皮肤内NK细胞或巨噬细胞对异体细胞的排斥反应导致内源性HSP和DAMP危险信号的释放[22]，在CD40L和干扰素γ由AlloStim表达的背景下^®导致DC成熟为IL-12+ DC1表型，并迁移到引流淋巴结，与同源t细胞相互作用，引发同种异体特异性Th1/CTL免疫[44]．

老年人

当前的COVID-19病毒大流行已导致全球大量死亡。这是继2002-2003年的SARS和2012年的中东呼吸综合征之后，不到20年来第三次严重的冠状病毒(CoV)爆发。与冠状病毒感染相关的发病率和死亡率中，老年人所占比例过高。疫苗一直是减少病毒感染影响的主要全球战略，但迄今尚未开发出针对这些先前高毒力冠状病毒的成功疫苗。无论如何，老年人通常对抗病毒疫苗反应不佳[45，46，47]．这造成了对疫苗的高度未满足的医疗需求，以保护老年人免受当前COVID-19大流行的影响，并保护他们免受未来任何大流行的影响。

健康的年轻成人对病毒感染的反应一般较轻微，而长者反应较慢，易受较高的病毒滴度和慢性病毒感染，从而发展为严重的症状，特别是呼吸道病毒感染[48，49，50，51，52，53，54]．老年人对病毒感染的反应迟缓和效果差，在很大程度上是由于细胞免疫功能受损[55，56，57与“免疫衰老”有关[58，59，60]．

老年人对病毒感染的先天免疫反应明显延迟，随之而来的适应性免疫反应往往是次优的[61]．先天免疫反应的延迟导致高病毒滴度的积累，进而引起较晚的过度活跃的免疫反应，这与更严重和往往致命的临床病程有关[62]．由于先天免疫反应较晚而在老年人中达到的急性高病毒水平也增加了病毒的毒性，增加了人与人之间感染传播的机会。

老年人Th1/ th2系统存在失调，以th2功能为主[63，64]．老年人记忆性Th1/CTL细胞减少，功能耗竭[65，66，67，68]．老年人的记忆细胞由于慢性病毒感染(如巨细胞病毒、EBV病毒、HBV病毒、HCV病毒)导致的终身抗原挑战而耗尽[69，70]．耗尽的记忆细胞在遇到病毒时不能被非特异性激活。老年人细胞免疫的这种缺陷限制了异源免疫机制对急性病毒感染的反应，这导致对病毒感染的先天反应较慢且往往不足。

老年人的t细胞也有限[71，72这抑制了它们产生病毒特异性适应性t细胞免疫反应的能力，两者都是预防性的(通过接种疫苗)[73]和原位(由于对感染的适应性免疫清除)。这种细胞免疫功能的抑制，加上呼吸器官的老化，使老年人更容易受到病毒感染的病理影响，特别是呼吸道病毒感染的影响[74]．老年人的免疫缺陷使他们不太可能从预防传染病的疫苗接种中受益[75]．

目前无法为老年人提供免受病毒感染的保护对社会产生了巨大的经济影响[76，77]．随着全球成年人口比例的增加，对老年人影响尤为严重的流行病的医疗和经济影响将会加剧。目前的预测显示，到2050年，60岁及以上的人口将占总人口的21.1% [78]．因此，迫切需要制定扭转免疫衰老的战略，并制定保护老年人不受病毒流行影响的方法。

老年人免疫系统的免疫调节

与年龄相关的免疫系统的逐渐失调和衰退被称为“免疫衰老”。在老化的免疫系统中，由于慢性刺激和反复的临床和亚临床感染，记忆细胞会积累[13]．这种慢性刺激会使这些记忆细胞耗尽，不再能够发挥功能，从而增加老年人对传染性病原体的易感性[79，80]．免疫系统的衰老还表现为幼稚T细胞数量的减少，Th1/Th2细胞亚群的失衡，以及T细胞受体(TCR)库的减少[75，81，82]．

已知细胞免疫反应释放Th1(1型)细胞因子谱，包括IFN- γ、TNF-α和IL-2，对大多数病毒感染具有保护作用[83]．特别是IFN- γ已被证明在清除病毒感染方面发挥着至关重要的作用[84]．通过同种异体抗原启动调节老年人的免疫系统，以提供高滴度的未耗尽的Th1/CTL记忆细胞，这些细胞在遇到任何病毒时可被非特异性激活，导致释放1型细胞因子，这可能在病毒暴露时提供立即的抗病毒免疫反应，也可能恢复对病毒疫苗的反应[85]．老年人IFN对病毒感染反应的延迟是由于病毒蛋白和免疫衰老的主动抑制[86]，这使得病毒在感染早期达到高滴度，导致免疫病理、t细胞凋亡和发展为致命性肺炎[87，88]．

急性病毒感染后立即释放干扰素，纠正了免疫反应延迟的问题，并创造了早期的“抗病毒状态”[89，90]．通过早期释放干扰素γ建立抗病毒状态，为抵御病毒感染提供了至关重要的第一道防线[91]．抗病毒状态通常是通过从病毒感染的细胞中早期释放I/III型IFN来诱导的[92]．然而，许多病毒，包括冠状病毒，可以抑制I/III型IFN的产生，作为一种免疫回避机制[93，94，95，96]．提供一个未耗尽的记忆细胞池的策略可以在遇到病毒时产生II型干扰素(IFN- γ)，从而克服病毒的逃逸。即使在I/III型IFN抗性细胞中，IFN也会产生抗病毒状态[97]．此外，干扰素还能调动先天效应细胞，迅速对病毒感染做出反应[98并产生干扰素γ。因此，早期IFN- γ通过alloo -priming对病毒感染的反应提供了一种快速控制老年人病毒感染的方法。

众所周知，老年人的慢性炎症与癌症易感性增加有关[99，One hundred.]、动脉粥样硬化[101]和神经退行性疾病[102，103]．同种异体启动对老年人免疫系统的调节也可以起到反调节常驻慢性炎症的作用[104，105]引起“炎症”，从而逆转免疫衰老[106]．因此，同种异体启动方案不仅可以为老年人提供普遍的抗病毒保护，还可以作为一种“抗衰老”机制，保护老年人免受老年共病的侵害。

老年人病毒性感染的临床特点

预计Allo-priming可以降低遇到病毒后临床症状的严重程度。人类呼吸道病毒感染的临床特征各不相同，第一亚群出现轻微的流感样症状，几天后消退;第二组患者出现中度至重度流感样症状，伴有高热、低氧血症和进展为肺炎样症状。这些有症状的患者进展为急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、败血症、多器官衰竭和死亡的风险很高。具有轻微流感样症状的亚群与较年轻的健康个体相关，而与较严重症状相关的亚群主要与体弱和/或存在合并症的老年人相关。

甚至在病毒滴度下降时，也可能出现更严重的症状[107与晚期过度活跃的免疫反应有关。最初的延迟免疫反应导致高病毒滴度，随后是夸大的延迟免疫反应和“细胞因子风暴”。这一系列事件被认为是导致老年人出现与呼吸道病毒感染有关的严重症状的原因。

在致病性病毒感染期间，细胞因子风暴导致过度炎症浸润和病毒诱导的组织破坏，从而导致发病率和死亡率。细胞因子风暴中IFN出现的时间和来源可影响病毒性疾病的临床病程。在病毒感染晚期，血清中IFN- γ水平升高与更严重的疾病相关[108]和免疫病理学[109而干扰素的早期释放导致病毒滴度降低，疾病的严重程度较轻。这些观察结果支持了这样的预测，即从未耗尽的同种异体特异性记忆体Th1/CTL中早期激活和释放IFN- γ将纠正这一问题，避免发展为严重的疾病。

与严重疾病相关的细胞因子风暴类型是由活化的单核细胞释放的细胞因子引起的，产生IFN-α、CCL-2、IL-6、TNF-α、CCL-3、CCL-5、CxCL-2、IL-1α和IFN-γ的风暴。这种单因子细胞因子风暴与发病率和死亡率直接相关[110]．与细胞因子风暴相关的大多数死亡病例还伴有细菌性肺炎和败血症。众所周知，导致呼吸衰竭的主要原因是并发细菌性肺炎导致ARDS。ARDS的特点是肺泡内皮-上皮屏障受损，导致肺泡腔内液体泄漏和积聚，抑制气体交换。

老年人易患进行性呼吸衰竭和败血症。事实上，败血症被认为是一种衰老疾病[111也是老年人入院ICU的主要原因之一。脓毒症引起的免疫抑制的特征与年龄无关，与免疫衰老有许多相同的特征。在过去的几十年里，65岁以上患者的脓毒症发病率显著增加[112]．许多呼吸道病毒患者发展为肺炎和急性呼吸窘迫综合征[113，114后来死于败血症。

对败血症的过度活跃的免疫反应，包括单因子“细胞因子风暴”，是由M1巨噬细胞对组织损伤的过度激活引起的[115]．老年和年轻患者对败血症的反应相似。然而，老年患者的死亡率要高得多[116]．这种差异与老年人失调的免疫系统有关。老年人无法抑制过度激活的单核细胞反应，导致疾病进展，而年轻人的调节机制可以对抗并防止单核细胞过度激活的后果。

老年人的免疫系统失调与髓源性抑制细胞(MDSC)活性增加有关[117，118]．MDSCs是免疫衰老的有效诱导剂[119]、败血症-获得性免疫缺陷[120]以及癌症的转移和进展[121]．MDSC与IL-6呈正相关，与IFN- γ负相关[122，123]．

免疫衰老导致先天和适应性免疫反应的稳态调节不平衡，降低了宿主快速恢复平衡免疫功能的能力。因此，年龄诱导的免疫抑制，延迟先天免疫反应的综合作用[86]，由于体内平衡改变而引起的晚期免疫反应夸大[88]，这些因素结合在一起，使得老年人的病毒感染后期持续时间更长。因此，在老年人中，病毒传播水平增加，组织损伤发生率增加，ARDS和感染性休克进展加快。

因此，在应对病毒感染时，允许启动使IFN- γ尽早释放可以阻止MDSC的分化，并对老年人体内MDSC的免疫抑制进行反调节[124]．这将具有重塑老年人免疫系统的作用，从而防止病毒感染的严重症状和进展为ARDS和败血症。

高致病性人类冠状病毒对公共卫生构成重大威胁。暴露于冠状病毒的患者基本上分为两组，大多数出现短期临床症状，少数出现以肺炎和急性呼吸窘迫综合征为特征的严重疾病。由于免疫衰老和合并症，老年人不成比例地易患严重疾病。冠状病毒很可能会继续跨物种传播，并在未来引发更多疫情。因此，即使开发出预防COVID-19的疫苗，也无法预防下一次新型病毒的爆发。因此，有必要制定新的战略，不仅要控制当前的大流行，还要为预防下一次大流行做好准备。

由于受体结合结构域(RBD)的构象隐藏以及该病毒在合胞体中以不依赖ACE2和蛋白酶的方式通过胞饮作用感染靶细胞的能力，限制了抗体中和活性所需的环境暴露，因此开发疫苗以引发针对SARS-CoV-2的中和抗体的策略在技术上具有挑战性。开发针对复杂病毒(如SARS-Cov-2)的抗病毒疫苗可能需要有效和广泛的t细胞反应来克服与体液免疫相关的病毒逃逸机制。

一种能引起强大细胞免疫应答的疫苗需要鉴定保守的病毒表位，APC在MHCI和MHCII上有效加工和呈递病毒抗原，并结合共刺激信号，以及初始T细胞库的多样性。此外，疫苗接种产生的CTL记忆细胞需要被感染的细胞在MHCI上呈递疫苗中选定的病毒抗原。选择存在于MHC I(和MHC II)上的常见病毒表位用于疫苗开发在技术上是困难的，冠状病毒感染导致受感染细胞上MHC I的下调，使受感染细胞对CTL不可见。由于老年人缺乏naïve t细胞，而t细胞是产生对病毒抗原具有广泛特异性的CTL所必需的，因此老年人对未来任何针对细胞免疫的疫苗都不太可能产生有效反应。

同种异体移植物的排斥反应是最保守和最强大的免疫机制之一，使同种异体抗原启动成为老年人疫苗接种的理想候选物。AlloStim^®在美国FDA批准的IND下使用，并已被证明很容易被大量预处理、免疫抑制的转移性癌症患者排斥。使用AlloStim的I/II期临床试验方案^®目前正在接受美国食品和药物管理局的审查。一旦获得批准，临床试验就可以在短时间内开始评估这种允许启动的概念。为了证明概念，纵向PBMC样品被建议在允许启动之前和之后收集。PBMC将被一组灭活病毒或重组病毒蛋白脉冲，以确定它们是否会非特异性激活同种异体特异性Th1/CTL记忆细胞。从病毒脉冲PBMC的上清液建议在活病毒溶细胞斑块测定中进行评估，以确定病毒传播是否受到抑制。

老年人特别容易受到进行性病毒性疾病的影响，并且对病毒感染的免疫反应延迟，至少部分原因是免疫衰老、Th2免疫偏差、naïve t细胞多样性降低以及慢性炎症(如巨细胞病毒)引起的记忆细胞耗损的频率高。这导致自然丧失了对入侵病原体进行有效先天和适应性细胞免疫反应的能力。老年人细胞免疫反应的延迟和抑制使病毒得以广泛存在，由此导致的病毒滴度增加导致免疫反应失调，从而导致免疫反应延迟、过度活跃，进而发展为肺炎、多器官衰竭和死亡。

有效的自然先天免疫反应能够限制病毒感染的进程，关键在于早期产生I/III型干扰素(IFN)，然后随着免疫反应的成熟转而产生II型干扰素(IFN- γ)。成功的病毒感染在很大程度上是由于先天免疫反应的延迟和病毒介导的I/III型IFN产生的抑制，从而导致病毒的快速传播，最终导致与组织破坏、合并感染、多器官衰竭和死亡相关的免疫反应失调。

为了防止老年人在病毒感染时积累高病毒负担，同种干扰素启动提供了一种机制，在这种机制中，一群现成的重新启动的t细胞在循环中，可以通过产生干扰素γ来快速应对病毒感染。未耗尽的Th1/CTL记忆免疫细胞的存在将通过在记忆细胞室中提供Th1重新平衡机制来改变老年人的免疫特性。这是通过皮内注射活化的同种异体Th1样细胞(AlloStim)产生高滴度的多克隆、同种异体特异性、非耗尽的记忆性Th1/CTL t细胞来实现的^®）.启动后产生的同种异体特异性记忆细胞被编程为在激活时产生干扰素γ。IFN- γ对感染病毒的细胞有直接抗病毒作用，也可以保护未感染的细胞免受感染。干扰素- γ创造了与先天释放I/III型干扰素相同的抗病毒环境，从而产生有效的自然先天免疫反应。

这些同种异体特异性记忆细胞能够与外来病毒抗原发生交叉反应，并且容易被细胞因子和外来病原体等环境刺激非特异性激活。同种异体特异性免疫细胞的记忆库也可以通过额外的皮内或静脉输注AlloStim重新激活^®异体细胞出现病毒性疾病的最初症状。异体特异性Th1/CTL记忆t细胞激活和IFN γ产生的旁观者效应预计会对呼吸道细胞产生保护作用，产生快速的免疫介导的病毒清除，并调节受感染组织(例如肺上皮细胞)的微环境，以便进行原位疫苗接种，从而产生针对入侵病毒的特异性免疫和记忆。异源免疫效应可以在每次遇到病毒时增强泛病毒保护，提供长期保护的可能性。

所提出的同种异体抗原引物策略也可与任何病毒特异性疫苗联合使用。同种异体特异性抗原和病毒特异性抗原的联合注射可加速对已知病毒的适应性细胞免疫反应，并可作为增强老年人对疫苗反应的一种手段。随后注射同种异体细胞将刺激异体排斥记忆回忆反应，该反应可以非特异性激活由疫苗引起的驻留病毒特异性细胞。这种双重激活提供了一种上调被感染靶标上MHCI的机制，使得由病毒特异性疫苗接种引发的记忆细胞能够识别和杀死被病毒感染的靶标。该组合方法还具有克服单一肽疫苗狭隘免疫的优势，通过结合原位疫苗接种机制来引发广泛的病毒特异性细胞免疫反应。

这种不允许启动机制也可以作为生物恐怖主义和生物经济恐怖主义的对策。被同种异体抗原启动的个体可以通过紧急注射同种异体抗原来激活先天免疫，并启动导致清除未知病原体的级联免疫事件。在担心接触生物武器或首次出现症状时，可在注射器中提供同种异体抗原，用于紧急注射，其方式与提供肾上腺素以防止过敏性休克的方式大致相同。

虽然寻找治疗和预防covid - 19感染的方法是当务之急，但也必须考虑到，目前的大流行是过去20年来第三次大规模的新型冠状病毒人间感染疫情。目前，世界上任何地方都没有针对以往SARS或中东呼吸综合征爆发的注册疫苗或治疗保护手段。尽管世界各地的专家为研制疫苗付出了巨大的努力，但这还是发生了。阻碍针对以往冠状病毒疫情开发特定疫苗和治疗方法的技术障碍，可能也存在于针对当前COVID-19病毒大流行开发疫苗的技术障碍中。然而，即使研制出有效的疫苗，估计也需要至少一年的时间才能完成足以获得监管部门批准的临床试验。如果COVID-19像SARS和MERS一样消失，到疫苗可用时，它将不再那么紧迫。

然而，保护脆弱的老年人口免受下一次大流行的影响，保护世界经济免受自然和生物武器的威胁，仍将是一项迫切需要。因此，解决新出现的病毒流行病问题的新方法，特别是在脆弱的老年人口中，是一个高度优先事项。Allo-priming是一种很有希望的方法。

不适用。

ARDS:

急性呼吸窘迫综合征

巨细胞病毒:

巨细胞病毒

x:

冠状病毒

细胞毒性t淋巴细胞:

细胞毒性t淋巴球

CCL -分部:

C-C基序配体

CxCL -:

CxC基序配体

潮湿:

危险相关分子模式

DC:

树突细胞

食品药品监督管理局:

美国食品药品监督管理局

gm - csf:

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

GRP:

Glucose-regulated蛋白质

移植物抗宿主病:

移植物抗宿主病

GVT:

移植物与肿瘤

艾滋病毒:

人类免疫缺陷病毒

丙肝病毒:

丙型肝炎病毒

HSP:

热休克蛋白

ID:

皮内注射

干扰素:

干扰素

IL:

白介素

印第安纳州:

正在研究的新药

MDSC:

髓源性抑制细胞

即:

中东呼吸综合症

MHC:

主要组织相容性复合体

NK:

自然杀伤细胞

NKT:

自然杀伤T细胞

我们:

美国

“非典”:

严重急性呼吸系统综合症

Th1:

辅助1

肿瘤坏死因子:

肿瘤坏死因子

不适用。

不适用。

作者及单位

1. 哈达萨-希伯来大学医学中心癌症免疫治疗和免疫生物学中心，9112001，以色列耶路撒冷

   Michael Har-Noy & Reuven Or

2. 免疫疗法，有限公司，Malcha科技园，B1/F1, 9695101，以色列耶路撒冷

   迈克尔Har-Noy

3. 美国凤凰城镜像生物制品有限公司，4824 E Baseline Rd #113

   迈克尔Har-Noy

贡献

MHN构思了异源启动的概念并撰写了手稿。RO审阅和编辑了手稿。两位作者都阅读并批准了最终的手稿。

相应的作者

对应到迈克尔Har-Noy。

伦理批准并同意参与

不适用。

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