与不良妊娠结局相关的复杂平衡染色体易位1例

复杂染色体重排(CCR)是一种罕见的染色体结构异常。CCR携带者的染色体结构变异是导致不良妊娠和分娩史的因素之一。在本研究中，我们报告了一位有不良妊娠和分娩史的患者，其表现为复杂的平衡染色体易位。女性患者表型和智力正常;在她第一次怀孕时，胚胎受损，对胚胎染色体的组织学检查显示，在1p32.3p32.2处缺失约4.66 Mb，在1p22.2p22.1处缺失约1.02 Mb，在6q27处缺失约1.46 Mb，在9p24.3p24.1处缺失约7.78 Mb。患者染色体检查核型为46,XX，(1;9)(p32;意思是)。第二次妊娠，胎儿产前诊断有三个或三个以上超声软指标阳性。再次检查患者核型，荧光原位杂交进一步证实为46,XX,t(1;9;6)(p31;p22;q27)，提示该患者为复杂平衡染色体易位携带者。CCR携带者有较高的自然流产风险，遗传咨询临床医生在临床实践中应考虑对这类患者进行核型分析，必要时应重新检查染色体。

复杂染色体重排(CCR)是一种罕见的染色体结构异常，其特征是在两条或多条染色体上出现三个或多个断点，并伴有染色体间或染色体内单段插入或易位等。[1，2，3.］．CCR是一种罕见的结构重组，可平衡或不平衡[4，5］．携带CCR的个体在表型上可能正常，也可能表现出临床异常[6］．CCR携带者的先天性畸形或智力障碍的临床异常程度从正常到轻微到严重不等[7］．此类临床异常是由易位断点附近的微缺失或微重复、位于断点或基因组其他位置的基因破坏和位置效应[8］．此外，表型异常的可能性随着ccr相关断点的数量而增加[3.］．

不良妊娠结局指的是自然流产史，胚胎逮捕、胎儿死亡、死产、新生儿死亡以及智力受损和畸形婴儿的出生[9］．不良妊娠结局的原因有很多，包括遗传、解剖、免疫和生物学因素[10，11，12］．父母或胚胎的染色体异常是不良妊娠和分娩史的最常见原因[13，14，15］．既往研究的统计分析显示，3.5%有反复流产史的夫妇中，至少有一方是CCR携带者[16］．最常见的CCR类型是易位，而其他重排类型包括倒置、插入、删除和重复。此外，研究发现约18.4%的CCR携带者产生表型异常的后代[16］．因此，尽可能准确地分析有不良妊娠史的患者是否为CCR携带者并评估其面临的风险是非常重要的。

随着分子细胞遗传学的发展，诸如Giemsa显带(G-Banding)、荧光原位杂交(FISH)和拷贝数变异测序(CNV-seq)等技术被应用于染色体结构变化的研究[17]，隐藏的和复杂的染色体重排尚未被揭示。在这篇论文中，我们报告了一例成年女性患者的正常表型和智力和不良妊娠和分娩的历史，谁被发现是一个复杂的平衡染色体易位携带者。

研究对象的临床资料

患者为22岁女性，表型和智力正常。她身高158厘米，体重48公斤。该患者及其丈夫是非血亲关系，该患者在2020年有过两次婚后怀孕和一次胚胎停止，并通过胚胎组织学进行了染色体检查。在第二次怀孕期间(20周+ 3天)，患者要求河北省人民医院生殖遗传科进行产前诊断。本研究经机构伦理委员会批准样本采集，患者提供签署的知情同意。

显性条带的细胞遗传学分析

患者接受了400条带分辨率g -显带中期染色体分析，并对其丈夫进行了核型分析。核型描述基于国际人类细胞遗传学或细胞基因组命名系统的建议[18］．

分子细胞遗传学分析

在FISH中使用Tel1p(绿色)、Tel1q(红色)、CEP1(红色)、Tel6q(红色)、CEP6(白色)、Tel9p(绿色)和CEP9(白色)探针进行高分辨率分子细胞遗传学分析。

染色体核型分析

细胞分裂期先在10 ×显微镜下观察，然后转移到100 ×油浸镜进行详细观察。共统计30个分裂相，异常者加倍计数分析。对3个长度合适、条带清晰、分散良好的分裂期进行了分析和诊断，并绘制和打印了核型图。核型描述基于国际人类细胞遗传学命名法系统的建议[18］．

2020年，患者经历了胚胎悬挂，经胚胎组织学染色体检查发现1p32.3p32.2处缺失约4.66 Mb, 1p22.2p22.1处缺失约1.02 Mb, 6q27处缺失约1.46 Mb, 9p24.3p24.1处缺失约7.78 Mb。检查了夫妻双方的染色体，丈夫的染色体正常。而女性伴侣染色体检查显示为46,XX,t(1;9)(p32;p34)，即第1号染色体2带短臂3位易位到第9号染色体4带短臂3位。

患者第二次妊娠20周+ 3天来我科产前诊断。她否认在怀孕期间接触过任何有毒或有害物质或辐射。在我科行胎儿超声检查，胎儿小脑略小，左心室有强光斑，双肾回声增强，下腹局部回声增强。进行羊水穿刺和羊水核型分析，结果显示没有数量或结构染色体异常。然而，羊水CNV-seq显示在6q27q27区域(致病变异)有大约1.6 Mb的缺失，在1p32.3p32.2区域(疑似致病变异)有4.68 Mb的重复。

鉴于第一次妊娠停胎时检查的胚胎中有大约1.46 Mb染色体的重复，第二次妊娠的羊水结果表明6q27q27区域约有1.6 Mb的缺失，中信湘雅生殖与遗传医院遗传中心对该女性的染色体进行了重新检查。核型分析显示为46,XX,t(1;9;6)(p31;p22;q27)，该患者观察到1、9和6号复杂染色体平衡易位(图。1)．结果得到了FISH的证实。采用Tel 9p(绿色)/Tel 6q(红色)/ CEP6(白色)探针组合检测受试者外周血中期的FISH。共观察到30个分裂期，每个分裂期观察到1个衍生染色体6和1个衍生染色体1(图1)。2A).使用受试者外周血中期进行FISH检测，采用Tel 1p(绿色)/Tel 1q(红色)/CEP1(红色)/CEP9(白色)的探针组合。共观察到30个分裂期，每个分裂期分别观察到1个衍生染色体1和1个衍生染色体9(图1)。2B).通过FISH再次确认该女性为1、6和9号染色体复杂易位的携带者。

患者核型图谱:46,XX,t(1;9;6)(p31;p22;q27)

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荧光原位杂交(FISH)结果证实患者核型为46,XX,t(1;9;6)(p31;p22;q27)。请注意:左图所示:采用Tel 9p(绿色)/Tel 6q(红色)/ CEP6(白色)探针组合与受试者外周血中期进行FISH检测。共观察到30个分裂期，每个分裂期分别观察到1个衍生染色体6和1个衍生染色体1。右图所示:用Tel 1p(绿色)/Tel 1q(红色)/CEP1(红色)/CEP9(白色)探针组合与受试者外周血中期进行FISH检测。共观察到30个分裂期，每个分裂期分别观察到1个衍生染色体1和1个衍生染色体9

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在一般人群中，很少发现CCR。这种情况通常与先天性畸形、智力障碍、复发性自然流产和不孕有关[19］．例如，辛卡和德维[20.]报告说，一个男孩从他聋哑的母亲那里继承了显著平衡的染色体易位，表现出智力障碍和失语症。然而，Campos等人。21]表明，平衡CCR在人群中的频率可能被低估了，因为它可能不会引起表型效应，也可能无法被所使用的分析方法检测到。这与本研究的结果相似。本文报道的CCR患者表型和智力正常，但核型分析显示该患者为复杂染色体易位携带者。

根据染色体数量和断点的组合，ccr有四种类型。I型是最简单也最常见的，由母亲遗传;它的特征是在ccr中有相同数量的染色体和断点，称为三重重组(三条染色体，每条染色体上有一个断点)，是所有CCR病例中最常见的[22］．平衡易位部分遗传自父母，部分由精子或卵子形成或卵子受精过程中染色体断裂和重新结合引起[23，24］．在这个过程中，两条染色体在断裂后交换，不涉及染色体片段的增加或减少。携带者智力和表型正常，临床表现可能包括不孕、复发性流产、胚胎停止发育和胚胎发育畸形[25］．

两个染色体平衡易位的携带者在减数分裂过程中形成四向染色体;它们产生18个配子，其中1个为正常配子，1个为平衡易位载体，其余16个为不平衡配子[26］．本研究报道的患者携带的平衡易位共涉及3条染色体(1,9,6)。他们是复杂易位的携带者，与仅涉及两条染色体的互惠易位携带者相比，其染色体重排的几率更高，更容易形成不平衡配子。这些复杂的平衡易位是不良妊娠和分娩史的原因[27］．在患者第一次胎儿骤停妊娠时，对胚胎进行了染色体1、6和9的检查，发现有不同程度的微缺失或微重复，对患者染色体的检查显示1和9染色体易位平衡。在患者第二次怀孕时，胎儿表现出三个或三个以上的超声软指标阳性，提示胎儿染色体异常的风险增加。羊水CNV提示6号染色体微缺失为致病变异，1号染色体微重复为疑似致病变异;胚胎组织和羊水都表明6号染色体异常，因此重新检查了患者的染色体。最后，患者被鉴定为1、9和6号染色体的复杂易位携带者。

患者的妊娠羊水CNV检测到6q27q27区域约1.60 Mb的缺失，这是一种含有11个蛋白质编码基因的致病性变异，包括DLL1，THBS2，ERMARD而且真沸点．的DLL1ClinGen评价该基因为单剂量敏感基因[28］．DLL1作为Notch的配体，在Notch信号传递中发挥重要作用[29］．研究表明异常的DLL1/Notch信号通路可导致胚胎发育异常、生物过程失调和恶性转化[30.］．在哺乳动物细胞中DLL1/Notch信号通路与干细胞内稳态的维持有关[31］^．此外，当Notch信号激活时，Notch配体(DLL1)结合到邻近细胞表面的Notch受体上，在那里它诱导抑制神经分化的基因的表达，从而维持细胞的增殖状态。该患者妊娠羊水CNV检测到的6q27q27区域微缺失所形成的致病变异可能与该基因区域编码的蛋白质功能丧失有关。

在本研究中，患者的两个核型分析结果存在差异;第一组仅显示1号和9号染色体的易位，而第二组显示1号、6号和9号染色体的复杂平衡易位，这也被FISH进一步证实。两种检查结果的差异有多种原因，例如G-Banding核型分析的分辨率(高vs低)可能导致结果的差异。

CCR携带者发生自然流产和后代核型不平衡的风险较高。因此，在临床实践中，遗传咨询师应准确分析有不良妊娠史的患者是否为CCR携带者;此外，他们应该评估自己的风险，并提供适当的生育建议。

在这项研究中产生或分析的所有数据都包含在这篇发表的文章中。

河北省医学科学研究计划项目(No.20190387;No.20211535)。

作者和联系

1. 050051河北省石家庄市新华区和平西路348号河北省总医院生殖遗传科

   罗燕，陆赫珍，张萍萍，李雅丽

2. 河北省总医院产科，河北石家庄050051

   岩上张

3. 河北工程大学附属医院乳腺外科，河北邯郸056004

   志强崔

贡献

该研究由罗燕、陆赫珍构思，张彦尚、崔志强参与设计和协调，张萍萍、李雅丽协助起草手稿。所有作者阅读并批准了最终稿件。

相应的作者

对应到李雅．

伦理批准和同意参与

本研究经怀化市妇幼保健院伦理委员会批准。所有患者监护人都对该研究表示知情同意。

同意出版

同意发布。

相互竞争的利益

所有作者都没有任何个人、财务、商业或学术利益冲突。

出版商的注意

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