疟疾患者唾液中的血管生成和血管抑制因子gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba

疟疾相关的死亡率与宿主炎症因子(如干扰素诱导蛋白10,CXC或α-亚家族(CXCL10)的成员)和宿主血管生成因子(血管生成素1 (Ang-1)和血管生成素2 (Ang-2)的显著失调有关。然而，在疟疾患者中检测这些因素需要抽血，这是侵入性的，并增加了意外血液传播感染的风险。人们对使用唾液作为诊断包括疟疾在内的许多传染病的首选体液越来越感兴趣。在这里，在加纳的疟疾患者中评估了CXCL10、Ang-1和Ang-2的唾液水平，此前被证明可以预测严重疟疾。gydF4y2Ba

方法gydF4y2Ba

该研究在加纳阿克拉Dodowa的Shai-Osudoku地区医院进行，研究人群包括119名疟疾患者和94名非疟疾受试者。非疟疾受试者是没有感染疟疾的健康社区参与者。使用酶联免疫分析法测定研究参与者血浆和唾液中CXCL10、Ang-1和Ang-2的水平。用血液学自动分析仪测量每个参与者的全血细胞计数。采用Pearson相关性评价疟疾患者血浆和唾液中各生物标志物水平的相关性。p值< 0.05被认为是显著的。绘制中位生物标志物浓度的箱线图。采用SPSS 14.2版本软件进行统计分析。gydF4y2Ba

结果gydF4y2Ba

非疟疾受试者的中位年龄为29岁，而疟疾患者的中位年龄为23岁(p = 0.001)。在疟疾患者中，CXCL10 (RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba= 0.7, p < 0.0001)和Ang-1 (RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba= 0.7, p < 0.0001)。与非疟疾患者相比，疟疾患者唾液中Ang-1水平较低(p = 0.009)，唾液中CXCL10和Ang-2水平较高(p = 0.004)。gydF4y2Ba

结论gydF4y2Ba

这项研究首次提供了疟疾患者唾液中CXCL10和Ang-2水平升高的证据。唾液中CXCL10、Ang-1和Ang-2的检测可能在非侵入性疟疾诊断中具有潜在的应用价值。gydF4y2Ba

疟疾仍然是一个主要的公共卫生问题，2019年全球估计有2.29亿例病例和40.9万例相关死亡，其中64%的死亡发生在5岁以下儿童[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba］．疟疾的快速和准确诊断是有效控制和管理该疾病并避免不必要的臆断治疗的关键[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]以及疟疾治疗的误用和滥用[gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

显微镜检查一直是疟疾诊断的主要手段。然而，根据显微镜师的不同，现场条件下的灵敏度和特异性可能分别低至10%和71% [gydF4y2Ba4gydF4y2Ba］．此外，显微镜是费力的，在低寄生虫密度下确定物种是具有挑战性的[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba，gydF4y2Ba5gydF4y2Ba］．为了克服显微镜的局限性，开发精确、灵敏和具有成本效益的快速诊断试验(RDTs)gydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba血液中的抗原被促进[gydF4y2Ba6gydF4y2Ba］．然而，由于快速诊断检测的使用不准确、储存条件差和未能检测到低寄生虫血症，疟疾病例有时在使用快速诊断检测时未被发现，这可能导致疟疾的持续传播[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba］．此外，快速诊断检测依赖于手指穿刺采血，这需要经过培训的人员，造成感染风险，并可能使儿童和血液禁忌社区的合作复杂化[gydF4y2Ba8gydF4y2Ba］．因此，迫切需要开发一种简单的非侵入性、具有成本效益的诊断工具，减少采血需求，并适用于疟疾流行和资源有限的地区。gydF4y2Ba

最近，唾液已成为一种可行的替代体液，用于分析和实验目的，这是因为唾液易于使用，卫生保健工作人员只需接受有限的培训和极少的专门设备使用需求即可获得[gydF4y2Ba5gydF4y2Ba］．生物标记物在癌症、糖尿病、自身免疫疾病和艾滋病毒/艾滋病等疾病的诊断和预测疾病严重程度方面非常有用[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba］．在口腔癌患者的唾液中已检测出一些恶性肿瘤的分子标记物，并已开发出以唾液为基础的诊断试剂盒，用于诊断艾滋病毒和人乳头瘤病毒[gydF4y2Ba11gydF4y2Ba，gydF4y2Ba12gydF4y2Ba］．血液中的生物标记物已被用于评估疟疾的炎症反应模式及其与感染严重程度的关系[gydF4y2Ba13gydF4y2Ba］．然而，在唾液中筛选独特的特异性和敏感性的生物标记物来诊断和预测疟疾的严重程度，在疟疾领域的研究人员中受到了有限的关注和接受度。gydF4y2Ba

血管生成素是血管生长因子家族中的独特成员，在介导血管内皮内的炎症和静止中发挥重要作用[gydF4y2Ba14gydF4y2Ba］．血浆或血清血管生成素在炎症性肠病等其他疾病中已得到广泛研究[gydF4y2Ba15gydF4y2Ba肿瘤、炎症、感染性病理、神经内分泌肿瘤、类风湿性关节炎和疟疾[gydF4y2Ba16gydF4y2Ba，gydF4y2Ba17gydF4y2Ba，gydF4y2Ba18gydF4y2Ba，gydF4y2Ba19gydF4y2Ba］．CXCL10是一种由IFN-γ、TNF和其他因子诱导的强效血管抑制和促炎趋化因子，对活化的Th1淋巴细胞具有趋化活性，而Th1淋巴细胞已被证明是严重疟疾的预后生物标志物[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba］．此前对印度和加纳疟疾患者的研究显示，血清和脑脊液样本中CXCL10水平升高，这些水平被发现与死亡风险增加有关gydF4y2Ba恶性疟原虫gydF4y2Ba-介导型严重疟疾[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba21gydF4y2Ba，gydF4y2Ba22gydF4y2Ba，gydF4y2Ba23gydF4y2Ba，gydF4y2Ba24gydF4y2Ba］．迄今为止，尚未有疟疾患者唾液和血液中CXCL10、Angiopoietin-1 (Ang-1)和Angiopoietin-2 (Ang-2)的检测和比较分析的报道和研究。gydF4y2Ba

在这项研究中，评估了唾液和血浆中CXCL10、Ang-1和Ang-2的水平，并将其与加纳非疟疾受试者(无疟疾感染的健康社区参与者)的疟疾患者的水平进行了比较，目的是评估它们在疾病的非侵入性诊断中的应用。gydF4y2Ba

研究人群gydF4y2Ba

该研究是一项病例对照研究，于2017年3月至6月在加纳阿克拉Dodowa的Shai-Osudoku区(SOD)医院进行。疟疾患者和非疟疾受试者从SOD医院招募。该研究招募了213名参与者，包括119名疟疾患者和94名非疟疾受试者。采用结构化问卷收集相关的社会人口学和临床数据。参与研究是自愿的，患者签署了知情同意书，如果是儿童，则由其父母/监护人签署。gydF4y2Ba

加纳大学卫生科学学院伦理和方案审查委员会批准了该研究方案。在这项病例对照研究中，评估了疟疾患者唾液中Ang-1、Ang-2和CXCL10生物标志物水平。疟疾病例定义为患有急性发热疾病的参与者，其定义为在发病后72小时内出现发热或发热史时腋窝温度≥37.5°CgydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba感染。疟疾确诊为厚薄血膜阳性，RDT阳性，血中寄生虫病≥2500/μl。对照组为pLDH/HRP-2 RDT阴性的健康社区参与者gydF4y2Ba恶性疟原虫gydF4y2Ba厚薄外周血染色涂片上的寄生虫病。这些健康的社区参与者在本研究中被归为非疟疾受试者。非疟疾受试者也没有发烧、体温、已知传染病或脑膜炎的病史，也没有意识受损的迹象。非疟疾受试者是从疟疾患者居住的社区招募的。患有影响血浆Ang-1、Ang-2和CXCL10水平的患者，如糖尿病、高血压、冠状动脉疾病、慢性炎症和自身免疫疾病以及癌症[gydF4y2Ba23gydF4y2Ba被排除在研究之外。gydF4y2Ba

血液取样和实验室处理gydF4y2Ba

从每个研究参与者中收集4毫升(4ml)的静脉血到乙二胺四乙酸(EDTA)管中。取2.0 ml血液置于CPT中，1000×离心15 mingydF4y2BaggydF4y2Ba使用Forma 3L Gp 4500R离心机(Thermo electron corporation, MA, USA)分离血浆、红细胞和外周血单个核细胞(PBMCs)，处理后的血浆保存在−80℃。使用全自动血液分析仪(迈瑞BC5300，中国)完成全血细胞计数(CBC)。采集2 h内EDTA血样制备厚、薄血膜载片，姬姆萨染色，检查有无寄生虫病。从每个参与者身上收集约1.5毫升未受刺激的唾液，放入含有防腐剂的OMNIgene-Oral试管(DNA genoTek，加拿大)。样品在分析前保存于28-30°C。gydF4y2Ba

Angiopoietin-1、Angiopoietin-2和CXCL10的测定gydF4y2Ba

使用商业Sandwich酶联免疫吸附法(研发系统，美国)根据制造商说明测定每个参与者血浆和唾液中的CXCL10、血管生成素-1和血管生成素-2水平。在30分钟内使用Spectra Max 190荧光微板阅读器(Molecular Devices Corp.， Sunnyvale, CA)测定光密度，波长设置为540 nm。gydF4y2Ba

统计分析gydF4y2Ba

数据输入社会科学统计包(SPSS) 14.2版本软件(SPSS Inc.，芝加哥，伊利诺伊州，美国)。为分类人口特征和贫血状况编制的频率表以百分比汇总。连续变量的结果用四分位区间(IQR)的中位数表示。卡方检验用于检验分类变量的差异。当细胞数< 5时使用Fisher确切检验。采用Kruskal Wallis检验或Mann-Whitney U检验比较疟疾患者与非疟疾受试者的中值连续变量差异。采用Pearson相关性评价疟疾患者血浆和唾液中各生物标志物水平的相关性。p值< 0.05被认为是显著的。绘制了第25和75百分位的中位生物标志物浓度的箱线图。采用SPSS 14.2版本软件(SPSS Inc.， Chicago, Illinois, USA)进行统计分析。 GraphPad Prism version 6 (La Jolla, CA) for windows was used to generate all the graphs.

研究参与者gydF4y2Ba

共有213名参与者参与了这项研究，其中包括94名非疟疾受试者和119名疟疾患者gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．疟疾患者与非疟疾参与者的性别分布无显著差异(表2)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．疟疾患者的中位年龄为23岁，非疟疾受试者的中位年龄为29岁(p = 0.001)(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．gydF4y2Ba

受试者全血计数gydF4y2Ba

疟疾患者血小板计数中位数显著低于非疟疾受试者(p < 0.001)(表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．疟疾患者与非疟疾患者淋巴细胞绝对计数差异有统计学意义(p < 0.001)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．疟疾患者与非疟疾患者白细胞计数差异无统计学意义(p = 0.396)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．大约31%的疟疾患者患有贫血，而非疟疾患者的这一比例为16% (p = 0.011)(见表gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．gydF4y2Ba

疟疾患者唾液和血浆样本中血管生成素- (Ang-1)、血管生成素-2 (Ang-2)和CXCL10的相关性gydF4y2Ba

为了确定唾液和血浆中Ang-1、Ang-2和CXCL10的关系，我们进行Pearson相关性分析，以确定唾液和血浆样本中这些标记的相关性。CXCL10 (RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba= 0.7, p < 0.0001)和Ang-1 (RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba= 0.7, p < 0.0001)唾液和血浆之间的水平(图。gydF4y2Ba1gydF4y2BaA和1B)。虽然唾液和血浆中Ang-2水平的相关性是显著的(P = 0.0092)，但相关性是中等的(RgydF4y2Ba^2gydF4y2Ba= 0.4)(图gydF4y2Ba1gydF4y2BaC)。gydF4y2Ba

血浆和唾液中的血管生成素-1 (Ang-1)、血管生成素-2 (Ang-2)和CXCL10水平受疟疾状况的影响gydF4y2Ba

疟疾患者唾液Ang-1水平明显低于非疟疾受试者，p = 0.009(图2)。gydF4y2Ba2gydF4y2BaA).在血浆Ang-1水平上也观察到类似的模式，疟疾患者的Ang-1水平明显低于非疟疾受试者，p < 0.001(图1)。gydF4y2Ba2gydF4y2BaB).疟疾患者唾液Ang-2水平明显高于非疟疾受试者(p = 0.001)。gydF4y2Ba3.gydF4y2BaA).同样，疟疾患者血浆Ang-2水平显著高于非疟疾受试者(p < 0.001)。gydF4y2Ba3.gydF4y2BaB).当将疟疾患者与非疟疾受试者进行比较时，唾液(p = 0.004)和血浆(p < 0.001)中CXCL10水平均较高。gydF4y2Ba4gydF4y2BaA、B)。gydF4y2Ba

本研究观察了疟疾研究参与者和非疟疾研究参与者的几种血液学因素的差异。与其他研究结果一致的是，与非疟疾组相比，疟疾患者的血红蛋白水平有显著差异gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)．这可能是由于寄生虫感染导致溶血，寄生的红细胞被消灭，从而导致贫血[gydF4y2Ba34gydF4y2Ba］．然而，疟疾感染组在严重贫血方面没有显著差异。这可能是本研究招募的老年参与者的结果，他们可能有更好的营养摄入，更强的免疫力，并经常对以前的疟疾感染产生部分免疫力[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba，gydF4y2Ba35gydF4y2Ba］．贫血是与疟疾有关的最常见并发症之一，特别是在易受感染的儿童和孕妇中。与未受感染组相比，受寄生虫感染组的血小板水平也显著下降，这一结果与其他研究一致[gydF4y2Ba34gydF4y2Ba，gydF4y2Ba35gydF4y2Ba］．本研究还观察到疟疾患者中性粒细胞和淋巴细胞水平的显著差异，这与其他研究结果一致[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba］．已发现在疟原虫感染期间血浆中Ang-2和CXCL10等生物标志物升高[gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba，gydF4y2Ba21gydF4y2Ba，gydF4y2Ba22gydF4y2Ba，gydF4y2Ba23gydF4y2Ba，gydF4y2Ba24gydF4y2Ba，gydF4y2Ba25gydF4y2Ba］．以前的报告已证实，可用于评估疟疾严重程度的Ang-2/Ang-1比率升高[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba］．在本研究中，疟疾患者的血浆和唾液Ang-2水平明显高于非疟疾受试者。这项研究还发现疟疾患者的血浆和唾液样本中Ang-1的水平显著降低。gydF4y2Ba

先前的研究表明，血浆中低水平的Ang-1和高水平的Ang-2与重症相关gydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba感染(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba］．在gydF4y2Ba恶性疟原虫gydF4y2Ba感染时，血管生成因子的产生已被发现与受感染红细胞与血管内皮的粘附增加有关[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba］．Ang-1和Ang-2是内皮激活和完整性的主要调节因子，在炎症条件下，由于内皮激活，它们的水平会发生改变[gydF4y2Ba27gydF4y2Ba，gydF4y2Ba28gydF4y2Ba］．其他研究也将Ang-1和Ang-2水平描述为区分非复杂疟疾和严重疟疾的可靠生物标志物[gydF4y2Ba29gydF4y2Ba］．这项研究只关注于确定疟疾患者唾液中这些标记物的水平，并将其与非疟疾受试者进行比较。然而，其他研究描述了Ang-1和Ang-2水平与严重疟疾的关系，其中Ang-1水平被认为是非复杂疟疾与严重疟疾的最佳鉴别器，并被发现可作为一种可靠的诊断生物标志物[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba，gydF4y2Ba29gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

根据这项研究，Sahu等人。[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba]报告了疟疾患者血浆Ang-2水平升高和血浆Ang-1水平降低，并发现Ang-2是一种更好的预示疟疾即将严重程度的预后标志gydF4y2Ba恶性疟原虫gydF4y2Ba疟疾感染程度高于其他疾病严重程度指标。与此同时，一项类似的研究也报告了患有严重疟疾的成人和儿童血浆中Ang-2水平的升高，并发现Ang-2比其他疾病严重程度的标记物更能预测死亡[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba］．gydF4y2Ba

Ang-2水平升高也与内皮损伤有关[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba，gydF4y2Ba31gydF4y2Ba］．尽管在疟疾患者中发现的Ang-1水平较低，但在接受恶性疟疾治疗并康复的患者中检测到的Ang-1水平较高，这表明Ang-1可能参与了疟疾的发病机制[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba，gydF4y2Ba32gydF4y2Ba，gydF4y2Ba33gydF4y2Ba］．虽然在本研究中，这些标记物在唾液中的水平没有在血浆中高，但值得注意的是，在疟疾患者的唾液中都能检测到Ang-1、Ang-2和CXCL10。此外，疟疾患者的唾液与血浆中Ang-1、Ang-2和CXCL10水平之间存在相关性，提示在唾液中也观察到血浆中这些生物标志物的增加或减少。目前，缺乏一种可靠的诊断工具来确定严重疟疾。然而，这些标记已被证明是无并发症疟疾的鉴别器，并可作为可靠的诊断标记[gydF4y2Ba24gydF4y2Ba，gydF4y2Ba29gydF4y2Ba］．在严重疟疾病例中，检测唾液中的这些标记为疟疾诊断提供了一种实用的替代方法，在这种情况下，这些标记已被证明可以区分不复杂的疟疾和严重的疟疾。在唾液中检测这些标记物比在血液中有一些明显的优势;唾液样本的采集与血液样本相比是无创的，采集时也无痛。gydF4y2Ba

这项研究首次提供了唾液中Ang-1、Ang-2和CXCL10能够区分疟疾患者和非疟疾受试者的证据。未来的目标是将这些因素纳入疟疾检测的护理点诊断包中，在疟疾患者的唾液中发现这些标记可以准确和早期发现疟疾，并立即进行干预。此外，这将提供一种非侵入性方法，在流行国家的流行病学调查中便利和便于对大量人群进行筛查。gydF4y2Ba

接受检查的患者数量较少，限制了将结果外推到其他人群的可能性，需要进一步的研究才能得出确切的结论。此外，研究中的受试者没有检测与这些生物标记相关的其他感染，以确定这些生物标记是否也将疟疾寄生虫感染与与这些生物标记相关的其他感染区分开来。因此，需要进行进一步的研究来检测这些生物标志物在疟疾和其他感染之间的区别。gydF4y2Ba

本研究提示在唾液中可以检测到疟疾的关键生物标志物Ang-1、Ang-2和CXCL10，可能在疟疾的临床诊断中具有潜在的应用价值。在进一步优化分析方案以提高灵敏度之后，它可以作为疟疾流行地区和大规模流行病学调查中检测疟疾的血液取样的补充或替代方法。然而，我们需要在不同的环境或人群中进行进一步的研究，以及唾液中这些生物标志物的敏感性和特异性，以验证我们目前的发现。gydF4y2Ba

资料可按要求提供。gydF4y2Ba

我们感谢研究参与者，没有他们，研究就不可能进行。我们感谢美国国立卫生研究院福格蒂国际中心通过福格蒂全球健康研究员项目联盟(由北卡罗莱纳大学、约翰霍普金斯大学、莫尔豪斯医学院和杜兰大学组成)对这项研究的支持。gydF4y2Ba

这项工作得到了福格蒂全球健康研究员计划联盟的支持，该联盟由北卡罗来纳大学约翰霍普金斯大学、莫尔豪斯医学院和杜兰大学(参考ID #: NIH/NINDS R01NS091616)组成。gydF4y2Ba

作者和隶属关系gydF4y2Ba

1. 加纳阿克拉，加纳大学医学院Korle-Bu教学医院病理科gydF4y2Ba

   塞西莉亚Elorm lekor &安德鲁A. AdjeigydF4y2Ba

2. 加纳大学医学院科勒布教学医院化学病理科，加纳阿克拉gydF4y2Ba

   Felix BotchwaygydF4y2Ba

3. 加纳大学野口医学研究纪念研究所免疫学系，加纳阿克拉gydF4y2Ba

   Kwadwo Asamoah KusigydF4y2Ba

4. 加纳大学野口纪念医学研究所寄生虫学系，加纳阿克拉gydF4y2Ba

   Kwadwo Asamoah Kusi & Michael D. WilsongydF4y2Ba

5. 美国佐治亚州亚特兰大市莫尔豪斯医学院微生物学、生物化学和免疫学学系gydF4y2Ba

   乔纳森·k·斯泰尔斯和娜娜·欧·威尔逊gydF4y2Ba

贡献gydF4y2Ba

概念化:CEL, NOW, JKS。数据管理:CEL, NOW, FAB。形式分析:CEL，现在。资金获取:现在，JKS。调查:CEL，马上。方法:CEL, NOW, FAB。项目管理:CEL, NOW, FAB。资源:CEL, NOW。软件:现在。监督:FAB, NOW, JKS。 Validation: CEL, NOW, FAB, JKS. Visualization: CEL, NOW, FAB. Writing-Original draft: CEL. Writing- Review and Editing: NOW, JKS, KAK, AAA, MDW. All authors read and approved the final manuscript.

相应的作者gydF4y2Ba

对应到gydF4y2BaCecilia Elorm lekorgydF4y2Ba或gydF4y2Ba娜娜·欧·威尔逊gydF4y2Ba．gydF4y2Ba

伦理批准和同意参与gydF4y2Ba

这项研究是自愿的，参与者只有在获得儿童和成人的父母和监护人的知情同意后才被纳入研究。所有参与研究的儿童和成人的监护人都得到了关于研究目标的完整解释，其中需要血液和唾液样本。为那些需要翻译的人提供了当地语言的通讯，并向拒绝参加或签署书面同意参加的人提供了机会。加纳大学卫生科学学院伦理和方案审查委员会(CHS 2016-2017)的知情同意和人体受试者研究指南批准了该研究。gydF4y2Ba

发表同意书gydF4y2Ba

获得患者/父母/监护人/亲属的书面知情同意，以发表其临床细节和/或临床图像。该同意书的副本可供本刊编辑审阅。gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

作者没有竞争利益。gydF4y2Ba

出版商的注意gydF4y2Ba

伟德体育在线施普林格自然对出版的地图和机构附属的管辖权要求保持中立。gydF4y2Ba

开放获取gydF4y2Ba本文遵循创作共用署名4.0国际许可协议(Creative Commons Attribution 4.0 International License)，该协议允许在任何媒体或格式中使用、分享、改编、分发和复制，只要您给予原作者和来源适当的署名，提供创作共用许可协议的链接，并说明是否有更改。本文中的图片或其他第三方材料包含在文章的创作共用许可中，除非在材料的信用额度中另有说明。如果材料不包含在文章的创作共用许可中，并且您的预期用途不被法律法规允许或超出了允许的用途，您将需要直接从版权所有者那里获得许可。欲查看此许可证的副本，请访问gydF4y2Bahttp://creativecommons.org/licenses/by/4.0/gydF4y2Ba．创作共用公共领域奉献放弃书(gydF4y2Bahttp://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/gydF4y2Ba)适用于本文提供的数据，除非在数据的信用额度中另有说明。gydF4y2Ba

转载及权限gydF4y2Ba