跳到主要内容

回肠末端组织常驻记忆T细胞反应谱的年龄依赖性年代.口服Ty21a免疫后的伤寒

摘要

背景

衰老对免疫系统的影响是明确的,并导致被称为免疫衰老的免疫状态的改变。在人类中,免疫衰老的机制几乎只在血液中进行了研究。然而,大多数免疫细胞存在于组织间室中,并表现出差异细胞(例如,记忆T细胞-T))子集分布。因此,了解组织中的免疫衰老是至关重要的,特别是那些暴露于病原体(如肠道)的组织。利用口服伤寒减毒活疫苗Ty21a的人体模型,我们研究了衰老对末端回肠(TI)组织常驻记忆T (TRM)细胞。TRM在感染部位提供即时的适应性效应免疫反应。然而,衰老是否影响TRM年代.感染部位的伤寒反应细胞(如TI)。在这里,我们确定了年龄对TI诱导的影响年代。Typhi-responsive TRMTy21a免疫诱导的亚群。

结果

我们观察到衰老会影响ti -固有层单个核细胞(LPMC) T的频率和TRM在ty21a疫苗接种组和对照组中。在未接种疫苗的志愿者中,LPMC CD103- CD4+ TRMLPMC中CD4/CD8比值与年龄呈正相关,与年龄呈负相关我们观察到老年志愿者有较弱的年代。与成人相比,Ty21a免疫后的伤寒特异性粘膜免疫反应。例如CD103+ CD4+ TRMIL-17A的产生减少,CD103- CD4+ TRM在Ty21a免疫后,老年人的IL-17A和IL-2水平低于成年人。在LPMC CD8+ T中也观察到类似的结果RM和CD103- CD8+ T细胞亚群。比较CD4+和CD8+ T的多功能(MF)谱RM老年人和成年人之间的亚群在诱发的单一(S)和MF反应的质量和数量上也有显著差异。

结论

衰老影响组织常驻T年代.口服ty21a免疫后回肠末端的伤寒特异性反应。这项研究首次提供了在老年人群中产生局部疫苗特异性反应的见解,并强调了在感染和衰老的背景下评估组织免疫反应的重要性。

试验注册

该研究已获机构审查委员会批准,并在ClinicalTrials.gov上注册(标识符NCT03970304, 2019年5月29日注册-追溯注册)

背景

衰老与免疫系统的衰退有关,免疫系统的功能逐渐下降,导致体液和细胞免疫反应减弱[12,这一过程被称为免疫衰老。研究表明,老年人的阴性临床结果与免疫衰老有关[3.4].例如,病毒和细菌感染(如流感、带状疱疹和肺炎球菌疾病)在老年人中比青年人更严重[567].虽然疫苗是预防传染病的最具成本效益的公共卫生干预措施之一,但老年人的疫苗诱导反应通常程度较低,并且不能在这一人群中提供长期保护性免疫[891011].T细胞库的改变也在衰老过程中得到了表征[1213].然而,我们目前对人体免疫衰老的了解主要来自于使用外周血的研究,而与年龄相关的粘膜微环境变化非常有限。这代表了一个重要的知识鸿沟,因为黏膜感染(如呼吸道、胃肠道和尿道)是老年人发病和死亡的主要原因。此外,在衰老的背景下,了解感染部位(主要是组织)对病原体的免疫是很重要的。

抗原特异性T细胞和B细胞反应的诱导对于抵御病原体的保护性免疫至关重要。在老年人中,抗体反应的数量和质量都不如在年轻人中观察到的反应[14].重要的是,衰老会影响T细胞室,naïve T细胞库的收缩显示了这一点[15]和末端分化细胞亚群的扩增与效应子功能的改变[16].近年来,一种新的记忆T细胞亚群——组织常驻记忆T细胞(TRM)已被证明是在感染部位诱导和介导保护性免疫的核心[1718].TRM代表T的非迁徙种群表型上不同于循环T子集(例如,T中央存储器(T厘米)和T效应存储器(T新兴市场),并在抗原回收后介导快速效应免疫反应[18].人类TRM主要表现为CD69的高表达,CD69是区分循环T19].整合素αEβ7 (CD103), e -钙粘蛋白的配体,也被用来表征TRM但CD103的表达主要局限于CD8+ TRM以及CD4+ T细胞的一小部分RM1920.2122].在人体肠道中,大多数CD4+ TRM为CD103- CD69+,少数为CD103+ CD69+ [19CD8+ TRM主要是CD103+ CD69+关于CD4+和CD8+ T的存在和作用的信息很少RM免疫衰老期间的种群。目前也不清楚这些局部TRM细胞在数量(细胞亚群的频率)方面受到老化过程的影响,重要的是,在感染或口服免疫后,它们对感染部位的病原体的反应特征方面受到影响。此外,我们对局部肠粘膜免疫衰老机制的了解非常有限。

大多数人类病原体通过粘膜部位感染宿主;然而,很少有获得许可的口服疫苗(例如,肠道沙门氏菌血清伤寒(年代.伤寒)。目前,美国有两种经批准的伤寒疫苗,分别是Ty21a减毒口服活疫苗和静脉注射Vi多糖疫苗[2324].Ty21a可以侵入粘膜并复制仅几个周期,模拟自然感染。Ty21a在现场提供中等水平的长期保护(60-80%,5-7年)[24].然而,机制年代.伤寒或Ty21a诱发TRMTI的反应尚未在成人中得到充分探索[252627282930.],在老年人中没有相关信息。尽管人类胃肠道是全身淋巴细胞的主要储库(~ 60%),并且是高抗原暴露的区域,但我们对肠道粘膜感染和口服疫苗的保护机制的了解非常有限,特别是关于口服疫苗接种后的免疫事件。这一巨大的知识差距阻碍了合理开发新的口服疫苗,以应对通过胃肠道进入宿主的病原体,特别是针对老年人。

在这项研究中,我们分析了从接种ty21a和未接种ty21a的个体中获得的TI LPMC记忆T细胞的年龄相关变化:(i) TI LPMC CD4+和CD8+ T/ TRM细胞亚群频率,(ii) TI LPMC CD4+和CD8+ T/ TRM年代.Ty21a免疫后的伤寒特异性反应。这些比较为年龄相关的世代提供了独特的见解年代.人TI黏膜中的伤寒特异性反应。

结果

老化影响TI LPMC T的频率和TRM细胞亚群

最近的证据表明,衰老会影响外周血中T细胞的频率和绝对数量。然而,衰老对人类肠道中T细胞频率的影响,特别是在末端回肠(TI)中,尚不清楚。为了探索这一现象,我们采用图S所示的门控策略,描述了新分离的TI-LPMC CD4+和CD8+ T细胞,包括它们的记忆亚群分布,以及从接种ty21a和未接种ty21a的志愿者活检标本中获得的组织常驻亚群1A.无论是否接种Ty21a疫苗,通过CD3表达测定的总LPMC T细胞频率在老年人(≥60岁)和成年人(< 60岁)之间没有发现差异(图S .)1B).有趣的是,观察到CD3+ CD4+ T细胞频率显著降低(p老年人与未接种疫苗的成年志愿者的差异< 0.05)。然而,在Ty21a之后,CD4+ T细胞的频率没有观察到差异(图S1B).对于CD3+ CD8+ T细胞,我们观察到一个趋势(p= 0.08)在老年人中存在高于未接种疫苗的成年志愿者的水平(图S1B).与CD4+ T细胞相似,Ty21a免疫后CD8+ T细胞的频率未见差异(图S .)1B)。

随后,我们确定了LPMC内存T (T)子集,即T-central/memory (T厘米(CD62L+ CD45RA-), T效应体/记忆体(T新兴市场) (cd62l - cd45ra -), t新兴市场-CD45RA + (TEMRA(CD62L- CD45RA+)和T naïve (T天真的) (CD62L+ CD45RA+),使用CD45RA和CD62L标记在老年和成年志愿者中定义这些亚群。我们观察到,在未接种疫苗的志愿者中,LPMC CD4+ T厘米(趋势;p= 0.07)和T天真的(重要;p< 0.05)的亚群在老年人中表现出较低的频率。1a).但LPMC CD4+ T之间差异无统计学意义新兴市场和TEMRA未接种疫苗的志愿者(图;1a). Ty21a免疫后,LPMC CD4+ T无统计学差异除趋势外的子集(p= 0.1)显示CD4+ T频率下降EMRA(无花果。1a). CD8+ T的相似观察结果未接种疫苗的志愿者中有LPMC CD8+ T亚型厘米和T天真的显著(p< 0.05)在老年人中降低(图;1b).然而,在Ty21a免疫后,LPMC CD4+ T内未观察到有统计学意义的差异厘米和TEMRA两组之间的子集(图;1a).有趣的是,在Ty21a免疫后,LPMC CD8+ T天真的显示有统计学意义(p与成年志愿者相比,老年人的CD8+ T水平< 0.05)较低新兴市场显示出趋势(p= 0.1),与成年志愿者相比,在Ty21a免疫接种后,老年志愿者的发病率有所增加。1b)。

图1
图1

从接种ty21a和未接种ty21a的志愿者中分离出的LPMC记忆T细胞频率的年龄差异。T比较包含T的子集厘米(CD62L + CD45RA), T新兴市场(cd62l - cd45ra -), tEMRA(CD62L- CD45RA+), T天真的(CD62L+ CD45RA+);< 60岁)和老年人(E;≥60岁)TI-LPMC (一个) CD4+ T和(bCD8+ T细胞分别来自接种ty21a(红色符号)和未接种ty21a(黑色符号)的志愿者。频率(cTI-LPMC CD4+ CD103+和CD4+ CD103- TRM和(dti-lpmc cd8 + cd69 + cd103 + (cd8 + tRM)和CD8+ CD69+ CD103- T细胞在成年和老年志愿者接种Ty21a后进行比较。每组的中值用水平黑条表示。显著差异用*表示P< 0.05, **P< 0.005。显示显著值的趋势由它们表示p

接下来,我们将重点放在新定义的组织常驻记忆T细胞上,使用CD69和CD103标记来描述CD4+和CD8+ TRM子集。有趣的是,在未接种疫苗的志愿者中,我们注意到有一种趋势(p= 0.09)为低频率CD103+ CD4+ TRM而CD103- CD4+ T的频率明显高于成人RM显示出趋势(p= 0.1)在老年人中高于成年人(图;1c). Ty21a免疫后,CD103+和CD103- CD4+ T频率差异无统计学意义RM成年人和老年人之间。两种LPMC的频率均为CD8+ TRM和CD103- CD8+ T细胞在老年志愿者和成年志愿者之间没有显著差异,无论接种Ty21a疫苗。1d).值得注意的是,在Ty21a免疫后,我们观察到显著的(p< 0.05) CD103+ CD4+ T频率降低RM在成年人和老年人中,显著的(p< 0.05) CD103- CD4+ T频率增加RM在成年人中,但在老年人中没有。1c).类似的趋势(p= 0.1)显示老年人CD103- CD8+ T水平升高RM(无花果。1d)。

LPMC CD4+和CD8+组织驻留细胞的年龄相关性

组织常驻记忆细胞在抵御病原体的保护性免疫中起着重要作用。然而,回肠末端TRM在未接种疫苗和接种ty21a疫苗的个体中,频率与年龄相关。在这里,我们使用Pearson相关分析来确定年龄与T之间的关联程度RMty21a疫苗接种者和未接种者的频率。有趣的是,在未接种疫苗的志愿者中,我们观察到LPMC CD103- CD4+ TRM显示了重要的(pCD103+ CD4+ T与年龄呈正相关(< 0.05)RM显示趋势(p= 0.06),与年龄的增加呈负相关(图;2a).在Ty21a免疫接种后,年龄与这两种细胞亚群频率之间没有明显的相关性(图21a免疫接种后年龄与这两种细胞亚群频率之间没有显著的相关性。2a).接下来,我们确定年龄和CD8+ T之间的关系RM频率。年龄与CD8+ T频率之间无显著相关性RM和CD103- CD8+ T细胞。2b).然而,在Ty21a免疫后,我们观察到显著的(pCD103- CD8+ T细胞频率与年龄呈正相关(图3)。2b)。

图2
图2

CD4+和CD8+ T的年龄依赖性关联RM口服Ty21a免疫后回肠黏膜的频率和T细胞亚群。年龄和组织常驻T细胞频率之间的相关性是用Pearson分析确定的。一个未接种的LPMC CD4+ CD103+ TRM(黑色符号),CD4+ CD103- TRM(蓝色符号),以及接种ty21a的LPMC CD4+ CD103+ TRM(绿色符号)和CD4+ CD103- TRM(红色符号)频率与志愿者的年龄相关。b同样,未接种的LPMC CD8+ TRM细胞(黑色符号),CD8+ CD103- T细胞(蓝色符号),以及ty21a接种的LPMC CD8+ TRM(绿色符号)和CD8+ CD103- T细胞(红色符号)的频率与志愿者的年龄相关。显著相关性用*表示P< 0.05。显示显著相关性的趋势由它们表示p

多项研究检查了包括法国、奥地利、西班牙、美国和中国在内的不同人群中的CD4:CD8比率,并显示出根据所评估人群的不同而增加、减少或没有变化[31323334].人们普遍认为,CD4:CD8比值倒置代表了与B细胞减少、晚期分化或衰老T细胞(CD8+ CD28-)扩增和人巨细胞病毒(HCMV)血清阳性升高相关的免疫危险因素[35].值得注意的是,CD4:CD8比值通常在外周血中而不是在组织中测定,并且从未在口服Ty21a免疫后测定。因此,我们测定了血液和回肠终端LPMC总CD3+ T细胞中的CD4/CD8比率,以及未接种疫苗和接种疫苗的志愿者的CD103+和CD103- T细胞亚群中的CD4/CD8比率。与Lin等人2016年报道的数据相似[34],我们观察到,在巴尔的摩队列中,PBMC中的CD4/CD8比率似乎随着年龄的增加而增加;然而,这些变化没有达到统计学意义。然而,未接种疫苗组和接种疫苗组之间没有观察到差异(图。3.a).相反,从未接种疫苗的志愿者中获得的TI LPMC CD3+ T细胞,CD4/CD8比值随着年龄的增长而下降,表现为显著的(p负相关(r=−0.466)3.b).值得注意的是,Ty21a免疫消除了这种负相关性,这表明免疫诱导CD3+ CD4+细胞涌入TI,特别是在老年人中(图21a)。3.b).我们接下来确定衰老对TI LPMC中CD4/CD8比率的影响是否主要是CD103+和/或CD103- T细胞(常驻T细胞)影响的结果。我们观察到,在未接种疫苗的个体中,CD103+和CD103- CD3+细胞均表现出趋势(p= 0.06),与年龄增长呈负相关(图;3.c, d)。然而,对于总CD3+细胞,口服Ty21a免疫消除了这两个亚群中的这些趋势(图。3.c, d)。因此,口服Ty21a免疫似乎影响老年人和成年人的局部T细胞库。

图3
图3

外周血中CD3+ T细胞和TI活检分离的LPMC中CD103+和CD103-亚群中CD4和CD8细胞比例的年龄依赖相关性CD4 / CD8细胞比例与年龄相关(一个) PBMC CD3+ T细胞,(b) LPMC CD3+ T细胞,(c) LPMC CD3+ CD103+ T细胞和(d) LPMC CD3+ CD103- T细胞。显著相关性和显示相关性的趋势分别用*和/或它们的p值表示

单表达和多功能LPMC CD4+和CD8+ T的年龄差异新兴市场年代.Ty21a免疫后的伤寒特异性反应

使用Ty21a人类疫苗接种模型,我们之前报道了诱导年代。TI LPMC CD4+中的伤寒特异性反应[25]和CD8+ [36]T子集。然而,这些研究并未涉及年龄差异。因为我们观察到T改变了老年LPMC(图;12而且3.),我们假设LPMC年代.与成年志愿者相比,老年志愿者在接种Ty21a疫苗后也会受到伤寒特异性反应的影响。为了验证这一假设,我们对LPMC进行了分层和分析年代.Typhi-specific T成人(< 60岁)和老年人(≥60岁)的应答子集。在包括伤寒在内的多种疾病中,与单一功能T细胞相比,抗原特异性多功能T细胞的诱导已被证明与良好的疾病结局、更高的效应功能和更高的保护功效相关[3738394041].此外,多功能T细胞和单功能T细胞最近已被证明表现出分子差异[42].我们以前已经表明,在Ty21a免疫接种后观察到的许多显著变化发生了,这取决于免疫接种的剂量年代。评估伤寒特异性反应,单表达(S)和/或多功能(MF) LPMC CD4+和CD8+ T新兴市场细胞(2526272836].因此,我们检查了S和MF LPMC CD4+和CD8+ T新兴市场S.该队列中的伤寒特异性反应。为此,我们使用Winlist FCOM函数同时分析多种细胞因子/趋化因子(即IFNγ、TNFα、IL-2、IL-17A和MIP1β)的产生和CD107a(细胞毒性标志物)的表达年代.伤寒特异性反应细胞,并将其分为单个细胞因子产生者/CD107a表达者(S)或多功能细胞因子产生者/CD107a表达者(双、三、四、五或六组细胞因子产生者/CD107a表达者的总和)(MF)。CD4 + T水平差异无统计学意义新兴市场-S用于Ty21a免疫后评估的任何反应(图21)。4a).然而,我们观察到LPMC CD4+ T新兴市场- mf诱导了更高水平的细胞因子(IFNγ-p= 0.1;- - - - - - - 2p< 0.05;IL-17A -p< 0.05;和MIP1β-p与未接种ty21a疫苗的志愿者相比,接种ty21a疫苗的志愿者< 0.05)。4b).用于LPMC CD8+ T新兴市场,我们观察到Ty21a诱导显著(p< 0.05) CD107a-S、IL-17A-MF水平升高,且有趋势(p= 0.1),与未接种疫苗的志愿者相比,接种疫苗的志愿者IFNγ-MF水平更高。4c - d)。值得注意的是,本队列中的这些发现证实了我们之前的报告,在该报告中,我们研究了包括成人(< 60岁)和老年人(≥60岁)志愿者的人群。

图4
图4

多功能(MF)和单表达(S)年代。伤寒特异性CD4+和CD8+ T新兴市场Ty21a免疫后的反应。网年代。Typhi-specific CD4+CD8+ T新兴市场利用Winlist的FCOM函数计算响应,并将响应分为S响应和MF响应。TI LPMC的比较年代。Typhi-specific (一个) cd4 + t新兴市场年代,(b) cd4 + t新兴市场MF (c) cd8 + t新兴市场S及(d) cd8 + t新兴市场接种ty21a的志愿者(红色符号)和未接种ty21a的志愿者(黑色符号)之间的MF反应被测定,差异有显著性(*P< 0.05)。显示显著性值的趋势由它们的p值表示。水平的黑条表示中值

接下来,我们研究了年龄对特征和水平的影响年代。伤寒特异性S和MF LPMC CD4+和CD8+ T新兴市场接种Ty21a疫苗后,将当前队列分为老年人(≥60岁)组和成人(< 60岁)组。首先,我们分析了网络年代.LPMC CD4 + T的伤寒特异性反应新兴市场在老年人和成年人之间。有趣的是,我们观察到有统计学意义的(p与成人相比,老年人接种Ty21a后MF IFNγ、TNFα、IL-2、IL-17A和CD107a的表达水平均低于0.05。5a e)。此外,我们观察到一个趋势(p= 0.07), CD4+ T反应较低新兴市场与成年志愿者相比,老年志愿者在Ty21a免疫接种后MIP1β +水平升高(图2)。5f). CD4+ T无统计学差异或趋势新兴市场-S用于CD107a, IFNγ, TNFα, IL-17A和MIP1β(图;5A -c, e, f).趋势(p= 0.1),表明与成年志愿者相比,老年志愿者在Ty21a免疫接种后IL-2-S的反应也有所下降(图21)。5d).有趣的是,我们还观察到,在未接种疫苗的志愿者中,CD4+ T的水平新兴市场MF较高(IFNγ (p= 0.08);IL-17A (p < 0.05)和MIP1β (p < 0.05)p= 0.09)。5b, e-f)。因此,我们认为衰老影响了诱导的LPMC年代.Ty21a免疫后的伤寒特异性CD4+ T反应。

图5
图5

多功能(MF)和单表达(S)年代。伤寒特异性CD4+ T新兴市场与老年志愿者接种Ty21a疫苗后的反应相比。网年代。Typhi-specific CD4+T新兴市场使用Winlist的FCOM函数计算响应,并将响应分层为单表达(S)和MF响应。TI LPMC的比较年代。伤寒特异性CD4+ T新兴市场成年人(A- < 60岁)和老年人(E-≥60岁)在(一个) CD107a+, (b) inf -γ+, (ctnf -α+, (d) il-17a +, (e) IL-2+,和(f)接种ty21a的志愿者(红色符号)和未接种ty21a的志愿者(黑色符号)MIP-1β + S和MF的反应有显著差异(*P< 0.05)。显示显著性值的趋势由它们的p值表示。水平的黑条表示中值

相比之下,网络分析年代.LPMC CD8+ T的伤寒特异性反应新兴市场结果显示,老年人和成人接种Ty21a后,MF IFNγ、TNFα、IL-2、IL-17A、MIP1β的水平或CD107a的表达均无统计学差异。6f)。CD8+ T比较差异无统计学意义新兴市场观察-S对IFNγ、TNFα、IL-2、MIP1β及CD107a表达的影响(图;6a-d, f),除了趋势(p= 0.07)的IL-17A-S在老年人中的表达水平高于成人(图。6e).此外,我们观察到的趋势显示在年代.伤寒特异性CD8+ T新兴市场(IL-17A-MF (p= 0.09)和CD107a-S (p= 0.09)),接种Ty21a疫苗的成年志愿者比未接种疫苗的成年志愿者要多,但在老年志愿者中则不是这样(图9)。6a-b, e)。此外,趋势(p= 0.1),与未接种疫苗的老年志愿者相比,接种疫苗的IFNγ-MF显示出更高的Ty21a水平(图。6b)。

图6
图6

LPMC多功能(MF)和单表达(S)年代。伤寒特异性CD8+ T新兴市场与老年志愿者接种Ty21a疫苗后的反应相比。网年代。伤寒特异性CD8+ T新兴市场利用Winlist的FCOM函数计算响应,并将响应分为S响应和MF响应。TI LPMC的比较年代。伤寒特异性CD8+ T新兴市场回复(一个) CD107a+, (b) inf -γ, (ctnf -α+, (d) il-17a +, (e) IL-2+,和(fMIP-1β + S和MF在成年(A- < 60岁)和老年(E-≥60岁)志愿者之间的差异,这些志愿者要么口服Ty21a疫苗(红色符号),要么未接种Ty21a疫苗(黑色符号)。显示显著值的趋势由它们的p值表示。水平的黑条表示中值

年龄差异年代.LPMC-CD4+ T的伤寒特异性反应RMTy21a免疫后的亚群

组织常驻记忆T细胞有助于感染后感染部位的局部免疫反应,并最终对病原体产生保护性免疫[4344].CD4+ T细胞的组成和功能是衰老过程中观察到的主要变化之一[445].例如,经典的CD4+ T细胞亚群已被证明在衰老过程中受到影响,其增殖和IL-2的产生减少[46].此外,调节性T细胞(T海军学校规则)随着年龄的增长而降低效应T细胞的反应性[47].然而,衰老对LPMC T的影响却知之甚少RM特别是在口服免疫的情况下。在这里,我们利用人类Ty21a免疫模型来确定衰老对人类T病毒的影响RM抗原的反应。我们首先确定了衰老对LPMC CD4+ T反应的影响RM通过检查网的子集年代.老年和成年志愿者的伤寒特异性反应。如前所述,使用CD69和CD103标记,TI-LPMC CD4+ TRM由CD103- CD69+(~ 70%)和CD103+ CD69+(~ 20%)两个群体组成(图S1A).我们观察到CD103+ CD4+ TRM显示出趋势(p= 0.1)显示老年志愿者在Ty21a免疫后IL-17A反应低于成年志愿者(图2)。7a).相反,CD103- CD4+ TRM显示显著(p与成人相比,老年人接种Ty21a免疫后IL-17A和IL-2水平下降< 0.05。7b).重要的是,观察到成人对IFN-γ的反应显著增加(pCD4+ CD103+ CD69+ T细胞中IL-17A的表达(p < 0.05)RM至于IL-17A (p< 0.05)和IL-2 (pCD4+ CD103- CD69+ T < 0.005)RMTy21a免疫后(图;7a - b)。

图7
图7

年代.TI LPMC CD69+ CD103+ CD4+ T的伤寒特异性反应RMCD69+ CD103- CD4+ TRM健康成人和老年志愿者口服ty21a免疫后的亚群。的净百分比年代.伤寒特异性反应(IFNγ+, IL-17A+, IL-2+和TNFα+)一个cd69 + cd103 + cd4 + tRM和(bcd69 + cd103 - cd4 + tRM比较了成年(A- < 60岁)和老年(E-≥60岁)志愿者之间的亚群,这些志愿者要么接种了ty21a疫苗(红色符号),要么未接种ty21a疫苗(黑色符号),差异有显著性(*P< 0.05)表示。显示显著性的趋势由它们的p值表示。水平条(黑色)表示中值

进一步探讨LPMC CD103+与CD103- CD4+ T的差异RM年代.老年人和成年人之间的伤寒特异性反应,我们使用Winlist FCOM函数来分析个体中的多种细胞因子(即IFNγ, IL-17A, IL-2和TNFα)年代.伤寒特异性反应细胞,并将其分为单一细胞因子产生者(S)和多功能细胞因子产生者(双、三重和四重细胞因子产生者的总和)(MF)。首先,我们分析了网络年代.伤寒特异性LPMC CD103+ CD4+ TRMIFN-γ、IL-17A和tnf - α MF无显著差异年代.老年和成年志愿者在接种Ty21a疫苗后的伤寒特异性反应(表S1).然而,我们注意到一个趋势(p= 0.1)显示从LPMC CD103+ CD4+ T中获得的IL-2-MF的产生减少RM与成年人相比,接种Ty21a疫苗后老年人的发病率有所下降(表S1).相比之下,年代.伤寒特异性LPMC CD103+ CD4+ TRMS的响应呈现(p= 0.1),表明与成年ty21a疫苗接种志愿者相比,老年人IFNγ-S增加,IL-17A-S减少(p = 0.1)1).LPMC CD103+ CD4+ T细胞IL-2-S和TNFα-S分泌无显著差异RM在老年人和成年人接种Ty21a疫苗后均有显著差异(表S1).

接下来,我们分析了网络年代.伤寒特异性LPMC CD103- CD4+ TRMMF反应,并发现IFN-γ和tnf - α MF无显著差异年代.Ty21a免疫后老年人和成年人之间的伤寒特异性反应(表S1).然而,我们注意到一个趋势(p= 0.1)显示IL-17A-MF和IL-2-MF的产生减少,以及CD103- CD4+ T中IL-17A-S的产生减少RM与成年志愿者相比,老年志愿者在接种Ty21a疫苗后的发病率有所下降(表S1).差异无统计学意义年代.从LPMC CD103- CD4 + T中产生伤寒特异性IFNγ-S, IL-2-S和TNFα-SRM在老年和成年志愿者接种Ty21a疫苗后观察到(表S1).

有趣的是,我们注意到CD4+ TRM亚型,特别是CD103- CD4+ TRMα-CD3/CD28刺激反应在老年志愿者和成年志愿者之间存在一定差异。例如,CD4 + TRM在两个年龄组中检测的亚群反应表明,α-CD3/CD28珠对成人和老年人CD103+ CD4 + T的刺激效果相同RM在两个年龄组中产生高多功能IFNγ, IL-17A, IL-2和TNFα亚群(表S1).口服ty21a免疫没有显著影响任何测量的细胞因子反应(表S1).有趣的是,成人和老年人CD103- CD4+ TRMα-CD3/CD28珠同样能很好地刺激产生多功能IFNγ、IL-17A+、IL-2+和TNFα MF反应(表S1).然而,CD103- CD4+ TRM显示显著(p< 0.05) IFNγ-S的产生水平降低,并且趋势(pα-CD3/CD28珠刺激后,老年人IL-17A水平低于成年ty21a接种志愿者(表S .)1).CD103- CD4+ T刺激后,成年和老年志愿者之间无统计学差异RMα-CD3/CD28珠在IL-2和TNFα产生中的作用(表S1).这些颗粒数据表明,衰老和口服ty21a免疫有可能在一定程度上影响LPMC CD4+ T的内在差异RM产生明显的刺激特性。

年龄差异年代.LPMC CD8+ T的伤寒特异性反应RMTy21a免疫后的亚群

在人类中,naïve和记忆CD8+ T细胞比例的变化是衰老过程的一个显著特征。此外,PBMC中的CD8+ T细胞已被证明具有细胞增殖受损,CD57表达水平较高(衰老标记物)和细胞激活标记物降低[48].CD8 + TRM是一种主要的T细胞亚群,位于回肠末端(主要感染部位年代.伤寒)。然而,没有关于其在年代.老年人口服Ty21a免疫后出现伤寒特异性反应。由于我们没有观察到LPMC CD8+ T频率的显著变化RM和CD103- CD8+ T细胞之间的差异,我们假设CD8+ T细胞和CD103- CD8+ T细胞之间的差异RM老年人和成人接种Ty21a后,CD103- CD8+ T细胞的反应相似。为了验证这一假设,我们进行了比较年代.CD8+ T的伤寒特异性反应RM老年和成年志愿者接种Ty21a后CD103- CD8+ T细胞的变化。我们观察到CD8+ TRM显示出趋势(p= 0.1)显示出IL-17A的减少,但与成年志愿者相比,老年志愿者在Ty21a免疫接种后IFNγ、IL-2和TNFα的产生没有减少(图21)。8a).相反,我们观察到CD103- CD8+ T细胞显著(p与成年志愿者相比,老年志愿者在Ty21a免疫接种后IL-17A水平较低(p = 0.1), IL-2反应呈下降趋势。8b)。

图8
图8

年代.回肠终端LPMC CD8+ T的伤寒特异性反应RM健康成人和老年志愿者口服Ty21a免疫后CD8+ CD69+ CD103- T细胞亚群的变化。的净百分比年代.伤寒特异性反应(IFNγ+, IL-17A+, IL-2+和TNFα+)一个) cd8 + tRM和(b比较了成年(A- < 60岁)和老年(E-≥60岁)志愿者的CD8+ CD69+ CD103- T细胞亚群,这些志愿者分别接种了ty21a疫苗(红色符号)和未接种ty21a疫苗(黑色符号)。显著差异(*P< 0.05;**P< 0.005;***P< 0.0005)表示。显示重要性的趋势由它们表示p值。水平条(黑色)表示中值

进一步研究LPMC CD8+ T的差异RMCD103- CD69+ CD8+ T细胞年代.老年人和成年志愿者之间的伤寒特异性反应,我们使用上述Winlist FCOM函数分析CD4+ T的数据RM细胞。首先,我们分析了网络年代.伤寒特异性LPMC CD8+ TRMTy21a免疫接种后,老年人和成年人的IFN-γ、IL-17A、IL-2和tnf - α MF反应无统计学差异(表S .)2),除了趋势(p= 0.1),老年人的IL-2 MF细胞水平低于成年人(表S2).此外,LPMC CD8+ TRM与成年志愿者相比,接种ty21a的老年人的反应显示出IL-17A和TNFα下降的趋势(p = 0.1),但IFNγ和IL-2没有下降(表S2).接下来,我们分析了网络年代.伤寒特异性LPMC CD103- CD8+ T S和MF反应。重要的(p在老年人和成年人中,Ty21a免疫接种后IL-17A-S下降,但IFN-γ、IL-2和tnf - α S和MF反应没有下降(表S)2).

值得注意的是,我们观察到在α-CD3/CD28刺激后,CD8+ TRMCD103- CD8+ T细胞在老年志愿者和成年志愿者中表现出不同的反应。由于CD8+ CD28- T细胞在衰老过程中容易积聚,并可能存在于肠粘膜中,我们假设衰老可能会影响CD8+ T的能力RM以及CD103- CD8+ T细胞对刺激的反应。为了解决这一假设,我们评估了CD8+ TRM和CD103- CD8+ T细胞细胞因子,这些细胞来自老年人和成人志愿者,在α-CD3/CD28珠刺激后获得。

有趣的是,α-CD3/CD28珠同样能刺激CD8+ TRM在成人和老年人中产生高水平的IFNγ, IL-17A, IL-2和TNFα S和MF(表S2),除了IL-2-S在显著(p< 0.05)为较高水平(表S2),并显示出趋势(p= 0.1)显示老年志愿者的TNFα-S水平高于未接种疫苗的成年志愿者(表S2).相反,α-CD3/CD28珠刺激后,LPMC CD103- CD8+ T细胞显著产生(p老年人IFNγ MF水平高于未接种疫苗的成年志愿者(表S2).然而,CD103- CD8 + T细胞产生的IL-17-S在老年人中水平下降(未接种疫苗的趋势是,p= 0.1;ty21a疫苗接种显著pα-CD3/CD28小珠刺激后的小鼠(表S2).此外,CD103- CD8+ T细胞呈(p= 0.1)表明,与成年人相比,接种ty21a疫苗的志愿者在α-CD3/CD28珠刺激后,IL-17-MF在老年人中有所下降(表S2).CD103- CD8+ T对IL-2 S和MF的产生无统计学差异(表S2).值得注意的是,TNFα S (*p< 0.05, **p< 0.005)和MF (* .p无论是否接种Ty21a疫苗,老年志愿者获得的LPMC CD103- CD8+ T细胞均比成年志愿者有< 0.05的应答(表S .)2).

老年人和成人HCMV状态和组织常驻受体(CD69和CD103)表达

由于人类巨细胞病毒(HCMV)感染在免疫衰老中的作用[4950],我们还确定了HCMV血清阳性(HCMV暴露的一个指标)是否对患者有影响年代。LPMC中的伤寒特异性反应。如表S所示3.成人(< 60岁)HCMV血清阳性水平在所有组中相似。在小于60岁的成年人中。我们观察到52%未接种疫苗的志愿者和50%接种Ty21a疫苗的志愿者HCMV血清呈阳性(表S3.).在老年人(≥60岁)队列中,未接种疫苗者和ty21a疫苗者的HCMV血清阳性分别为50%和38%(表S3.).

进一步了解影响差异的因素年代.成年人和老年人之间的伤寒特异性反应,我们比较了Ty21a免疫接种后和未接种的两组志愿者之间表达CD69或CD103的LPMC T细胞的频率。我们观察到LPMC CD4+ T的频率无差异新兴市场无论是否接种Ty21a疫苗,在成年和老年志愿者中表达CD69或CD103(图S2A).然而,对于LPMC CD8+ T新兴市场时,我们检测到显著(pCD69+ CD8+ T水平< 0.05)新兴市场老年人的细胞比未接种疫苗的成年志愿者的细胞多(图S2B).接种Ty21a疫苗后,CD69+ CD8+ T未观察到差异新兴市场细胞在两个种群之间,但显著(p< 0.005) CD69+ CD8+ T减少新兴市场在老年志愿者接种Ty21a疫苗后观察到细胞(图S2B).在CD103表达方面,两组间除有趋势外,无统计学差异(p= 0.1)显示CD103+ CD8+ T频率降低新兴市场接种Ty21a疫苗后(图S2因此,口服Ty21a免疫对成年人和老年人中表达CD69和CD103的细胞频率有不同的影响,这取决于T细胞亚群。

讨论

免疫系统的年龄依赖性变化对免疫细胞功能有明显影响,特别是在疫苗效力降低方面,老年人的疫苗诱导反应较差[891011].疫苗介导的保护性免疫通常是通过诱导适当的抗体和细胞免疫反应(CMI)介导的。大多数研究免疫衰老的人类研究使用从外周血(PBMC)分离的细胞,这主要是由于易于获取。然而,大多数免疫细胞(如TRM)存在于组织中,在功能和表型上与PBMC中的不同。TRM在自然感染及其继发接触后的保护性免疫中发挥关键作用[515253].然而,关于衰老对T . T .的影响的信息非常有限RM特别是在人类TI中口服免疫(例如Ty21a)的情况下。在这里,我们检查和比较ty21a免疫在TI LPMC T上引起的反应和TRM从老年和成年志愿者的活组织切片中分离出的子集。我们发现,衰老影响几个免疫参数,包括(i) CD4+ T的频率RM不考虑Ty21a免疫的亚群;(ii) CD4/CD8比值,TI LPMC中CD4/CD8比值与血液中不同,随着年龄的增长而降低;Ty21a免疫显著提高LPMC CD4/CD8比值;(iii) TI-LPMC CD4+ T的频率新兴市场的数据明显低于年代.口服Ty21a免疫后的伤寒特异性多功能反应;CD8 + T新兴市场CD4+ T反应受影响较小新兴市场;(iv) TI-LPMC CD4+ T的频率RM亚群,显著低于成人年代.Ty21a免疫后产生伤寒特异性IL-17A和IL-2;(v) TI-LPMC CD8+ T的频率RM和CD103- CD8+ T细胞,表现出较低的比例年代。伤寒特异性IL-17A和IL-2高于成人。综上所述,这些结果为衰老对人类TI-LPMC T的影响提供了重要的新信息和TRM口服Ty21a免疫后的反应。

在老年人中,T细胞群的改变与免疫力下降有关。例如,与年轻人相比,老年人PBMC naïve T细胞的频率显著降低,这可能是胸腺退化的结果[54].在肠道中,naïve细胞的频率已经很低了。然而,我们能够记录TI LPMC CD4+和CD8+ T天真的老年人的数量明显低于成年人。在老年人的直肠-乙状结肠中也有类似的发现[55].这些结果表明,T细胞群的改变不仅发生在血液中,也发生在组织中。对人类的研究表明,在衰老过程中,外周血CD4+和CD8+亚群中的记忆细胞和效应细胞数量都有所增加[56].在这里,我们观察到LPMC CD4+(趋势)和CD8+(显著)T水平较低厘米,但LPMC T的频率无显著差异新兴市场和TEMRA未接种疫苗的老年人的发病率高于成年人。口服Ty21a免疫可导致局部黏膜中这些记忆亚群水平的改变,这在成年人和老年人之间存在差异。CD4+和CD8+ T细胞的反应与年龄相关的差异,以前曾报道过针对病毒(例如,流感,黄热病),细菌(例如,链球菌肺炎)和寄生虫病(例如:恶性疟原虫)传染病[1157585960].我们的研究证实了CD4+和CD8+反应与年龄相关的差异,这些差异与老年人较低的疫苗接种效果有关[86162].然而,大多数研究是使用PBMC进行的。相比之下,我们的数据显示年龄影响口服减毒口服疫苗对主要细菌病原体的免疫后的免疫,通过提供直接证据,年龄不仅影响全身反应,而且影响粘膜疫苗诱导的反应,扩展了这些发现。这些结果表明,老年人口服Ty21a疫苗接种可能不如年轻人有效,至少部分原因是观察到的Th17效应子的减少,Th17效应子是粘膜表面免疫的重要组成部分。有趣的是,我们的数据表明CD4+ T新兴市场和TRM疫苗诱导的反应是TI黏膜受老化影响的主要亚群,无论是在数量(频率)和反应特征方面。例如,口服Ty21a免疫可显著降低多功能CD4+ T新兴市场(CD107a, IFNγ, IL-17A, IL-2, TNFα和MIP1β)在老年人中的反应高于年轻人。老年人CD4+ T细胞中IL-17A和IL-2的产生也记录了类似的观察结果RM子集。低水平的年代.TI-LPMC CD8+ T中也观察到斑疹伤寒反应(如IL-17A和IL-2)RM和CD103-CD8+ T细胞。虽然大多数年代.老年人的伤寒特异性反应低于成年志愿者,这似乎不是由于老年人细胞的内在因素,因为他们能够对刺激做出反应。例如,在α-CD3/CD28刺激后,我们观察到CD4+ T产生的所有细胞因子(IFNγ, IL-17A, IL-2和TNFα)RM在老年人和成年人中相似。在我们的研究中需要注意的是,两个年龄组之间的年龄中位数差异(例如< 60岁和≥60岁),未接种疫苗组为11岁,ty21a疫苗组为15岁。这是由于健康成年人在45岁以后进行常规结肠镜检查的医学指征。很可能TRM从年轻人(18-45岁)的末端组织中获得的,可能在老年人和年轻人志愿者之间显示出更大的差异反应。综上所述,这些数据提供了证据,证明衰老不仅降低了Ty21a疫苗诱导的反应,而且还降低了肠道的反应,肠道是疫苗首选的进入部位年代。伤寒。值得注意的是,这些受损的反应不是由于LPMC T细胞不能产生细胞因子,因为CD3激活途径和主要的共刺激途径(CD28)在成人和老年人中似乎具有相似的功能。未来的研究需要阐明局部黏膜中阻碍疫苗诱导应答的机制。

TRM现在被认为是免疫记忆的重要组成部分,因为许多报告已经证明了TRM在调节保护性免疫时[1718].人肠道TRM在童年早期就已形成,并在整个成年期不断增加[63].在老年人群中,TRM在肠道中频率高且稳定,主要在固有层和上皮内淋巴细胞间室(IEL)中发现[63].在这里,我们通过显示LPMC CD4+ TRM亚群受衰老的影响,特别是CD103- CD4+ T的高频率RM但较低的效应反应,特别是IL-17A和IL-2在老年志愿者接种Ty21a后。另一方面,CD8+ TRM和CD103- CD8+ T细胞在黏膜中的细胞数量没有差异,但在老年志愿者中IL-17A和IL-2的反应也显著降低。然而,很难评估人类T细胞的寿命和组织保留RM随着时间的推移,对人T细胞年龄相关变化的研究RM已在其他组织(如肺)中进行了TRM对病原体,尤其是病毒的反应值得注意的是,我们对Ty21a疫苗接种后肠道年龄相关变化的观察结果与文献中报道的其他组织变化一致。例如,最近的一项研究调查了肺CD8+ TRM受到衰老的影响,以及它们在体外对流感和SARS-CoV-2暴露的反应[64].有趣的是,作者报道肺CD8+ T对年龄相关的磨损非常敏感,并表明CD8+ CD103+ CD69+ TRM流感特异性细胞随年龄增长而减少,而CD8+ CD69- CD103- T频率增加[64].相反,与暴露于流感不同,暴露于肺部CD8+ T细胞(包括T细胞)RM)对SARS-CoV-2的影响并不会诱导促炎细胞因子(包括I型、II型和III型干扰素)的产生,与志愿者的年龄无关[64].值得注意的是,这些志愿者对SARS-CoV-2有naïve的感染,可能不会有任何SARS-CoV-2特异性TRM在肺部。综合来看,这些数据表明TRM随着年龄的增长,局部黏膜保留了一些子集,但其特征、功能和数量受到影响。未来的研究需要解决胃肠道和呼吸道特定节段T细胞室的年龄相关变化,亚群特异性动态及其特征,以阐明TRM有可能成为未来疫苗的靶点。

最近的数据表明,老年人疫苗诱导的免疫功能受损与炎症和免疫衰老有关[6566].HCMV被认为是炎症的主要原因,健康个体通常无症状[67].全世界约25-90%的人口为HCMV血清阳性,在老年人中患病率较高[6869].HCMV潜伏感染的建立是一个常见的事件,可能与免疫衰老相关,通过增加CD8+和CD4 + t细胞池中高分化效应记忆细胞的水平[70].据报道,存在数量增加的特异性T注册和T滤泡辅助细胞在HCMV感染期间限制了老年人流感疫苗接种的效力,可能是由于当面对新抗原时,B细胞的帮助能力降低[71].相比之下,据报道HCMV感染似乎不影响各种淋巴细胞(如T细胞和NK细胞)的变化率[34].在我们的研究中,我们观察到所有组中HCMV血清阳性的百分比相似。此外,当我们比较年代。在接种Ty21a疫苗和未接种Ty21a疫苗的志愿者中,HCMV阳性和阴性个体之间的伤寒特异性IL-17A反应,我们观察到这两组之间没有显著差异。因此,HCMV血清阳性似乎不是观察到的年龄相关差异的主要决定因素年代.伤寒特异性疫苗诱导反应。然而,这些观察结果可能是由于我们的志愿者人数相对较少,健康状况和年龄范围(47-73岁)。进一步的研究将需要解决hcmv特异性记忆TRMTy21a免疫诱导的TCR库和T细胞亚群克隆扩增的相关性。

结论

与婴儿疫苗接种计划类似,老年人群将受益于高效的细菌疫苗,特别是那些针对由病原体引起的常见和严重感染的疫苗肺炎链球菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,艰难梭菌,肺炎克雷伯菌结核分枝杆菌和。如果这些疫苗能在感染部位(如呼吸道和胃肠道的粘膜表面)最佳地诱导免疫,并利用T菌的保护潜力,这些疫苗可能会更有效RM表达对这些病原体的适当免疫相关性。在这里,我们提供了第一个与年龄相关的组织常驻CD4+和CD8+ T诱导差异的证据RMTy21a免疫后。这些结果为我们理解衰老对人体组织免疫细胞的影响以及口服减毒细菌免疫后老年人黏膜免疫的产生提供了新的见解。

方法

志愿者、免疫和样本收集

从巴尔的摩-华盛顿大都会区和马里兰大学巴尔的摩校区招募了接受常规结肠镜检查的个体(49-74岁)。既往无伤寒史且未接种Ty21a伤寒减毒口服疫苗的志愿者被分为两组。Ty21a的四种推荐剂量(Vivotif肠溶胶囊;瑞士伯尔尼克鲁塞尔)[72],给予第一组(成人(< 60岁)n= 10;老年人(≥60岁)n= 8),而不是对照组(成人n= 21;上了年纪的n= 8)。在结肠镜检查前14-21天(免疫前)采集血液样本,以生成用于临床试验的自体EBV-B细胞系年代。Typhi-specific化验。结肠镜检查当天(第0天;接种疫苗后14 ~ 21天),使用大容量钳进行回肠末端活检[26].在抽血后立即用密度梯度离心分离PBMC,并按照标准技术在液氮中冷冻保存[73].

从回肠末端活检中分离固有层单个核细胞(LPMC)

如前所述,TI-LPMC是新分离的[26747576].简单地说,从接受常规结肠镜检查的志愿者那里收集活检后,组织用HBSS(不含CaCl)处理2, MgCl2, MgSO4;Gibco, Carlsbad, CA)和EDTA (10 mM;Ambion, Grand Island, NY),并大力摇晃45分钟以去除IEL。然后用胶原酶D (100 μg/mL;Roche, Indianapolis, IN)和DNase I (10 μg/mL;Affymetrix,克利夫兰,OH) 45分钟,然后使用Bullet Blender均质机(Next Advance Inc., Averill, NY)均质提取LPMC。LPMC要么立即用流式细胞仪染色进行免疫分型,要么过夜刺激。

靶细胞制备年代.伤寒感染

如前所述,从每个参与者的免疫前PBMC中产生自体eb病毒(EBV)转化淋巴母细胞系(EBV- b细胞)[7377].然后用wt-感染靶细胞年代。伤寒菌株ISP1820的MOI为7:1,如前所述[25].在体外LPMC刺激之前,对感染的靶细胞进行γ辐射(6000 rad)。确认年代.伤寒感染后,靶细胞进行抗染色沙门氏菌常见结构Ag (CSA-1, Kierkegaard and Perry, Gaithersburg, MD),并通过流式细胞术进行分析,如先前所述[7377].

刺激末端回肠LPMC

如前所述,新分离的TI-LPMC被用作效应细胞[2526].简单地说,LPMC分别与未感染或未感染的细胞共培养年代.伤寒EBV-B感染(MOI为7:1)。分别将仅用培养基培养或存在α-CD3/CD28的LPMC (Life technologies, Grand Island, NY)作为阴性和阳性对照。2 h后,加入0.5 μl高尔基止动剂(Monensin, BD)和0.5 μl高尔基塞剂(Brefeldin A, BD),在37℃、5% CO中继续培养过夜2

表面和细胞内染色

在一夜刺激后,对TI LPMC染色进行流式细胞术分析,如前所述[26].简单地说,对LPMC进行活/死鉴别(YEVID)染色(Invitrogen, Carlsbad, CA),然后用人免疫球蛋白(3 μg/mL;σ)。随后进行表面染色。简单地说,对于LPMC TRM在4°C下,用荧光标记单克隆抗体(单克隆抗体)对细胞进行30分钟染色,单克隆抗体指向CD13-Pacific Orange(内部偶联)、CD19-BV570 (HIB19, Biolegend, San Diego, CA)、CD3-BV650 (OKT3, Biolegend)、CD4-PE-Cy5 (RPA-T4, BD)、CD8-PerCP-Cy5.5 (SK1, BD)、CD45RA-biotin (HI100, BD)、CD62L-APC-A780 (DREG-56, eBioscience, San Diego, CA)和CD103-FITC (Ber-ACT8, BD)。清洗后,用链霉亲和素(SAV)-Qdot800 (Invitrogen)在4℃下染色30分钟。然后使用IC固定和渗透缓冲液固定和渗透细胞(8222/8333,eBioscience)。然后在4°C下用靶向白介素(IL)-17A-BV421 (BL168, Biolegend)、干扰素(IFN)-γ-PE-Cy7 (B27, BD)、肿瘤坏死因子(TNF)-α-Alexa 700 (MAb11, BD)、CD69-ECD (TP1.55.3, Beckman Coulter, Danvers, MA)和IL-2- bv605 (MQ1-17H12, Biolegend)的单克隆抗体进行过夜染色。对于LPMC T新兴市场用CD19-BV570 (HIB19, BioLegend)、CD13-Pacific Orange(内部结合)、CD3-BV650 (OKT3, BioLegend)、CD4-PE-Cy5 (RPA-T4, BD)、CD8-PerCP-Cy5.5 (SK1, BD)、CD45RA-biotin (HI100, BD)、CD62L-APC-A780 (DREG-56, eBioscience)和整合素α4β7-A647 (ACT1;内部共轭)在4°C 30分钟。至于TRM用链霉亲和素(SAV)-Qdot800 (Invitrogen)在4℃下染色30分钟。然后使用IC固定和渗透缓冲液固定和渗透细胞(8222/8333,eBioscience)。随后用靶向IL-17A-BV421 (BL168, BioLegend)、IFNγ-PE-Cy7 (B27, BD)、TNFα-Alexa 700 (MAb11, BD)、CD69-ECD (TP1.55.3, Beckman Coulter, Danvers, MA, USA)、IL-2-BV605 (MQ1-17H12, BioLegend)和MIP1β-PE (IC271P, R&D Systems)的单抗进行染色(4°C过夜)。染色后,细胞保存在1%多聚甲醛中,4°C,直到收集数据。使用定制的LSRII流式细胞仪(BD)收集数据,然后使用WinList version 7 (Verity Software House, Topsham, ME)软件包进行分析。年代。伤寒特异性反应以阳性细胞的净百分比表示(用未感染细胞刺激后的背景,从用未感染细胞刺激得到的值中减去年代。Typhi-infected目标)。利用WinList中的FCOM函数确定年代。TI LPMC中伤寒特异性MF反应。流式细胞仪实验在马里兰州巴尔的摩市马里兰大学医学院创新生物医学资源中心(CIBR)的流式细胞仪和海量细胞仪核心设备进行。

ELISA血巨细胞病毒

志愿者的血清被冷冻在-20°C,直到用酶联免疫分析法(GenWay Biotech Inc., San Diego, CA)检测HCMV特异性IgG,按照制造商的说明进行。校正后的吸光度值为0.25被认为是阳性的。

统计分析

数据分析使用统计软件GraphPad Prism™version 7 (GraphPad, San Diego, CA, USA)。采用Mann-Whitney检验确定两组间中位数的统计学差异。相关性(年龄与TRM和T新兴市场)使用Pearson相关检验进行评估。根据美国统计协会(ASA)最近的建议,特别是在分析志愿者数量相对较低的数据集时,我们还在适当的地方使用a指出了标记物或细胞因子反应的表达趋势P≤0.1 [3233].

数据和材料的可用性

支持本研究结果的数据集可在文章及其补充信息文件中获得。

缩写

PBMC:

外周血单个核细胞

LPMC:

固有层单个核细胞

TRM

组织常驻记忆T细胞

EBV-B:

eb病毒(EBV)转化淋巴母细胞B细胞

MF:

年代。伤寒特异性多功能细胞

史:

年代。伤寒特异性单一细胞因子产生细胞

TI:

回肠末端

T新兴市场

t效应子/记忆- (CD62L- CD45RA-)

T厘米

T-central/memory - (CD62L+ CD45RA-)

TEMRA

T新兴市场- cd45ra + - (cd62l - cd45ra +)

LP:

固有层

参考文献

  1. Aw D, Silva AB, Palmer DB。免疫衰老:老龄化人口面临的新挑战。免疫学。2007;120(4):435 - 46所示。https://doi.org/10.1111/j.1365-2567.2007.02555.x

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  2. 张志刚,张志刚,张志刚。人体T细胞免疫衰老与炎症反应的关系。中国生物医学工程杂志,2017;32(4):379 - 379。https://doi.org/10.1189/jlb.3RI0716-335R

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  3. 肖尔兹JL, Diaz A, Riley RL, Cancro MP, Frasca D.小鼠和人类衰老与B细胞功能的比较综述。中华免疫杂志,2013;25(4):504-10。https://doi.org/10.1016/j.coi.2013.07.006

    文章中科院PubMed谷歌学者

  4. 小鼠和人类T细胞室的衰老:从没有天真的期望到模糊的记忆。中华免疫杂志2014;193(6):2622-9。https://doi.org/10.4049/jimmunol.1401174

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  5. 冯志勇,王志强,王志强,王志强。流感对机体功能衰退的影响。中国老年医学杂志,2012;30(7):339 - 339。https://doi.org/10.1111/j.1532-5415.2012.04048.x

    文章PubMed公共医学中心谷歌学者

  6. Johnson RW, Bouhassira D, Kassianos G, Leplege A, Schmader KE, Weinke T.带状疱疹和疱疹后神经痛对生活质量的影响。医学杂志,2010;8(1):37。https://doi.org/10.1186/1741-7015-8-37

    文章PubMed公共医学中心谷歌学者

  7. Wroe PC, Finkelstein JA, Ray GT, Linder JA, Johnson KM, Rifas-Shiman S, Moore MR, Huang SS.美国人口老龄化与肺炎球菌性肺炎的未来负担。中华流行病学杂志,2012;29(4):529 - 529。https://doi.org/10.1093/infdis/jis240

    文章PubMed谷歌学者

  8. Wagner A, Garner-Spitzer E, Jasinska J, Kollaritsch H, Stiasny K, Kundi M, Wiedermann U.初次免疫接种后体液和细胞免疫反应的年龄相关差异:分层接种计划的适应症。科学通报2018;8(1):9825。https://doi.org/10.1038/s41598-018-28111-8

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  9. Tseng HF, Harpaz R, Luo Y, Hales CM, Sy LS, Tartof Sy, Bialek S, hecter RC, Jacobsen SJ。带状疱疹疫苗在>/=60岁成人中的有效性下降。中华流行病学杂志,2016;26(12):344 - 344。https://doi.org/10.1093/infdis/jiw047

    文章PubMed谷歌学者

  10. Edelman R, Deming ME, Toapanta FR, Heuser MD, Chrisley L, Barnes RS, Wasserman SS, Blackwelder WC, Handwerger BS, Pasetti M, Siddiqui KM, Sztein MB。SENIEUR方案和按年龄、性别和疫苗途径划分的健康老年人乙型肝炎疫苗接种的有效性。Immun老龄化。2020;17(1):9。https://doi.org/10.1186/s12979-020-00179-9

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  11. 陈文华,Kozlovsky BF, Effros RB, Grubeck-Loebenstein B, Edelman R, Sztein MB.老年人免疫接种的研究进展。免疫学杂志2009;30(7):351-9。https://doi.org/10.1016/j.it.2009.05.002

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  12. Yanes RE, Gustafson CE, Weyand CM, Goronzy JJ。淋巴细胞的生成和种群在整个生命中的稳态。中国血液病杂志,2017;54(1):33-8。https://doi.org/10.1053/j.seminhematol.2016.10.003

    文章PubMed谷歌学者

  13. Kim C, Fang F, Weyand CM, Goronzy JJ。接种疫苗后T细胞的生命周期——免疫老化在哪里发生?中国临床免疫学杂志,2017;18(1):731 - 731。https://doi.org/10.1111/cei.12829

    文章中科院PubMed谷歌学者

  14. sigrist CA, Aspinall R.极端年龄时b细胞对疫苗接种的反应。中华免疫杂志2009;9(3):185-94。https://doi.org/10.1038/nri2508

    文章中科院PubMed谷歌学者

  15. 王志强,王志强,王志强,等。对抗千变万化的敌人:免疫衰老、疫苗和健康衰老。中国机械工程学报,2018;4(1):1。https://doi.org/10.1038/s41514-017-0020-0

    文章中科院PubMed谷歌学者

  16. Quinn KM, Fox A, Harland KL, Russ BE, Li J, Nguyen THO, Loh L, Olshanksy M, Naeem H, Tsyganov K, Wiede F, Webster R, Blyth C, Sng XYX, Tiganis T, Powell D, Doherty PC, Turner SJ, Kedzierska K, la Gruta NL。原发CD8(+) T细胞反应的年龄相关下降与虚拟记忆CD8(+) T细胞衰老的发展有关。Cell Rep. 2018;23(12): 3512-24。https://doi.org/10.1016/j.celrep.2018.05.057

    文章中科院PubMed谷歌学者

  17. Thome JJ, Farber DL。组织常驻T细胞的新概念:来自人类的教训。免疫学杂志2015;36(7):428-35。https://doi.org/10.1016/j.it.2015.05.003

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  18. 缪勒SN,麦凯LK.组织驻留记忆T细胞:免疫防御的局部专家。免疫学杂志,2016;16(2):79-89。https://doi.org/10.1038/nri.2015.3

    文章中科院PubMed谷歌学者

  19. Kumar BV, Ma W, Miron M, Granot T, Guyer RS, Carpenter DJ, Senda T, Sun X, Ho SH, Lerner H, Friedman AL, Shen Y, Farber DL。人类组织常驻记忆T细胞是由淋巴和粘膜部位的核心转录和功能特征定义的。中国科学,2017;20(12):2921-34。https://doi.org/10.1016/j.celrep.2017.08.078

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  20. Sathaliyawala T, Kubota M, Yudanin N, Turner D, Camp P, Thome JJ,等。人类循环和组织驻留记忆T细胞亚群的分布和区隔。免疫力。2013;38(1):187 - 97。https://doi.org/10.1016/j.immuni.2012.09.020

    文章中科院PubMed谷歌学者

  21. Watanabe R, Gehad A, Yang C, Scott LL, Teague JE, Schlapbach C,等。人类皮肤由四个功能和表型上离散的常驻和循环记忆T细胞群保护。中国生物医学工程学报,2015;29(3):374 - 379。

    文章谷歌学者

  22. Hombrink P, Helbig C, Backer RA, Piet B, Oja AE, Stark R, Brasser G, Jongejan A, Jonkers RE, Nota B, Basak O, Clevers HC, Moerland PD, Amsen D, van Lier RAW。人类CD8(+)肺驻留记忆T细胞的持久性,警觉性和控制程序。中华免疫杂志,2016;17(12):1467-78。https://doi.org/10.1038/ni.3589

    文章中科院PubMed谷歌学者

  23. Levine MM, Ferreccio C, Abrego P, Martin OS, Ortiz E, Cryz S.伤寒沙门氏菌减毒口服活疫苗Ty21a的疗效持续时间。疫苗,1999;17(增刊2):S22-7。https://doi.org/10.1016/s0264 - 410 x (99) 00231 - 5

    文章PubMed谷歌学者

  24. 伤寒疫苗。在:Plotkin S, Orenstein WA, Offit PA, Edwards KM,编辑。《普洛金疫苗》第七版,费城:爱思唯尔;2018.1114 - 44页。https://doi.org/10.1016/B978-0-323-35761-6.00061-4

    谷歌学者

  25. Booth JS, Goldberg E, Patil SA, Barnes RS, Greenwald BD, Sztein MB.口服伤寒减毒活疫苗Ty21a对人体全身和终末回肠黏膜CD4+ T记忆反应的影响。国际免疫杂志,2018;31(2):101。https://doi.org/10.1093/intimm/dxy070

    文章中科院公共医学中心谷歌学者

  26. Booth JS, Patil SA, Goldberg E, Barnes RS, Greenwald BD, Sztein MB.减毒口服伤寒疫苗Ty21a在人回肠末端诱导固有层和上皮内淋巴细胞组织驻留效应记忆CD8 T反应。前沿免疫。2019;10:424。https://doi.org/10.3389/fimmu.2019.00424

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  27. Booth JS, Goldberg E, Patil SA, Greenwald BD, Sztein MB.口服伤寒活疫苗Ty21a诱导人回肠黏膜和外周血中伤寒特异性记忆CD4+和CD8+ T反应的相关性。Hum Vaccin Immunother. 2019; 15:1-12。

    文章谷歌学者

  28. Booth JS, Goldberg E, Barnes RS, Greenwald BD, Sztein MB.口服伤寒疫苗Ty21a在人回肠末端固有层和上皮隔室中诱导抗原特异性常驻记忆CD4(+) T细胞。中华医学杂志2020;18(1):102。https://doi.org/10.1186/s12967-020-02263-6

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  29. Nickerson KP, Senger S, Zhang Y, Lima R, Patel S, Ingano L, Flavahan WA, Kumar DKV, Fraser CM, Faherty CS, Sztein MB, Fiorentino M, Fasano A.伤寒沙门氏菌定植在人类肠道组织早期感染期间引发广泛的转录变化,旨在逃避宿主粘膜免疫防御。EBioMedicine。2018; 31:92 - 109。https://doi.org/10.1016/j.ebiom.2018.04.005

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  30. Kantele A, Hakkinen M, Moldoveanu Z, Lu A, savilahhti E, Alvarez RD,等。Ty21a伤寒沙门氏菌口服和直肠免疫诱导的免疫反应差异:人类常见粘膜免疫系统区隔化的证据。中华医学杂志,1998;32(12):561 - 566。https://doi.org/10.1128/IAI.66.12.5630-5635.1998

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  31. Vasson MP, Farges MC, Goncalves-Mendes N, Talvas J, Ribalta J, Winklhofer-Roob B, Rock E, Rossary A.衰老会影响免疫状态吗?来自法国的300名健康志愿者的比较分析。奥地利与西班牙Immun老龄化。2013;10(1):38。https://doi.org/10.1186/1742-4933-10-38

    文章中科院PubMed谷歌学者

  32. 林德豪J, Skog M, Ernerudh J, Bengner M, Lofgren S, Matussek A,等。66岁老年人CD4/CD8反向比值及相关参数:瑞典HEXA免疫研究年龄(Dordr)。35 2013;(3): 985 - 91。https://doi.org/10.1007/s11357-012-9400-3

    文章中科院谷歌学者

  33. 李敏,姚东,曾霞,Kasakovski D,张颖,陈松,查霞,李艳,徐玲。年龄与人T细胞亚群进化及衰老相关。《Immun老龄化》2019;16(1):24。https://doi.org/10.1186/s12979-019-0165-8

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  34. 林勇,金俊,梅特EJ,阮华,张涛,吕蒂格A,费鲁奇L,翁乃平。体内淋巴细胞数量随年龄的变化及其与细胞因子/细胞因子受体水平的关系Immun老龄化。2016;13(1):24。https://doi.org/10.1186/s12979-016-0079-7

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  35. Derhovanessian E, Larbi A, Pawelec G.人类免疫衰老的生物标志物:巨细胞病毒感染的影响。中华免疫杂志2009;21(4):440-5。https://doi.org/10.1016/j.coi.2009.05.012

    文章中科院PubMed谷歌学者

  36. Booth JS, Patil SA, Ghazi L, Barnes R, Fraser CM, Fasano A, Greenwald BD, Sztein MB.口服Ty21a伤寒疫苗诱导人体全身和终末回肠黏膜免疫。中国生物医学杂志,2017;4(3):419-37。https://doi.org/10.1016/j.jcmgh.2017.08.002

    文章PubMed公共医学中心谷歌学者

  37. Darrah PA, Patel DT, De Luca PM, Lindsay RW, Davey DF, Flynn BJ,等。多功能TH1细胞定义了疫苗介导的对主要利什曼原虫的保护的相关性。中华医学杂志2007;13(7):843-50。https://doi.org/10.1038/nm1592

    文章中科院PubMed谷歌学者

  38. Lindenstrom T, Agger EM, Korsholm KS, Darrah PA, Aagaard C, Seder RA,等。结核病亚单位疫苗接种可提供以多功能CD4记忆T细胞为特征的长期保护性免疫。中华免疫杂志2009;82(12):8047-55。https://doi.org/10.4049/jimmunol.0801592

    文章中科院PubMed谷歌学者

  39. Lin L, Finak G, Ushey K, Seshadri C, Hawn TR, Frahm N, Scriba TJ, Mahomed H, Hanekom W, Bart PA, Pantaleo G, Tomaras GD, Rerks-Ngarm S, Kaewkungwal J, Nitayaphan S, Pitisuttithum P, Michael NL, Kim JH, Robb ML, O'Connell RJ, Karasavvas N, Gilbert P, C de Rosa S, McElrath MJ, Gottardo R. COMPASS识别与临床结果相关的t细胞亚群。中国生物工程学报。2015;33(6):610-6。https://doi.org/10.1038/nbt.3187

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  40. Fresnay S, McArthur MA, Magder L, Darton TC, Jones C, Waddington CS,等。伤寒特异性多功能CD8+ T细胞在人类预防伤寒中起着主要作用。中华医学杂志,2016;14(1):62。https://doi.org/10.1186/s12967-016-0819-7

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  41. Fresnay S, McArthur MA, Magder LS, Darton TC, Jones C, Waddington CS,等。伤寒沙门氏菌反应性CD8+ T细胞免疫在人伤寒挑战模型中的重要性前沿免疫,2017;8:208。

    文章谷歌学者

  42. Burel JG, Apte SH, Groves PL, McCarthy JS, Doolan DL。多功能和ifn - γ单功能人类CD4(+) T细胞群在分子上是不同的。中国机械工程学报。2017;2(3):e87499。https://doi.org/10.1172/jci.insight.87499

    文章PubMed公共医学中心谷歌学者

  43. Oja AE, Piet B, Helbig C, Stark R, van der Zwan D, Blaauwgeers H, Remmerswaal EBM, Amsen D, Jonkers RE, Moerland PD, Nolte MA, van Lier RAW, Hombrink P. Trigger-happy常驻记忆CD4(+) T细胞存在于人类肺部。黏膜免疫杂志,2018;11(3):654-67。https://doi.org/10.1038/mi.2017.94

    文章中科院PubMed谷歌学者

  44. Park CO, Fu X, Jiang X, Pan Y, Teague JE, Collins N, Tian T, O'Malley JT, Emerson RO, Kim JH, Jung Y, Watanabe R, Fuhlbrigge RC, Carbone FR, Gebhardt T, Clark RA, Lin CP, Kupper TS.皮肤感染后白色念珠菌长寿命T细胞受体α - TH17驻留记忆T细胞种群的分期发展。中华过敏临床免疫杂志,2018;42(2):647-62。https://doi.org/10.1016/j.jaci.2017.09.042

    文章中科院PubMed谷歌学者

  45. Goronzy JJ, Weyand CM。成功的和不适应的T细胞老化。免疫力。2017;46(3):364 - 78。https://doi.org/10.1016/j.immuni.2017.03.010

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  46. Haynes L, Eaton SM, Burns EM, Randall TD, Swain SL.由年轻幼稚细胞产生的CD4 T细胞记忆在老年时功能良好,但由衰老幼稚细胞产生的记忆功能较差。中国科学(d辑:自然科学),2003;26(2):344 - 344。https://doi.org/10.1073/pnas.2433717100

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  47. 陈志伟,陈志伟。衰老对T细胞功能的影响。中华免疫杂志2009;21(4):414-7。https://doi.org/10.1016/j.coi.2009.05.009

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  48. 蔡泽,李国强,李国强。CD8 T细胞和衰老。中华免疫杂志2003;23(1-2):45-64。https://doi.org/10.1615/CritRevImmunol.v23.i12.30

    文章中科院PubMed谷歌学者

  49. 科赫S, Solana R, Dela Rosa O, Pawelec G.人巨细胞病毒感染与T细胞免疫衰老:一个小综述。机械老化发展。2006;127(6):538-43。https://doi.org/10.1016/j.mad.2006.01.011

    文章中科院PubMed谷歌学者

  50. 涂伟。T细胞免疫衰老的机制:衰老与巨细胞病毒感染。前沿微生物,2016;7:2111。

    文章谷歌学者

  51. 穆鲁加南达,王晓明,王晓明,等。常驻记忆T细胞在传染性疾病中的作用及其与疫苗开发的关系。前沿免疫。2018;9:1574。https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.01574

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  52. 沈辉。组织驻留记忆T细胞。中国生物医学工程学报,2013;https://doi.org/10.1111/imr.12087

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  53. 申克尔,马斯普斯特。组织驻留记忆T细胞。免疫力。2014;41(6):886 - 97。https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.12.007

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  54. Douek DC, McFarland RD, Keiser PH, Gage EA, Massey JM, Haynes BF,等。胸腺功能随年龄和HIV感染治疗期间的变化。大自然。1998;396(6712):690 - 5。https://doi.org/10.1038/25374

    文章中科院PubMed谷歌学者

  55. Dock J, Ramirez CM, Hultin L, Hausner MA, Hultin P, Elliott J, Yang OO, Anton PA, Jamieson BD, Effros RB。血液中CD8+ T细胞与胃肠道粘膜区室的不同老化特征PLoS One. 2017;12(8):e0182498。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0182498

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  56. sanoni P, Vescovini R, Fagnoni F, Biasini C, Zanni F, Zanlari L, Telera A, Lucchini G, Passeri G, Monti D, Franceschi C, Passeri M.长寿中的免疫系统。研究进展。2008;43(2):61-5。https://doi.org/10.1016/j.exger.2007.06.008

    文章中科院PubMed谷歌学者

  57. van den Berg SPH, Wong A, Hendriks M, Jacobi RHJ, van Baarle D, van Beek J.年龄对健康成人对一种新型流感疫苗株抗体应答的负面影响,而不是潜在巨细胞病毒感染。前沿免疫。2018;9:82。https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.00082

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  58. Roukens AH, Soonawala D, Joosten SA, de Visser AW, Jiang X, Dirksen K, de Gruijter M, van Dissel JT, Bredenbeek PJ, Visser LG。老年受试者在接种黄热病疫苗后抗体反应延迟和病毒血症延长:一项前瞻性对照队列研究公共科学学报。2011;6(12):e27753。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0027753

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  59. Djennad A, Ramsay ME, Pebody R, Fry NK, Sheppard C, Ladhani SN, Andrews NJ。2000年至2017年英格兰和威尔士65岁及以上人群中23价多糖肺炎球菌疫苗的有效性和侵袭性肺炎球菌病发病率的变化EClinicalMedicine。2018; 6:42-50。https://doi.org/10.1016/j.eclinm.2018.12.007

    文章PubMed谷歌学者

  60. 蔡丽梅,李志强,李志强,等。自然获得性T细胞对恶性疟原虫裂殖子表面蛋白记忆的年龄相关差异公共科学学报,2011;6(9):e24852。https://doi.org/10.1371/journal.pone.0024852

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  61. 舒尔茨AR,马尔泽JN,多明戈C,朱肖特K,格鲁茨考A,巴别尔N,等。低胸腺活性和树突状细胞数量与老年人对原发性病毒感染的免疫反应有关。中华免疫杂志,2015;19(10):499 - 711。https://doi.org/10.4049/jimmunol.1500598

    文章中科院PubMed谷歌学者

  62. McElhaney JE, Xie D, Hager WD, Barry MB, Wang Y, Kleppinger A,等。在老年人中,T细胞反应与疫苗保护有更好的相关性。中华免疫杂志,2006;26(10):639 - 639。https://doi.org/10.4049/jimmunol.176.10.6333

    文章中科院PubMed谷歌学者

  63. Senda T, Dogra P, Granot T, Furuhashi K, Snyder ME, Carpenter DJ, Szabo PA, Thapa P, Miron M, Farber DL。人体肠道t细胞免疫的显微解剖解剖揭示了肠道相关淋巴组织在一生中发生的位点特异性变化。黏膜免疫杂志,2019;12(2):378-89。https://doi.org/10.1038/s41385-018-0110-8

    文章中科院PubMed谷歌学者

  64. Nguyen TH, McAuley JL, Kim Y, Zheng MZ, Gherardin NA, Godfrey DI, Purcell DF, Sullivan LC, Westall GP, Reading PC, Kedzierska K, Wakim LM。流感(而非SARS-CoV-2)感染会诱导快速的干扰素反应,这种反应随着年龄的增长和组织驻留记忆CD8(+) T细胞的减少而减弱。中国医学免疫学杂志。2021;10(1):e1242。https://doi.org/10.1002/cti2.1242

    文章中科院PubMed公共医学中心谷歌学者

  65. 吴世杰,李克杰,申欧思。衰老与免疫系统:免疫衰老对病毒感染的影响。免疫疫苗免疫原性免疫杂志2019;19(6):e37。https://doi.org/10.4110/in.2019.19.e37

    文章PubMed谷歌学者

  66. Ciabattini A, Nardini C, Santoro F, Garagnani P, Franceschi C, Medaglini D.老年人接种疫苗:随着年龄增长免疫变化的挑战。中华免疫杂志2018;40:83-94。https://doi.org/10.1016/j.smim.2018.10.010

    文章PubMed谷歌学者

  67. Jackson SE, Sedikides GX, Okecha G, Poole EL, Sinclair JH, Wills MR.潜在巨细胞病毒(CMV)感染不会有害地改变健康老年人的T细胞反应,但潜在巨细胞病毒携带的增加与CMV特异性T细胞的扩增有关。前沿免疫,2017;8:733。

    文章谷歌学者

  68. Staras SA, Dollard SC, Radford KW, Flanders WD, Pass RF, Cannon MJ。1988-1994年美国巨细胞病毒感染的血清流行率。临床感染杂志,2006;43(9):1143-51。https://doi.org/10.1086/508173

    文章PubMed谷歌学者

  69. Pawelec G, McElhaney JE, Aiello AE, Derhovanessian E.巨细胞病毒感染对老年人生存的影响。中华免疫杂志,2012;24(4):507-11。https://doi.org/10.1016/j.coi.2012.04.002

    文章中科院PubMed谷歌学者

  70. Wikby A, Johansson B, Olsson J, Lofgren S, Nilsson BO, Ferguson F.老年人外周血CD8 t淋巴细胞亚群扩张与巨细胞病毒血清阳性的关系:瑞典NONA免疫研究研究进展。2002;37(2):445-53。https://doi.org/10.1016/s0531 - 5565 (01) 00212 - 1

    文章中科院PubMed谷歌学者

  71. Derhovanessian E, Maier AB, Hahnel K, McElhaney JE, Slagboom EP, Pawelec G.巨细胞病毒潜伏感染与老年人对流感a核心蛋白记忆CD4反应不良有关。中华免疫杂志2014;193(7):3624-31。https://doi.org/10.4049/jimmunol.1303361

    文章中科院PubMed谷歌学者

  72. Ferreccio C, Levine MM, Rodriguez H, Contreras R.两剂、三剂或四剂TY21a口服伤寒活疫苗肠溶胶囊的比较疗效:流行地区的现场试验中华流行病学杂志,2001;26(4):349 - 349。https://doi.org/10.1093/infdis/159.4.766

    文章中科院PubMed谷歌学者

  73. 黄志刚,李志刚,李志刚。伤寒沙门菌减毒疫苗对人免疫后细胞毒性T淋巴细胞的影响。中华免疫杂志,1995;15(8):389 - 397。

    中科院PubMed谷歌学者

  74. 张志强,张志强,张志强,等。儿童、成人和老年人胃组织常驻记忆T细胞的特征和功能特性。《免疫前沿》2014;5:294。

    文章谷歌学者

  75. 布思j, salernogoncalves R, Blanchard TG, Patil SA, Kader HA, Safta AM,等。人胃粘膜和血液中的黏膜相关不变T细胞:在幽门螺杆菌感染中的作用。前沿免疫。2015;6:466。

    文章谷歌学者

  76. Eiras P, Roldan E, Camarero C, Olivares F, Bootello A, Roy G.人十二指肠活检中新型CD3−/CD7+上皮内淋巴细胞亚群的流式细胞术描述:腹腔疾病的潜在诊断价值。血细胞计数。1998;34(2):95 - 102。https://doi.org/10.1002/ (SICI) 1097 - 0320 (19980415) 34:2 < 95:: AID-CYTO6 > 3.0.CO; 2 b

    文章中科院PubMed谷歌学者

  77. Salerno-Goncalves R, cristina - vina M, Lewinsohn DM, Sztein MB.人hla - e限制性CD8+ T细胞亚群在接种肠道沙门氏菌血清型伤寒Ty21a伤寒疫苗的志愿者中的鉴定。中华免疫杂志2004;173(9):5852-62。https://doi.org/10.4049/jimmunol.173.9.5852

    文章中科院PubMed谷歌学者

下载参考

致谢

我们非常感谢志愿者们允许我们进行这项研究。我们感谢疫苗开发中心招募科的工作人员帮助收集TI活组织检查和血液标本;Jeffery Floyd先生对PBMC的分离,Regina Harley女士和Catherine Storrer女士对流式细胞仪测定性能的出色技术支持。

资金

这项工作由NIAID, NIH, DHHS拨款R01-AI036525, U19- ai082655(人类免疫学合作中心[CCHI]), U19- ai109776(卓越转化研究中心[CETR]和U19 AI142725资助。内容仅为作者的责任,并不代表美国国立过敏和传染病研究所或美国国立卫生研究院的官方观点。

作者信息

作者及隶属关系

作者

贡献

JSB进行实验,参与研究设计、数据采集、分析和文稿起草;SAP进行了内窥镜检查,获得了回肠末端活检,并审查了手稿;RB参与了患者招募、PBMC和末端回肠活检的收集并审阅了手稿;EG进行内窥镜检查,获得回肠末端活检并审阅手稿;BDG,进行内窥镜检查,获得回肠末端活检,并审阅手稿;MBS设计了这项研究,监督了这项工作并起草了手稿。作者阅读并批准最终的手稿。

相应的作者

对应到Jayaum S. Booth马塞洛·b·斯坦

道德声明

伦理批准并同意参与

受试者获得书面知情同意,所有程序均经马里兰大学巴尔的摩机构审查委员会(IRB)批准,并在ClinicalTrials.gov(标识符NCT03970304)。该研究是根据国际协调会议良好临床实践指南的原则进行的。

发表同意书

不适用。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

额外的信息

出版商的注意

伟德体育在线施普林格自然对出版的地图和机构从属关系中的管辖权主张保持中立。

补充信息

附加文件1:图S1。

从回肠末端活检中获得的T细胞的门控策略和年龄依赖性频率。(一个)定义回肠终端LPMC中CD4+和CD8+ T记忆子集和组织驻留子集的门控策略。(B)测量TI-LPMC CD3、CD4和CD8的频率,并比较成人(< 60岁;A)老年人(≥60岁);E)接种ty21a疫苗的志愿者(红柱)和未接种ty21a疫苗的志愿者(黑柱)。显着差异(*P< 0.05)。显示重要性的趋势由它们表示p价值。水平的黑条表示中值。

附加文件2:图S2。

系统和黏膜CD4+和CD8+ T的频率新兴市场Ty21a免疫后,在成人和老年志愿者中表达CD69或CD103。测定表达CD69或CD103的细胞百分比(一)LPMC cd4 + t新兴市场,(B)LPMC cd8 + t新兴市场接种Ty21a疫苗后。显着差异(*P< 0.05;**P< 0.005)。显示重要性的趋势由它们表示p值。水平的黑条表示中值。

12979 _2021_227_moesm3_esm.tif

附加文件3。

12979 _2021_227_moesm4_esm.tif

附加文件4。

12979 _2021_227_moesm5_esm.tif

附加文件5。

权利和权限

开放获取本文遵循知识共享署名4.0国际许可协议,允许以任何媒介或格式使用、分享、改编、分发和复制,只要您对原作者和来源给予适当的署名,提供知识共享许可协议的链接,并注明是否有更改。本文中的图像或其他第三方材料包含在文章的创作共用许可协议中,除非在材料的信用额度中另有说明。如果材料未包含在文章的创作共用许可协议中,并且您的预期使用不被法定法规所允许或超出了允许的使用范围,您将需要直接获得版权所有者的许可。如欲查看本牌照的副本,请浏览http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.创作共用公共领域奉献弃权书(http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/)适用于本条所提供的资料,除非在资料的信用额度中另有说明。

转载及权限

关于本文

通过CrossMark验证货币和真实性

引用本文

布斯,j。s。戈德堡,Eet al。回肠末端组织常驻记忆T细胞反应谱的年龄依赖性年代.口服Ty21a免疫后的伤寒。Immun老化18, 19(2021)。https://doi.org/10.1186/s12979-021-00227-y

下载引用

  • 收到了

  • 接受

  • 发表

  • DOIhttps://doi.org/10.1186/s12979-021-00227-y

关键字

  • 老化
  • 诱发的反应
  • 组织常驻记忆T细胞
  • 回肠末端LPMC
  • Ty21a
  • 口服疫苗
Baidu
map