使用绿色生物合成山奈酚包被银纳米颗粒抑制癌细胞生长:一项使用肝细胞癌(HepG2)的体外研究gydF4y2Ba

由于各种形式的癌症，人类生命的不断丧失，需要开发一种更有效/更光荣的治疗方法。此外，发现一种新的绿色合成抗癌疗法是至关重要的，因为它引起了对常用药物的耐药性。将纳米颗粒的纳米尺寸优势与植物性物质的生物安全性相结合，可以在毒性最小的情况下增强抗癌效果。在目前的研究中，我们的目标是用山奈酚(黄酮)作为银纳米颗粒(AgNPs)的涂层进行绿色合成，并研究它们在肝细胞癌(HepG2)细胞系中的抗癌活性。首先，利用傅里叶红外(FTIR)、x射线衍射(XRD)、zetasizer和透射电镜(TEM)对山奈酚包被AgNPs的性质进行了明确的表征。结果表明，它们的粒径为200 nm，呈球形，聚集较少，具有稳定性高的特点。然后，通过MTT法(dimethylthiazolyltetrazolium bromide, MTT)和乳酸脱氢酶(LDH)泄漏释放率，评估AgNPs的1/3和1/2 LC50和阿霉素(DOX，抗癌药物)对HepG2细胞的细胞毒作用。同时分析活性氧(ROS)和凋亡标志物，记录HepG2细胞的迁移和侵袭情况。我们的研究结果表明，山奈酚包被的AgNPs可以诱导细胞毒作用，并以浓度依赖的方式降低HepG2细胞的活力。山奈酚包被AgNPs处理的细胞LDH渗漏%显著增加，证实了其细胞毒作用。 ROS generation and lipid peroxidation could significantly increase in HepG2 cells treated with kaempferol-coated AgNPs along with the exhaustion of antioxidant Glutathione (GSH) marker revealing the induced oxidative damage. Oxidative damage-mediated apoptosis was confirmed by the elevated levels of the pro-apoptotic markers (Bax, Cyt-c, P53, and caspase-3) and the reduced level of anti-apoptotic marker (Bcl-2) using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Furthermore, kaempferol-coated AgNPs could suppress the migrating and invading ability of HepG2 cells showing their antimetastatic effect. To end up, kaempferol-coated AgNPs can induce a potential anti-cancer effect in HepG2 cells via oxidative stress-mediated apoptosis.

纳米颗粒由于其独特的与纳米尺寸相关的化学和物理性质而广泛应用于生物医学领域(Menon et al.)。gydF4y2Ba2017gydF4y2Ba；默里等人。gydF4y2Ba2000gydF4y2Ba；奥斯曼等人。gydF4y2Ba2021 bgydF4y2Ba)。许多不同的金属纳米颗粒被用于药物输送，荧光生物标签，以及病原体和蛋白质的检测(Menon和ShanmugamgydF4y2Ba2020gydF4y2Ba；Wang等。gydF4y2Ba2002gydF4y2Ba)。银纳米颗粒(AgNPs)具有多种生物活性，如抗炎、抗菌和抗真菌作用(Fehaid et al.)。gydF4y2Ba2020gydF4y2Ba)。因此，生物基物质应该包裹纳米颗粒，使其生物相容性，如胶原蛋白(Sinani et al。gydF4y2Ba2003gydF4y2Ba)和芹菜素，以改善细胞-纳米颗粒的相互作用(al - otaibi等。gydF4y2Ba2022gydF4y2Ba)。暴露于AgNPs会引起与DNA损伤、细胞凋亡和坏死相关的氧化应激。因此，AgNPs已被证明在多种癌细胞系中引起细胞毒性，包括前列腺癌细胞(Firdhouse和LalithagydF4y2Ba2013gydF4y2Ba)，人Chang肝细胞和大鼠嗜碱性粒细胞白血病(RBL)细胞(Piao et al。gydF4y2Ba2011gydF4y2Ba)、肺癌A549细胞(Gurunathan et al.;gydF4y2Ba2015gydF4y2Ba)、MCF-7和HCT-116细胞(Khan et al。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba)。AgNPs也被证明对癌细胞比非癌细胞更有害(Faedmaleki et al.)。gydF4y2Ba2014gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

癌症是全球死亡的主要原因，肝癌是最常见的癌症类型之一，据世界卫生组织(世卫组织)报告，2020年，肝癌导致83万人死亡(Adegbola和Ajayi)gydF4y2Ba2008gydF4y2Ba)。肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝脏恶性肿瘤，可导致肝硬化和高死亡率(Balogh等。gydF4y2Ba2016gydF4y2Ba)。因此，寻找利用纳米技术治疗肝癌的新策略是至关重要的，特别是植物基纳米材料治疗。gydF4y2Ba

类黄酮广泛分布在许多植物中，据报道通过启动氧化应激抑制肿瘤生长(De Stefani et al.)。gydF4y2Ba1999gydF4y2Ba)。山奈酚(3,5,7,4 '四羟基黄酮)是一种存在于不同蔬菜中的类黄酮，如西兰花和洋葱(al - brakati et al。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba；Tatsimo等人。gydF4y2Ba2012gydF4y2Ba)。据报道，由于其抗氧化、抗炎和抗肿瘤的作用，它可以治疗许多疾病(Kim等。gydF4y2Ba2016gydF4y2Ba；Tang等。gydF4y2Ba2015gydF4y2Ba)。此外，山奈酚被用于成功合成金纳米颗粒，并可通过血管生成机制在乳腺癌细胞中产生抗癌活性(Raghavan等。gydF4y2Ba2015gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

由于AgNPs(纳米基)和山奈酚(生物基)各自的生物学活性不同，本研究假设使用山奈酚生物合成的AgNPs可能表现出纳米和生物基体系对癌细胞生长的协同作用。因此，电流gydF4y2Ba体外gydF4y2Ba这项研究旨在研究山奈酚包被AgNPs在肝细胞癌细胞系(HepG2)中的潜在抗癌作用。gydF4y2Ba

化学品和试剂gydF4y2Ba

山奈酚、硝酸银、二甲基亚砜(DMSO)、二甲基噻唑酰四唑溴化铵(MTT)和2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)从Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)获得。RPMI-1640培养基来自Gibco Life Technologies。热灭活胎牛血清(HFBS)采购自Invitrogen公司(Waltham, MA, USA)。乳酸脱氢酶(LDH) CytoTox非放射性细胞毒性检测试剂盒由Promega (Madison, Wisconsin, USA)提供。b细胞淋巴瘤2 (Bcl-2)、Bcl-2样蛋白4 (Bax)、细胞色素c (Cyt-c)、抑癌蛋白(P53)、Caspase-3 (Cas-3)和膜联蛋白V-FITC的ELISA试剂盒来自Abcam (Cambridge, UK)。Dulbecco的改良eagle 's medium (DMEM)稀释Matrigel购自BD生物科学公司(美国)。所有其他使用的化学品都是来自不同商业来源的最高纯度等级。毫q水被用作银的溶剂。用DMSO制备浓度为1 mg/mL的山奈酚原液，保存于-20℃备用。gydF4y2Ba

细胞培养gydF4y2Ba

从ATCC中获得肝细胞癌细胞株(HepG2)。HepG2细胞在37℃、5% CO2培养箱中培养于添加1% (v/v)青霉素-链霉素和10% (v/v) HFBS的rmi -1640培养基中。当细胞融合度达到80%时，用胰蛋白酶化方法分离传代细胞。HepG2细胞以每孔15000个细胞的密度在96孔板中进行处理。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs合成gydF4y2Ba

总体积为10毫升山奈酚(原液)和90毫升0.1 M AgNOgydF4y2Ba_3.gydF4y2Ba溶液在室温下孵育24 h，使溶液变成深棕色的AgNPs。然后在90°C下加热搅拌15 min，然后在室温下以9000 rpm离心。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs的表征gydF4y2Ba

采用傅里叶红外(FTIR)和紫外-可见光谱分析检测山奈酚包被AgNPs的光密度。利用x射线衍射(XRD)研究了AgNPs的晶体结构。Zetasizer (Nano系列，ZEN 3600, Malvern，英国)用于确定平均尺寸。此外，利用透射电镜(TEM)对其形态和聚集进行了观察。gydF4y2Ba

细胞活力/细胞毒性测定gydF4y2Ba

采用MTT比色法检测山奈酚包被AgNPs的细胞毒性。简单地说，HepG2细胞在96孔板中接种不同浓度的山奈酚包被AgNPs和阿霉素(DOX)后，在37°C的潮湿培养箱中培养24小时。然后用1×磷酸盐缓冲盐水(PBS)洗涤细胞，用20 μl MTT (5 mg/ml)在37℃下处理30分钟。用200 μl DMSO溶解形成的甲醛晶体，再在37℃下孵育30分钟。用微板仪在570 nm处记录颜色强度的差异(Othman et al.)。gydF4y2Ba2021年,一个gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

采用LDH渗漏法评估山奈酚包被AgNPs的细胞毒作用。为此，根据制造商的说明使用比色法。通过将四唑盐转化为红甲醛，用酶法测定上清液中细胞裂解释放的乳酸脱氢酶。形成颜色的强度与溶解细胞的数量成正比。用酶标仪在490 nm处记录颜色强度(吸光度)的差异。此外，计算并记录与对照细胞相关的相对LDH渗漏(%)(Braydich-Stolle et al.)。gydF4y2Ba2005gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

凋亡标志物的测定gydF4y2Ba

ELISA试剂盒检测凋亡生物标志物蛋白水平。促凋亡标志物包括Bax、Cyt-c、P53和Cas-3以及抗凋亡标志物Bcl-2。如下，2 × 10gydF4y2Ba^6gydF4y2BaHepG2细胞分别用山奈酚包被或AgNPs(浓度为1/2 LC50和1/3 LC50)处理。以LC50浓度为11.02 μm/ml的DOX为阳性对照，以载体细胞为阴性。培养24 h后，1800×离心收集细胞gydF4y2BaggydF4y2Ba5分钟，去除介质，用PBS冲洗两次。然后在50 μ l冷裂解缓冲液中移液裂解微球。接下来，细胞裂解液在12,000×g下离心1分钟，4°C，收集上清。用Bradford方法分析每个裂解液中凋亡标记物的蛋白水平。如果蛋白质水平超过4 g/l，则使用细胞提取缓冲液PTR稀释裂解物。最后，样品的结果颜色在405 nm的微孔板阅读器(Biotech, Inc.， USA)中记录。gydF4y2Ba

迁移和入侵试验gydF4y2Ba

使用Corning Transwell 8.0 μm孔膜(Corning, USA)评价细胞迁移和侵袭。简单地说，1 × 10gydF4y2Ba^5gydF4y2BaHepG2细胞被播种到每个transwell的上腔。在HepG2细胞播种前，用100 μL 1:8 dmem稀释的Matrigel包被transwell上腔进行侵袭评价。transwell的下腔含有新鲜培养基作为化学引诱剂，有无山奈酚包被AgNPs或DOX。培养48 h后，用棉签去除留在膜上表面的细胞，4%多聚甲醛固定或侵入膜下表面的细胞，用0.1%结晶紫溶液染色。使用光学显微镜在放大200倍的情况下，对HepG2细胞通过滤膜的迁移和侵袭进行拍照和计数。gydF4y2Ba

流式细胞术gydF4y2Ba

HepG2细胞2 × 10gydF4y2Ba^5gydF4y2Ba细胞/ml浓度在T中培养gydF4y2Ba_25gydF4y2Ba细胞培养瓶，用山奈酚包被AgNPs或DOX处理。24小时后，收集细胞并在结合缓冲液中重悬。然后，annexin V-FITC (Cat。加入号:ab14085)， 30°C黑暗孵育10分钟。流式细胞术分析细胞周期分布。gydF4y2Ba

氧化应激测定gydF4y2Ba

HepG2细胞2 × 10gydF4y2Ba^5gydF4y2Ba细胞/ml浓度在T25细胞培养瓶中培养，并用山奈酚包被AgNPs或DOX处理。24小时后，收集细胞并在裂解缓冲液中裂解。裂解物在12000 ×离心下旋转gydF4y2BaggydF4y2Ba4℃1 min，收集上清液。Bradford方法用于确定每个细胞裂解液中的蛋白质水平。绿色荧光菌株DCFH-DA用于检测细胞裂解液中的ROS水平，此前的报告(Othman et al。gydF4y2Ba2021年,一个gydF4y2Ba)。此外，使用Ohkawa等人的比色法分析脂质过氧化(LPO) (gydF4y2Ba1979gydF4y2Ba)。此外，谷胱甘肽(GSH)蛋白水平作为抗氧化标志物的测定遵循Ellman (gydF4y2Ba1959gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

统计分析gydF4y2Ba

所有数据均以均数±标准差(S.D.)表示。采用单因素方差分析(One-way ANOVA)和事后Tukey检验(post - hoc Tukey's test)比较各组间结果。采用统计程序Graph Pad Prism 9.3.1进行分析。考虑显著性差异，如果gydF4y2BaPgydF4y2Ba值< 0.05。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs的表征gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs的平均尺寸为200 nm，平均zeta电位为-20.2 mV，如图所示。gydF4y2Ba1gydF4y2BaA, B.纳米颗粒的FTIR分析如图所示。gydF4y2Ba1gydF4y2BaC, O-H基团在3338.31 cm处有一个宽峰gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．C-H拉伸炔在2115.50 cm处有吸收峰gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．C-O不对称拉伸碳化合物在1635.00 cm处有一条条带gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．胺类的C-N拉伸表现在1345.98 cm的吸收峰gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．C-O-C不对称拉伸碳化合物和C-X烷基卤化物也表达在442.96、431.39和490.76 cm的条带上gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}．这些数据表明山奈酚包被的AgNPs含有许多官能团，这些官能团增强了它们的稳定性。gydF4y2Ba

XRD结果如图;gydF4y2Ba1gydF4y2BaD显示了宽的模式，没有细峰，表明山奈酚包被AgNPs的无定形结构。TEM观测结果如图所示。gydF4y2Ba1gydF4y2BaE表明山奈酚包被的AgNPs几乎呈球形，聚集较少，颗粒直径小于200 nm。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞的细胞毒作用gydF4y2Ba

MTT细胞毒性试验结果如图所示。gydF4y2Ba2gydF4y2BaA，表明山奈酚包被AgNPs以浓度依赖的方式抑制肝癌HepG2细胞的生长。在10 μm/ml浓度下，HepG2细胞活力小于5%，IC50为2.24 μm/ml。另一方面，DOX对HepG2的IC50为11.02 μm/ml。这些数据表明，与DOX药物相比，低浓度山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞具有有效的细胞毒作用。gydF4y2Ba

还研究了LDH渗漏，以评估山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞的细胞毒作用增强的细胞膜渗漏。LDH泄漏率如图所示。gydF4y2Ba2gydF4y2BaB，显示LDH渗漏量呈浓度依赖性增加，显著高于对照细胞。dox诱导的LDH泄漏百分比与山奈酚包被agnps诱导的LDH泄漏无显著差异。LDH泄漏百分比数据与MTT试验结果一致，证实山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞具有细胞毒作用。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞凋亡的影响gydF4y2Ba

如图所示。gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba与对照组和dox处理的HepG2细胞相比，山奈酚包被agnps处理的HepG2细胞早期和晚期凋亡细胞百分比显著增加，显示出纳米颗粒的凋亡效应。gydF4y2Ba

此外，与对照细胞相比，AgNPs-和dox处理的细胞中促凋亡标志物(Bax、Cyt-c、P53和caspase-3)的蛋白水平均显著升高，如图所示。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba．而抗凋亡标记物Bcl-2蛋白水平在AgNPs和DOX的作用下较对照细胞显著降低，如图所示。gydF4y2Ba4gydF4y2Ba．山奈酚包被AgNPs的浓度依赖性效应在数据中也很明显。凋亡标记结果显示山奈酚包被agnps诱导HepG2细胞凋亡。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞迁移和侵袭的影响gydF4y2Ba

HepG2细胞在康宁transwell中迁移和侵袭实验的观察结果如图所示。gydF4y2Ba5gydF4y2Ba．结果表明山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞的迁移和侵袭有一定的抑制作用。此外，DOX效应也得到了同样的结果——这些数据证明了山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞迁移和侵袭能力的抑制作用。gydF4y2Ba

山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞的氧化应激作用gydF4y2Ba

为了研究山奈酚包被AgNPs的凋亡效应是否由诱导氧化应激驱动，我们评估了DCF和脂质过氧化(LPO)表达的ROS生成，如图所示。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba．结果表明，与对照细胞相比，山奈酚处理的AgNPs和DOX均显著提高了DCF和LPO。另一方面，与对照细胞相比，山奈酚处理过的AgNPs和DOX处理过的细胞抗氧化标志物(GSH)蛋白水平显著降低，如图所示。gydF4y2Ba6gydF4y2Ba．1/2IC的效果无显著差异gydF4y2Ba_50gydF4y2BaAgNPs和DOX在LPO和GSH水平上的表达。这些数据表明山奈酚包被的AgNPs可以通过诱导氧化应激诱导HepG2细胞凋亡。gydF4y2Ba

癌症是世界范围内导致死亡最多的疾病之一，由于对常用化疗药物的诱导耐药，这一问题的存在仍然具有挑战性(Geretto et al。gydF4y2Ba2017gydF4y2Ba)。因此，建议使用新药物来改善对细胞反应的药理作用，以避免化疗耐药(Vasan et al。gydF4y2Ba2019gydF4y2Ba)。阿霉素(DOX)是一种广泛使用的化疗，用于对抗不同类型的癌症，如癌症和肉瘤(Carvalho等。gydF4y2Ba2009gydF4y2Ba)。DOX可通过插入DNA并干扰DNA修复过程，通过多种途径诱导癌细胞死亡;此外，还可诱导氧化应激和细胞膜损伤，最终导致程序性细胞死亡(凋亡)。然而，使用DOX的缺点是它的毒性会损害正常组织，如心脏、肝脏和肾脏，限制了药物的使用剂量(Ansari等。gydF4y2Ba2017gydF4y2Ba；Carvalho等人。gydF4y2Ba2009gydF4y2Ba)。因此，在本研究中，我们针对植物基药物的合成，以获得预期的抗癌效果，并将不良反应降到最低。此外，由于有报道AgNPs和山奈酚分别可诱导氧化应激和癌细胞死亡，我们假设以山奈酚为包覆剂的AgNPs生物合成将表现出协同抗癌效率。gydF4y2Ba

为了验证当前假设的有效性，我们首先探索了山奈酚包被AgNPs的细胞毒性作用，并将其与HepG2细胞中的DOX效应进行了比较。我们的研究结果表明，山奈酚包被AgNPs的IC50为2.24 μm/ml, DOX的IC50为11.02 μm/ml，在毒理学和药理学上，较低的IC50被认为是一种更有效的药物，安全性更高(Meyer et al.;gydF4y2Ba2019gydF4y2Ba)。因此，山奈酚包被AgNPs的使用浓度将比DOX使用的浓度低且更安全，以获得有效的效果。山奈酚包被AgNPs目前的细胞毒作用与先前报道的基于海藻的AgNPs和基于核桃的AgNPs在肺癌和乳腺癌系中的细胞毒作用一致(Khorrami等。gydF4y2Ba2018gydF4y2Ba；Zhang等。gydF4y2Ba2020gydF4y2Ba)。此外，在之前的研究中，使用植物化学物质作为还原剂和封盖剂的AgNPs绿色合成与提高抗癌功效有关(Khan等。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba；奥斯曼等人。gydF4y2Ba2022gydF4y2Ba；Wypij等人。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba)。本研究中生物合成AgNPs的细胞毒性作用是通过评估损伤细胞的LDH渗漏率来证实的，LDH渗漏率通常被用作影响细胞膜完整性的细胞毒性指标(Han et al。gydF4y2Ba2011gydF4y2Ba)。我们的数据证实了山奈酚包被AgNPs的浓度依赖效应，这与DOX对HepG2细胞中LDH泄漏百分比的影响具有相同的意义。在之前的一篇报道中研究了100nm AgNPs作用下LDH的增强释放(Kim et al。gydF4y2Ba2012gydF4y2Ba)，可以解释为银离子的释放作用，银离子通过金属硫氨酸的形成和基因表达干扰诱导细胞毒作用(Foldbjerg等。gydF4y2Ba2012gydF4y2Ba)。此外，这可能与细胞摄取纳米颗粒形式的AgNPs有关，据报道，AgNPs高于肺正常和癌细胞通过内吞作用释放的离子，影响细胞代谢(Cronholm et al.)。gydF4y2Ba2013gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

同样，离子在细胞的细胞质环境中释放，ROS的释放会增强，从而引起氧化应激。本研究通过评估ROS生成(DCF水平表示)和脂质过氧化水平来研究氧化应激;目前的研究结果显示，山奈酚包被AgNPs在抗氧化剂谷胱甘肽的消耗下引起的浓度依赖性氧化损伤，就像DOX在HepG2细胞中的作用一样。此前有报道称，人长肝细胞暴露于AgNPs后，会诱导ROS产生，GSH水平降低(Piao等。gydF4y2Ba2011gydF4y2Ba)。AgNPs的大小在其作用模式中起着重要作用，因为它影响着AgNPs的细胞摄取。据报道，较小的具有较大表面积的NPs更容易溶解并释放离子(Johnston等。gydF4y2Ba2010gydF4y2Ba)。而包被的200 nm AgNPs可被细胞内吞作用以更高的水平上取，诱导细胞反应的不同分子机制(Fehaid和TaniguchigydF4y2Ba2019gydF4y2Ba)。因此，研究细胞内ROS生成是nps诱导毒性的一个重要指标，可以被认为是毒性级联中的第一个事件(Lee等。gydF4y2Ba2011gydF4y2Ba)。在NPs对细胞产生高ROS释放的情况下，如本研究中所发生的，由于细胞抗氧化(GSH)能力的耗尽，细胞最终会进入程序性细胞死亡(凋亡)(Li et al。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba)。因此，HepG2细胞暴露于山奈酚包裹的AgNPs后，凋亡标记物(Bax, Cyt-c, P53和caspase-3)和抗凋亡标记物(Bcl-2)被评估。我们的研究结果显示，山奈酚包被的AgNPs诱导HepG2细胞凋亡，通过降低Bcl-2，增加Bax和Cyc-c水平，激活caspase-3，这是由于线粒体膜的破坏，并促进p53介导的细胞周期阻滞，从而显示出抗癌作用。这些发现与之前的一项研究一致，该研究得出的结论是，基于甜菜根的AgNPs可以诱导人类血肿来源细胞系的凋亡(Bin-Jumah et al。gydF4y2Ba2020gydF4y2Ba)证实了绿色合成AgNPs的潜在抗癌作用。gydF4y2Ba

关于山奈酚的作用，有报道称它可以诱导人乳腺癌细胞系的细胞周期阻滞和p53磷酸化介导的凋亡(Choi和AhngydF4y2Ba2008gydF4y2Ba)。还建议同时使用DOX和山奈酚作为联合治疗，因为它们能够放大毒性作用和氧化损伤诱导的胶质母细胞瘤细胞凋亡(Sharma等。gydF4y2Ba2007gydF4y2Ba)。有趣的是，在目前的研究中，山奈酚可以通过氧化应激介导的HepG2细胞凋亡与AgNPs一起显示协同抗癌作用。gydF4y2Ba

癌细胞可以通过转移在全身扩散，在大多数情况下增加预后差的癌症患者的死亡率(Tian et al。gydF4y2Ba2020gydF4y2Ba)。大多数抗癌药物侧重于抑制细胞增殖和诱导细胞死亡;然而，针对癌细胞的迁移和入侵能力是癌症治疗的一个很好的方法(LevingydF4y2Ba2005gydF4y2Ba)。因此，在本研究中，我们研究了山奈酚包被AgNPs对HepG2细胞迁移和侵袭的影响。我们的研究结果表明，山奈酚包被AgNPs可以在一定程度上抑制HepG2细胞的迁移和入侵能力，这与DOX的作用没有太大区别。这一数据支持了之前的一份报告，即植物性AgNPs在乳腺和结直肠细胞系中具有抗转移作用(Khan et al。gydF4y2Ba2021gydF4y2Ba)。另一方面，山奈酚本身可下调AKT和Focal adhesion kinase (FAK)转导，抑制肾细胞癌的迁移(Hung等。gydF4y2Ba2017gydF4y2Ba)。总之，很明显，生物基山奈酚和纳米银之间的组合可以增强它们在HepG2细胞系中的抗转移作用。gydF4y2Ba

本研究总结了山奈酚包被AgNPs通过氧化应激介导的凋亡和细胞周期阻滞对肝癌(HepG2)细胞的潜在抗癌作用。因此，我们的研究揭示了AgNPs引起细胞凋亡的机制。建议在癌症治疗中使用绿色合成银纳米颗粒代替化疗药物，以获得预期的效果，毒性最小。需要进一步的体内研究来支持这项研究。gydF4y2Ba

本研究中使用和/或分析的数据集可根据合理要求从通讯作者处获得。gydF4y2Ba

作者要感谢沙特阿拉伯利雅得沙特国王大学的研究人员支持项目号(RSP2022R177)。gydF4y2Ba

本研究由沙特阿拉伯利雅得沙特国王大学的研究人员支持项目号(RSP2022R177)资助。gydF4y2Ba

作者及隶属关系gydF4y2Ba

1. 沙特国王大学理学院动物学系，利雅得，沙特阿拉伯11451gydF4y2Ba

   Nouf M. Alyami & Rafa AlmeergydF4y2Ba

2. 法赫德国王医疗城牙科专科，利雅得，11451，沙特阿拉伯gydF4y2Ba

   Hanadi M. AlyamigydF4y2Ba

贡献gydF4y2Ba

NMA和RSA设计了项目，进行了实验，起草和编辑了手稿。NMA和HMA分析数据，解释数据，起草和编辑手稿。HMA提供了化学品和试剂。所有作者都阅读并批准了最终的手稿。gydF4y2Ba

相应的作者gydF4y2Ba

对应到gydF4y2BaNouf M. AlyamigydF4y2Ba．gydF4y2Ba

伦理批准并同意参与gydF4y2Ba

不适用。gydF4y2Ba

发表同意书gydF4y2Ba

不适用。gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

作者宣称他们之间没有利益冲突。gydF4y2Ba

出版商的注意gydF4y2Ba

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